Техника за получаване на основни среди култура

Културелна микроби в лабораторни състояние-вия Приготвена среда, като се вземат предвид хранителните нужди на всеки вид поотделно. Средата в състава трябва да съдържа въглерод, водород, кислород, азот, фосфор, сяра, магнезий, желязо, микроелементи и biostimulants.

Разграничаване природен хранителна среда (мляко, яйца, картофи и др. П.), изкуствен направени от животински продукти или растителност-ЛИЗАЦИЯ произход isinteticheskie (Чапек среда, Sabouraud). Консистенцията на средата може да бъде течна, полутвърда и плътен.

За получаване на гъста течност се прибавя към течната среда на агар-агар или желатин. Агар е продукт на изсушения вид водорасли ahnfeltia, състоящ се главно от полизахариди. В студена вода агар набъбва и омекотява в гореща (90-100 ° С) се стопява, образувайки лепило-подобна маса. Втвърдени агар при 40 ° С за да се образува желе. Като хранителен агар микроби употребявани.

Желатинът се произвежда при разлагане на кожата, костите и сухожилията на животни. При нагряване с вода образува колоиден разтвор на желатин, втвърдяващи се при 18-20 ° С в хомогенна колоиден желе и раз-plavlyayuschiysya при 25-27 ° С

На практика обикновено се използва бактериологично медии от животински и растителен произход, съдържащи пептони, месни Екстракти, кръв, серум, жълт въглехидрати и т. П.

Основни хранителни вещества трябва да се съдържат в средата, в достъпна форма и в определени пропорции.

Хранителна среда трябва да бъдат стерилни, прозрачни (отглеждат върху тях MD микроорганизмите, които трябва да бъдат ясно видими и имат определен рН разделен) (следва да се предвиди получаване на чисти култури от микроорганизми).

Съхранявайте готови среда на хладно място в херметически затворени шкафове или чекмеджета, които не позволяват да бързо изсушаване. Постоянно се съхранява между микробите се развиват зле или не расте.

Хранителна среда могат да бъдат разделени в три групи:

1) стандарт (универсална) - предназначени за отглеждане на повечето микроби;

2) специално избираем, изборът - са предназначени да растат тип само определени крак на микроби, растежа на други микроорганизми в тези среди се потиска;

3) диференциална диагностика - предназначени за изследване на биохимичните свойства на микроорганизми за целите на диференциация на различни видове микроорганизми.

Standard медийна култура

Месо-пептон бульон (ВСН). Съставът на ВСН включва месо вода, пептон и сол. За да се подготви месо за използването на водите и на прясно месо или добитъка коне. Безплатна месо от костите, мазнината и сухожилия и премина през месомелачка. Получената кайма излива вода в съотношение 1: 2 (например, 1 кг кайма се излива 2 литра вода). Поставете за 18-20 часа на хладно място (4-6 ° С), след това се нагрява под обратен хладник в продължение на един час и се филтрува през памук-марля филтър. Мляно преса, към филтрата се прибавя вода до първоначалния обем, излива се върху него колби или бутилки и се стерилизира в автоклав при налягане 0,1 МРа в продължение на 30 минути. Или излива два пъти количеството на водата се вари Techa зададени часа, оставя се да се охлади, филтрува се през памук марля филтър. Мляно преса, към филтрата се прибавя вода до първоначалния обем и се стерилизира за 30 минути при налягане от 0.1 МРа.

При готвене месо вода се появява на повърхността на течността на количеството на мазнините, които достатъчно количество Димо престой.

За получаване на месо ВСН вода прибавя 1% пептон и 0.5% от химически чист натриев хлорид, варени в продължение на 10 минути, филтрува се през хартиен филтър, довежда се до рН 7.2-7.4 чрез добавяне на алкален или натриев бикарбонат и отново кипи в продължение на 10 минути. Филтруваният бульон трябва да бъде с цвят на слама и кристално чист. Бульон дозира в епруветки и колби бяха затворени с тапи памук свързани пергаментова хартия и се стерилизират в продължение на 20-30 минути при налягане от 0.1 МРа.

Месо-пептон желатин (NRM). За месо-пептон бульон, 10% през зимата и не по-малко от 18-20% през лятото пулверизира желатин и се загрява в tekucheparovom апарат до пълно разтваряне на желатина. Среден алкализира до рН 7.2 чрез прибавяне на 10% -ен rastvoraNaON. След охлаждане до 60 ° С се избистря яйчен белтък (в същия размер като за IPA), затопля се до 20-30 мин tekucheparovom апарат. Горещият филтрува през памук или марля филтър и се разпределя в епруветки. Steri-lizuyut фракционна 15-20 мин в продължение на три последователни дни при температура от 100 ° С

Potato сряда. Кървят големи картофи, промива се с четка под течаща вода, отстранява кора и увредените области. Грудки отново се промиват с течаща вода и се поставят в 1% разтвор на натриев бикарбонат в продължение на 2-3 часа, за да го-на децентрализация кисела среда. Картофени сонда нарязани ленти, чиито диаметър трябва да съответстват на ширината на ДДС тръби. Лентите се поставят в чаши с вода и нарязани диагонално на две части, сухо vayut филтърна хартия и се поставят в епруветка на половини с прихващане на дъното (долната част на тези тръби тече водата освободен по време на стерилизация). При липса на специални тръби, използвани обикновени Най тръби чрез поставяне на дъното на чашата или дървени пръчки Най, и върху тях - картофи. Стерилизира при свръхналягане 0,1 МРа в продължение на 20-25 минути.

Пептонна вода. Подгответе по различни начини. В 1 литър дестилирана вода се разтварят 5 г химически чист натриев хлорид и 10 г пептон и STE-rilizuyut в автоклав при налягане 0,1 МРа в продължение на 10 минути. За растежа на гнилостните бактерии, получени в пептонова вода малко по различен начин в 1 литър от ди-stillirovannoy вода се разтваря 30 г пептон. Форма А-стерилизира при свръхналягане 0,1 МРа в продължение на 20 минути. Концентриран glyukozopeptonnaya сряда. В 1 литър вода се разтваря 100 г пептон, и 50 г натриев хлорид, нагрява се до кипене, филтрува се, 50 грама глюкоза, се регулира до рН 7.6 7,4- (като се използва наситен разтвор на карбонат на сода), излива се в 10 мл колба и колби от 250 мл капацитет и се стерилизира с поплавъци 3 дни с течаща пара в продължение на 30 минути. Разведен glyukozopeptonnaya сряда. В 1 литър вода се разтварят 10 г пептон и 5 г натриев хлорид, загрява се до кипене и се прибавя 5 г глюкоза. Средата се довежда до рН 7.4-7.6, излива се в 10 мл ампули и се стерилизира с поплавъци 3 дни с течаща пара в продължение на 30 минути.

Суха хранителен агар. Той съдържа риба или месо бульон, агар, натриев хлорид и фосфат. За да се прибавят 5 г агар на прах 100 мл солна студена дестилирана вода. Основно разбърква и се нагрява при разбъркване до пълно разтваряне на агара, избягване на залепване. Когато е необходимо, разтворът се филтрува, пълни в епруветки и се стерилизира при свръхналягане 0,1 МРа в продължение на 20 минути.