Микроби инструкция (микробиология - Merck култура медии - суха хранителни среди - в списъка

На хранителна среда, Merck, Германия (Merck KGaA)

Опаковка - 500 гр

Околна среда за броене на бифидобактерии в млечните продукти

Бифидобактерии - с анаеробна бацил аспорогенен грам-положителни. Комбинацията от казеин пептон и екстракт от дрожди е богата на хранителна основа за отлична растеж на бифидобактерии. Добавяне на магнезиев сулфат възстановява увредените клетки бифидобактерии. Амониев сулфат е източник на азот, калиев дихидрогенфосфат и калиев хидрогенфосфат буфер средата се поддържа при неутрално рН. L-цистеин е редуциращо средство осигурява необходимото анаеробни условия в средата.

Галактоолигозахарид TOS е специфичен растежен фактор за всички бифидобактерии, докато други млечнокисели бактерии не могат да се разпореждат на олигозахарид. В комбинация с натриев пропионат, което значително инхибира растежа на едновременното микрофлора, TOS пропионат агарна среда е високо селективен за изолиране на бифидобактерии.

мупироцин литиев инхибира растежа на лактобацилите, lactococci, стрептококи и leykonostoka без това да повлияе на растежа на бифидобактерии. Типични микрофлора мляко инхибира мупироцин литий. Околна среда въз основа на TOS пропионат агар и мупироцин литиево е толкова селективно, която ви позволява да се определи бифидобактерии без да е необходимо по-нататъшно потвърждение.

Пептон от казеин - 10,0; дрождев екстракт - 1,0; КН 2РО 4 - 3,0; K2 НРО 4 - 4,8; (NH4) 2 SO4 - 3,0; MgSO 4 * 7H2 О - 0,2; L-цистеин - 0,5; натриев пропионат - 15; 10 - TOS галактоолигозахарид агар - 15.0.

Разтваря се 62,5 грама в 950 мл дестилирана вода и се загрява в кипяща водна баня или течащи пара с често разбъркване до пълно разтваряне. Околната среда е чувствителна към топлина, трябва да се обработва в автоклав, на малки порции. Например, 95 мл или 190 мл среда на разтваряне се прехвърлят в подходящи флакони и автоклавират при 115 ° С в продължение на 15 минути. След това средата се охлажда бързо до 48 ° С на водна баня. След автоклавиране средата стане леко мътна, но се извършва при охлаждане до 48 ° С на водна баня. База среда остава стабилен в продължение на 4 часа при намиране на водна баня при 48 ° С рН 6.7 ± 0.2 при 25 ° С Получаването на медиите жълтеникави прозрачен.

Селективно mupiratsina литиев добавка се предлага в лиофилизирана форма (Kat.N1.00045.0010). Всеки флакон съдържа 25 мг литий mupiratsina изчислени за 500 мл средни TOS-MUP. За получаването на селективни добавки се добавят към флакона 25 мл стерилна дестилирана вода. Внимателно се разбърква до пълно разтваряне на утайката.

Направи асептични условия в 5 мл MUP селективни добавки до 95 мл на базова среда (190 мл базова среда трябва да се добавят 10 мл селективен добавки MUP). Среден е в разтопено форма на водна баня при температура 48 ° С Когато се прави селективни добавки да се избегне образуването на въздушни мехурчета в средата, която среда може да предизвика окисляване. TOS-MUP агар, съдържащ 50 мг / л mupiratsina литий. След добавяне на литиев mupiratsina среда трябва да се използва веднага.

Тестови проби са изготвени в съответствие с международните стандарти ISO 8216 / IDF122 (сухи млечни продукти) или ISO 7889 / IDF117 (кисело мляко). Всяка проба от 10 г се суспендира в 90 мл разреждане разтвор (0.25% концентрация разтвор на Рингер). Подготовка серия от десеткратни разреждания на 0.25% на базата на разтвор на Рингер, температурата на разтвора е 20 ° С трябва да се избягва въздушни мехурчета при разбъркване, като бифидобактерии са убити чрез контакт с атмосферния кислород. С цел да се намали значително риска от повреда на Bifidobacteria клетки от времето на получаване и до първото засяване разреждане в агар не трябва да надвишава 15 минути.

засяване метод в агар

Засяване проба на TOS-MUP агарна среда се извършва чрез посяване на дълбочина. За 1 мл проба или десет-кратни разреждания се прехвърля в празен блюдо на Петри и се смесва с 15 мл среда, охлажда се до 48 ° С При прибавяне на пробата и околната среда се опитват да избегнат въздушните мехурчета улавяне среда.

Непосредствено след втвърдяване на агарни плочи обръщат и инкубират при анаеробни условия (анаеробна култура апарат Anaerojar пълен с пакет газ генерираща Anaerocult ® -А за създаване анаеробни условия) в продължение на 72 ± 3 часа при 37 ° С в анаеробни условия трябва да се следи с помощта на подходящи индикатори анаеробни условия (Anaerotest ®).

Всички плочи и 300 колонии се преброяват. Bifidobacterium растат върху плаки, под формата на бели колонии с миризмата на оцетна киселина. морфология на колонията могат да се различават значително от лещовидния за кръгли колонии от агар и звездни нагоре kleveropodobnyh колонии повърхността на плочките. Диаметър на колония е 1-4 мм.

За да потвърдите, колонии, необходими за микроскопия. Бифидобактерии - тя се придържа неправилни форми, които са видими в x1000 увеличение под микроскоп фазов контраст. Алтернативно, може също да предостави фруктоза 6-фосфат изпитване fosfoketolazny типични колонии отгледани.

Преброяване на броя на колониите на бифидобактерии (бели колонии с миризмата на оцетна киселина), отгледани върху агар TOS-MUP, умножена по степента на разреждане на пробата, за да се получи броя на Bifidobacteria в 1 г от пробата.

Суха културална среда се държи при температура от 15 до 25 ° С на сухо място в плътно запечатана опаковка и може да се използва до момента магазин отбелязан върху опаковката. Подготвената среда е стабилна основа в продължение на 3 месеца, когато се съхраняват между 2 и 8 ° С, когато се съхранява във флакон (защитен от изсушаване) и на тъмно място. Селективно добавка след добавянето на вода е стабилен в продължение на 2 седмици, при съхранение в хладилник от 2 до 8 ° С и 3 месеца, когато се съхранява при -20 ° С

Най-добър растеж на бифидобактерии в агар TOS МУП