Методи за бърза диагностика на вирусни инфекции общи - studopediya

Група 2 - изолиране на вирус от клинични материали, индикации и идентификация (вирусологичен диагноза).

В повечето случаи, концентрацията на вируса в клиничен материал е недостатъчна за бързо откриване на вируса или неговите антигени. В тези случаи се използват вирусни диагностика. Тази група от методи отнема време, труден, често със задна дата. Въпреки това, е необходимо вирусологично диагноза за инфекции, причинени от нови видове вируси, или когато не е възможно да се диагностицира чрез други методи.

За вирусологичен диагностичен лекар трябва да осигури необходимите поемане на материал пробите в съответната фаза на заболяването, доставянето им в лабораторията, предоставяща диагностични лаборатории необходимо клинична информация.

Материал за вирусологичен изследване при заболявания съпроводени с диария или други стомашно-чревни разстройства, предполагащи вирусна етиология (хепатит А, ротавирус и ентеровирус инфекция), са пресни партида от изпражнения. При заболявания на дихателните пътища (инфлуенца, параинфлуенца, RS-инфекцията, аденовирус инфекция, и др.) Материал за изследване е най получен чрез аспириране на слуз тампони. Насофаренгеално тампони са по-малко информативни. В присъствието на везикуларен обрив (HSV) инфекция е материал за изследвания флуид игла аспирират от везикули. Когато петехии и makulo папулозен обрив - като проба слуз от назофаринкса и изпражненията. Ако подозирате, че един neyrovirusnyh инфекции (полиомиелит, arboviral инфекции) за вирусологично изследване трябва да отнемат слузта от носа и гърлото, изпражненията и гръбначно-мозъчната течност. За диагнозата на заушка и бяс материал е слюнка. За предполагаеми tsitomegalo- papovavirusnye снимки и инфекция може да бъде урина. Опитите да се изолират вируса от кръвта могат да бъдат предприети в случай на съмнение за инфекции, причинени от някои арбовируса, херпесни вируси. биопсия мозък може да се проведе при диагностицирането на херпесна енцефалит, SSPE, прогресивна рубеола паненцефалит, болест на Кройцфелд-Якоб и др leukospongiosis.

Състави назофарингеални слуз или изпражнения се поставят в транспортна среда, състояща се от физиологичен разтвор, допълнена с антибиотици и малко количество протеин или животински серум. Материалите могат да се съхраняват при 4 ° С не повече от 48 часа. Дълго съхранение изисква температури -70 ° С

Изолирането на вируса от клиничен материал се извършва от неговата ваксинация в клетъчна култура или пилешки ембриони ги заразяват лабораторни животни (вж. Virus Отглеждане).

Грипен вирус следва да се разпределят чрез ваксинация на вируса на материалите, съдържащи в околоплодната или алантоисно пилешки ембриони. За да се изолира Coxsackie вирус, вирус на бяс, арбовируса много, аренавируси, препоръчани интрацеребрално и интраперитонеално инокулиране на новородени мишки материал.

индикация Virus в клетъчна култура, извършена от CPP, RIF, RGA, RGAds. Много ентеровируси причиняват ранна CPP (няколко часа). Цитомегаловирус, аденовирус, рубеола вирус причинява CPE в рамките на няколко седмици, а понякога е необходимо да се прибегне до получаване субкултура. Наличието на синцитиуми показва наличието на вируси, като например MS, морбили, паротит, херпес вируси.

Идентификация на вируси, избрани в тези системи се извършва с помощта серологични методи. Такива серологични тестове като тест хемаглутинация инхибиране, RN, RTGAds използват само за вирусни инфекции. RSK, TPHA, ELISA, RIA, IP, RP и др. Използва се както за диагностика на вирусни инфекции и инфекции, причинени от други патогени. Вече е широко използвани техники на молекулярната диагностика: MG PCR.

Схеми 2 и 3 е вирусологичен диагноза на SARS и чревни инфекции.

Група 3 - серологична диагностика на вирусни инфекции.

След серологично изследване рядко позволява диагностика на вирусни инфекции (например ХИВ инфекция). В повечето случаи, серологичната диагностика изисква сдвоен серум, взети по време на острата фаза на болестта и след 2-4 седмици. увеличение откриване и четирикратно по титър на антитяло обикновено се разглежда като диагностичен знак на остра вирусна инфекция.

Слуз от назофаринкса лекувани с антибиотици

Фигура 3. изолиране на вируса от изпражнения, индикация им и идентификация
чревни вирусни инфекции

Група 4 - молекулярно-биологични методи за индикация, идентифициране и клониране на вируси. Проведено с цел идентифициране на вирус-специфични вирусния геном фрагменти в материала.

Молекулярно-биологични посочване на вируси в биологичен материал (точка попивателна, в сину хибридизация, сандвич хибридизация):

- Методи за молекулна хибридизация (метод microgeny). Проведено с цел идентифициране на вирус-специфични фрагменти на вирусния геном в материала. Характеризира се с висока чувствителност и специфичност. Използва се за откриване на цитомегаловирус, херпес вируси, хепатитни вируси.

- полимеразна верижна реакция (PCR) и количествен PCR.

- Western Blot - въз основа на откриване на циркулиращи антитела, специфични към антигени на вируса.

- Определяне на инфектираните с вирус клетки чрез поточна цитометрия. Използва се в HIV инфекция, инфекциозен mononuleoze, хепатит С, цитомегаловирус инфекция.

PCR е възможно да се извърши индикация вирус в материал, идентифицирането, диференциацията със свързани инфекциозни агенти, генотипизиране на вирусни изолати и клониране на фрагменти на генома без необходимостта от култивиране на клетките в културата.