Резус система кръвна група

(. Таблица 18.3) Най-имуногенно на пет основни антигени на кръвни групи Rh система антиген е антиген разпространението D. D в населението на България - 86% (делът на Rh-отрицателни индивиди, съответно, около 14%). Имуногенност други (второстепенен) Rh антиген система е по същество по-ниска и намалява в следния ред: с> E> C> напр.

Имунната система е Rh-отрицателни лица в контакт с антигена синтезиране D-анти-D антитела, които са клинично важен в алогенна трансфузия и бременност Rh-отрицателни жени Rh-позитивни плода (реакционни след трансфузия, хемолитично заболяване на новороденото и хемолитична, съответно). В зависимост от хаплотипа на мембраната на еритроцитите обикновено експресират молекули 10,000-30,000 D, и в някои случаи повече.

За удобство, ежедневната работа Имунохематология лаборатории изпълнения слаб D антигена са комбинирани в група D ф. чиято честота е около 1%. Тези червени кръвни клетки са малко или никакви аглутинират пълна с анти-Rh антитела в директен аглутинация.

Метод за определяне на регулираните Rh аксесоари използва стандартна универсален реагент antirezus Rh0 (D), първичните отрицателните проби са допълнително изследвани с помощта на стандартен универсален реагент анти-Rh0 "(DC) и стандартен серум Rh0- (DCE). Rh-отрицателни донор счита чиято кръв не съдържа всяка една от тези три антигени (D, с, е). този метод е ефективен и широко използвани преди развитието на диагностични комплекти на базата на моноклонални антитела.

Рецептори, съдържащи антиген D ф. Трябва да се дължи на Rh-отрицателни и те трябва да бъдат прелята само Rh-отрицателни кръв, D антиген като нормална може да предизвика такива индивиди имунен отговор.

Лицата с антиген D ф са класифицирани като Rh-позитивни донори като кръвта им преливане може да предизвика имунен отговор в резус-отрицателни реципиенти, и в случай на предварително чувствителност към антиген D - тежки трансфузия реакции. Ето защо, донор на кръв трябва да бъдат внимателно изследвани за наличие на D ф.

пациенти кръв базови Rh установи присъствието или отсъствието на антиген Г. За да се избегне грешка на вземане на процедурата на кръв и определяне на Rh съоръжения провежда два пъти. Определяне на второстепенни антигени Rh система обикновено се извършва, когато е необходимо многократни хемотрансфузии в случаите, когато получателят на серумни антитела срещу антигените от системата Rhesus, както и бременните жени.

Резултатът от определянето на резус-принадлежността на кръвта на пациентите, записани в специален регистър, а на формата с датата и се подписва от лекаря, който извършва определението. Тази форма се поставили в историята на заболяването с дата и подпис на лекуващия лекар.

Резултати Кръводарител Rh принадлежност вписват в специален регистър и донорска карта с датата и се подписва от лекаря, който извършва определението.

МЕТОДИ Rh АКСЕСОАРИ КРЪВ

хемаглутинация реакция в една равнина с анти-IgM D (цяло антитяло) моноклонално реагент

Определянето се извършва в родната кръв, стабилизирана с консерванти; Кръв без антикоагулант, в т. Ч., Взета от пръст. Най-ясният аглутинация наблюдава при използване на високи концентрации на червените кръвни клетки и температура около + 37 ° С, така че е желателно да се използват нагрята плоча.

Курсът на определяне:

плаката се нанася с намокрената повърхност по-голяма капка (около 0.1 мл) на реагент;
Следващата поставя малка капка (0,01-0,05 мл) на кръв се изследва;
смесване на кръв с реагент със стъклена пръчка;
10-15 да се разклаща плоча за 20-30 секунди;
Реакционната аглутинация започва да се развива в рамките на 10-15 с ясно изразена krupnolepestkovaya аглутинация настъпва в рамките на 30-60 секунди. Резултатът трябва да се счита за аглутинация 3-та минута, като с еритроцити, носещи антиген D ф. Реакционната аглутинация настъпва бавно.

Наличието на аглутинация показва наличието на антиген в тест еритроцити г (Blood - Rh-позитивни). Липсата на аглутинация показва, че изследваните червените кръвни клетки не съдържат антиген D (кръв - Rh-отрицателни). В случай на слабо аглутинация направи предположението за наличие на антиген на еритроцити слаб D фенотип и изследване на еритроцити в индиректен тест антиглобулиновия (непряка Coombs), използвайки IgG (изходен) анти-D антитела.

веднага след определяне на реакцията се записва.

Определение форми на слаб антиген D (D ф) на втория етап на слепване на изследването, реагиращи с желатин в ин витро тест с анти-D IgG (непълна антитяло) моноклонално реагент

Успоредно с проучване, проведено постановка три контролни проби:

а) стандартни Rh-позитивни червени кръвни клетки;
б) със стандартните Rh отрицателни червените кръвни клетки;
в) с еритроцитите за изпитване и желатин разтвор, но без анти-D антитела.

Курсът на определяне:

въвежда в тръба, една капка (0,05 мл), свободни еритроцити от съсирена кръв или съсирек на еритроцитите, промиват без консервант;
се добавят 2 капки (0.1 мл), 10% желатин, предварително се загрява при 45-50 ° С за втечняване;
се добавя една капка реагент анти-В;
разбърквана суспензия;
инкубират в продължение на 10-15 минути на водна баня или 30 минути в термостат при 48 ° С;
се прибавя 5-6 мл физиологичен разтвор;
леко обърнати епруветка 1 - 2 пъти;
визуално (с невъоръжено око или с помощта на лупа) откриване наличието на слепва.

Аглутинацията на червените кръвни клетки показва наличието в тях на антиген D. В случай на ясно аглутинация на кръвната проба, Rh-отрицателни в зависимост от резултатите от изследванията с помощта на анти-D IgM моноклонални антитела, до заключението присъствието на ф антиген D. В случай на размита фин пясък аглутинация на кръвта трябва да се тества в индиректен тест антиглобулиновия.

По същия начин, както и моноклонални реагенти може да се използва стандартен серум алоимунна непълни анти-D антитела.

Ако има резултати посредствено определяне контролни проби Rh аксесоари трябва да бъдат повторени с други реагенти или проба от желатин. Когато еритроцитите аглутинация изследва желатин в отсъствието на анти-D-антитела могат да поемат присъствието на адсорбира върху еритроцити еритроцитни антитела анти-Rh или различни специфичности.

Определяне на Rh антигени чрез универсални реагенти

Стандартна реагент antirezus Rh0 (D) съдържа непълна поликлонално анти-D-антитяло. Едновременно с изследване на кръвни донори позоваване изследователски стандартни Rh-позитивни червени кръвни клетки от същата група или група 0 (I) и стандартните Rh-отрицателни червени кръвни клетки непременно един група проучване с кръв.

Курсът на определяне:

в долната част на тръбата 1 е стандартен капка реагент antnrezus;
Добави капка кръв се изследва (или червени кръвни клетки);
съдържанието на епруветката се смесва чрез разбъркване;
бавно завърта тръба чрез накланяне почти спрямо хоризонталата така, че съдържанието поток през стените. Такова разпределение на кръв по стените на тръбите прави реакцията по-изразен;
аглутинация настъпва в рамките на първата минута, но образуване на стабилен комплекс антиген-антитяло и различни аглутинация, а също и поради възможността за забавено реакция в присъствието на ф антиген D. контактуване на еритроцитите с трябва да се прави, когато се превръща в най-малко 3 минути реактив;
за изключване на неспецифично агрегиране на еритроцити в епруветка се прибавя 3,2 мл физиологичен разтвор и се разбърква без разклащане чрез обръщане на тръбите 2-3 кратно;
Оценяването се извършва визуално.

Наличието на аглутинация под формата на големи люспи на червените кръвни клетки в контекста на просветлени течност показва Rh-позитивни изследваните кръвни доставки.

Липсата на аглутинация (ин витро хомогенно оцветена течност) - знак на Rh-отрицателни кръвни доставки изследвана.

Резултатът се счита като истински след проверка на контролните проби, т.е. с положителен резултат със стандартните Rh-позитивни червени клетки и липсата на аглутинация със стандартни Rh отрицателни червени кръвни клетки, един група проучване с АВО кръвната система.

Непряко тест антиглобулиновия (индиректен тест на Coombs) като се използва (изходен) анти-D антитела

Успоредно с проучването тествани кръвни проби, мониторинг проучвания със стандартни Rh-отрицателни червени кръвни клетки.

Аглутинация на еритроцити третира с протеолитични ензими, IgG (непълно) анти-D-антитела

За подобряване на директен аглутинация на еритроцити в солен среда се използва за предварително третиране еритроцитни протеази (протеолитични ензими). Бромелин, papaynom, трипсин и т.н. Това увеличава чувствителността на метода, включително по отношение на слабия формата на антигена D. Методът се използва в автоматизираните системи за определяне на групи кръв. Отличителна черта на този тест, което възпрепятства използването му за рутинна фенотипизиране червени кръвни клетки, Prozone явление - аглутинация инхибиране излишък на антитяло. За да се избегне Prozone явление е необходимо да се осигури стандартна обработка ензими концентрация на еритроцитите и се наблюдава анти-D антитела - препоръчва от производителя.

Общо страници: 10