Определяне на концентрацията на хемоглобина
Най-важните методи за определяне на концентрацията на хемоглобин - колориметричен. Те са широко използвани в практиката поради своята простота и достъпност.
метод хематит (метод Sali). Въз основа на превръщането на хемоглобин когато се добавя към кръвта hlorgemin солна киселина (хлорид хематит) на кафяв цвят, интензитет на цвета е пропорционален на съдържанието на хемоглобин. Полученият разтвор хематит хлорид се разрежда с вода до стандарт за цвят според известна концентрация на хемоглобин.
Определянето се извършва с опростен колориметър - gemometre Сали. Това устройство се състои от пластмаса с три вертикални статив крикове. странични слотовете са 2 затворени тръби със стандартен течност. вторични жак gemometra Зареденият отворен нагоре фракциониран стъклена тръба със същия диаметър като стандарти в цвета. В мерителна тръба има скала с деления, показващи количеството на хемоглобина в грамове на 100 мл кръв, т.е. в гр Процент (Z%). Когато gemometre имат специален пипета за вода и разбъркващ прът.
В мерителна тръба излива на делене белязан номер "двегр%" (нисш кръгъл марка) 0.1 гр% разтвор на солна киселина.
След получаване на кръв в капилярна пипетата върху марка "0.02 мл" смучене в устата чрез гумена тръба (уверете се, че колоната на кръв приключи точно на нивото на етикета не е разрушен и въздушни мехурчета). Избърсване на външната страна на върха на вълната на пипета, това натопи в епруветка с 0.1 грама% разтвор на солна киселина и внимателно разпенени кръв. Многократното всмукване и издухване topsheet пипета изплакване течност. Епруветката се разклаща и забележи момента, поставени в статив няколко пъти. За пълно превръщане на хемоглобин хлорид хематит изискват най-малко 5 минути. След 5 минути gemometr повишава до нивото на очите, и сравняване на цвета на тест течност със стандартите за цвят. Обикновено (освен ако не изключително тежка анемия) е по-тъмен от стандартни тръби. Използване на не-фракциониран пипетата на тестовия разтвор се прибавя на капки дестилирана вода и се разбърква със стъклена пръчка и се сравняват със стандартите. Веднага след като цвета на течността на пробата ще бъде идентично на стандартите за цвят, казват какво мащаб разделяне съответства на нивото на течността (в долния менискус) ин витро.
Индустрия произвежда gemometry съдържащ грам-процента мащаб.
За идеално скорост като кръвна концентрация на хемоглобин, равна на 16,67% г, или 166,7 грама / L.
Ако всички правила gemometrom работят с един и същ пациент в определянето на хемоглобин в кръвта на различни части от различни резултати, получени в рамките на ± 0,3 грама% (3 г / л).
метод Tsianmetgemoglobinovy е най-точни, повечето страни, приети като стандарт.
Тя се основава на превръщането на хемоглобин в cyanmethemoglobin когато се добавя към кръвта реагент. концентрация Cyanmethemoglobin се измерва фотометрично. Както разтвор използване Drabkin реагент (NaHCO3 - 1 гр, KCN - 0,05 г, К3 [Fe (CN) 6] - 0,2 г дестилирана вода, - до 1 литър) или всяка друга с подобни ефекти.
Под влияние на жлезите sinerodistogo калиев хемоглобин се окислява до метемоглобин (Hb), който след това се превръща с помощта на калий в цианиново cyanmethemoglobin (hemoglobincyanide). Най-общо разреждане на кръвта в реагент на Drabkin - 1. 250 (0.02 мл кръв и реагент 5 мл). След 20 мин, необходими за пълно превръщане на хемоглобин в hemoglobincyanide, ekstiktsiyu измерва при дължина на вълната 540 нм и с дебелина на слоя 1 cm срещу вода на SF-4 или FEC-M и като photoelectrocolorimeter.
В момента създадена силни стандарти tsianometgemoglobinovye в ампули, което съответства точно определена концентрация на хемоглобин.
Получените разтвори бяха изследвани за photoelectrocolorimeter и изготви стандартна крива чрез нанасяне на оптичната плътност от скалата на инструмент (червени фигури барабан) по ординатата, и концентрацията на хемоглобин в грамове на литър по абсцисата. създаване на работен лист въз основа на кривата на калибриране, което показва каква е концентрацията на хемоглобин, съответстваща на това показание FEC.
Там колориметри, специално предназначени за определяне на хемоглобин - hemoglobinometers. Повечето от тях използват tsianmetgemoglobinovy метод. Gemoglobinometers могат да работят самостоятелно или във връзка с броячи на частиците. Така че, globinometer "ботуша" (Франция), който може да се използва самостоятелно, дава преки доказателства за хемоглобин в грамове на 100 мл. Инструментът има висока точност и възпроизводимост г ± 0,1% (1 г / л).