микробиология протокол №5

Определя чувствителност към антибиотици

1. Определяне на чистотата на изолирани култури.

Чистотата на културата показва еднаквост на растежа и наличието на микроорганизми в получаването на един вид. Ето защо, когато растежа на микроскопско изследване, имайте предвид интензивността на (оскъдна, умерена, изобилие), прозрачност, цвят обърнете внимание на своята хомогенност. Приготвя фиксиран лекарствен докосва линия дъно, средната и горната част на касата, цвета и Грам promikroskopiruem.

Равен посяване чиста култура при проучване на "пъстър номер": полу Хис среда с индикатор BP, въглехидрати (глюкоза, лактоза, манитол) и ВСН.

Перес за извършване на полу-среда бактериологична игла или резервоар. диаметър контур на 1 мм дебелина агар пробождане, преди да достигне долния край на тръба 1 мм. Чрез субкултивиране в течна среда линия с култура биомаса изследваните се потапя в течността да трия стената на тръбата и отмиват. След това, между стената на индикаторните хартии тръби и запушалка пуснати за определяне на водороден сулфид и индола, предотвратяване на овлажняващи тръби ръбове и тръба хранителна среда

Основата за изследване на биохимичните свойства на микроорганизми за целите на идентификация е да се определят междинни и (или) на крайните продукти на обмяната на веществата. Таксономично значение са saccharolytic бактерии и протеолитични свойства, които определят в диференциални диагностични носители, включени в "броя на пъстър".

Определяне saccharolytic имоти, направени от средите съскане. Техният състав: пептонова вода, 1% въглехидрат Andred индикатор (BP или други подобни.) 0.3-0.5% агар, ако средата е полу-твърдо вещество; Ако течната среда, потопените поплаваците тръба (кратко стъклена тръба, запечатани в единия край).

Определения протеолитични свойства се произвежда по пептонна вода (MF) или месо-пептон бульон (ВСН), това образуване на крайните продукти на метаболизма на протеини (пептон, аминокиселини) - индол, а в някои случаи амоняк.

формиране на индол се придружава от оцветяване розов цвят на индикатора хартия, импрегниран с разтвор на оксалова киселина (метод Morel); образуването на сероводород - потъмняването на индикатор хартия, импрегнирана с оловен ацетат; образуването на амоняк - син цвят лакмусова хартия.

3.Posev изследване на култура в колона на полутечни агар.

Инокулира изследването на културата в колона от агар пробождане полутечни от резервоар. игла или резервоар. контур 1 мм в диаметър.

Засяване на културата в колона на полутечни агар за определяне на неговата връзка с молекулен кислород, и по този начин индиректно да образуват представа за това как да се получи енергия.

Определяне antibiotikogrammy проучване култура

За определяне антибиограма подготви култура суспензия при изследване в стерилен физиологичен разтвор, и се довежда до 0.5 McFarland мътност. За инокулиране с помощта на стерилен памучен тампон, който се потапя в тръбата с кашата, завъртането, така че да е равномерно напоени, и след това се извива сухо на стената на тръбата над нивото на течността от Кърлинг. Засяване култура чиния със среда AGV извършва движения в три посоки под ъгъл от 60 °, при всяко завъртане на чашата около оста си. На последно място, да направи няколко въртеливи движения тампон по ръбовете на повърхността на плочките. Тогава културите да съхнат в продължение на няколко минути при стайна т ° в чаши със затворени капаци. Дискове с антибиотици се прилагат не по-късно от 15 минути след инокулация с стерилни пинсети, или от автомати разстояние от диска към ръба на чашата и между дисковете трябва да бъде 15-20 мм. По този начин, едно 100 mm блюдо се поставя не повече от шест диска. Всеки диск трябва леко да се натисне с пинсети, за да се гарантира, контактите си с хранителна среда. Чаши веднага след смесване дискове подписват и поставят с главата надолу в инкубатор при 37 ° в продължение на 18-20 часа.

1. Определяне на чистотата на изолирани култури.

Проверка на тръби с агар наклон, се установи еднакво увеличение на интензивността - мек, прозрачен цвят.

Направен фиксирано лекарство (Грам метод петно). В микроскопия образец показаха грам пръчки на червено.

Perfect засяване нето култура проучване "пъстър номер": полу Хис среда с индикатор BP, въглехидрати (глюкоза, лактоза, манитол) и ВСН. изследвания продължават

3.Posev изследване на култура в колона на полутечни агар.

Инокулира изследването на културата в колона от агар пробождане полутечни. изследвания продължават

4. Определяне antibiotikogrammy култура в процес на проучване.

Реализирани метод диск дифузия. Изследвания продължава.

Създадохме чистотата на изолираната култура - грам пръчки на синьото.

Определяне на биохимични свойства и чувствителност към антибиотици - проучване продължава.