Лаборатория - диагностициране на бруцелоза
Целта на класа: да проучи методите за диагностициране на бруцелоза.
Материали и оборудване: безиглена инжектор или набор от изследвания за алергична комплект за определяне на BPO игли за събиране на кръв, набор от диагностика, положителни серуми, антигени, ваксини antibrucellar; бруцелин VIEV, дезинфектанти.
Място на работа: Лаборатория по епидемиология отдел.
Бруцелоза - хронично пристъпи инфекциозно заболяване на животни, причинени от бактерии от рода Brucella, който включва 6 отделни видове: бруцелозата - причинител на бруцелоза при овце и кози, Б. абортус - едър рогат добитък, Б. СУИС - свине, елени, зайци, Б. Ovis-овце, B. Canis-у кучета, Б. neotomae - от дървесни плъхове. Бруцелозата и Б. абортус да мигрират към други видове. От болните животни могат да бъдат заразени с хората, за които най-опасното причинител на бруцелоза на овце и кози.
Диагнозата на бруцелоза, се основава на резултатите от бактериологични, серологични, алергични и клинични проучвания с епизоотични данни.
Клиничните признаци на заболяването при животни са чести - аборт, артрит, бурсит, ендометрит, вагинит, орхит, епидидимит може да възникне и в много други заболявания.
Патологичните промени в бруцелоза също maloharakterny. Най-надеждна и точна диагностика, лаборатория, т. Е. Изолирането и диференциацията на паразита.
В лабораторни изследвания патоген открити от три метода: намазка, изолиране на чиста култура на изходния материал и, ако е необходимо, от биоанализите при морски свинчета.
Натривки са оцветени от Грам, Kozlovsky, Shuljak автобус, Stump. Brucella - малък Грам-отрицателни coccobacillus, подредени по двойки или купчина. На оцветяване от Kozlovsky, Shuljak автобус, Stump Brucella клетки червено.
За бактерии култура използва чернодробна месо-пептон бульон (MPPB) и чернодробна глюкоза-глицерол бульон (PGGB), картофено агар и други. Културите се поставят в инкубатор при 37 ... 38 ° С и сърфиране ... 4 на всеки 3 дни до 30 дни. В Brucella бульон да се образува единна мътност и париетална пръстен допълнително - малка пелета в долната част на тръбата. Агар расте под формата на малки полупрозрачни блестящи изпъкнали колонии сивкави. Изолираният култура се идентифицира в аглутинация (PA) на стъклото с положителен серум Brucella.
За биоанализ използвайки два морски свинчета с тегло 350 ... 400 грам, предварително тествани за метод бруцелоза серологични (отрицателен резултат при разреждане 1 RA 5).
изходен материал суспензия в стерилен физиологичен разтвор (1:10) се прилага подкожно на вътрешната част на бедрото морски свинчета при доза от 1 мл. 15, 25, 40-ия ден на прасе кръвния серум се тества в RA епруветка в разреждане 1. 10 към 1. 80. В положителен RA (в развъждането 1. 10 и по-горе) морски свинчета се убиват, материалът от тях са проучване бактериологичен метод. При отрицателни RA биоанализи се считат за отрицателни.
При опитите за масово са важни серологично и алергични диагностични методи на бруцелоза:
При говеда, як, zebus, биволи - серум: RA в епруветки, свързване на комплемента (РСК) или реакцията на дълго свързване на комплемента (RDSK) плоча аглутинация с Rose Bengal антиген - тест Rose Bengal (ВРО), пръстенът реакция с мляко (KR), имунодифузия взаимодействие с О-PS антиген (RID);
В овце, кози, сърни, благороден елен, коне, камили, серум: RA, DGC / RDSK, LSO; алергичен;
При свинете - серо: DGC / RDSK, LSO; алергичен;
При кучета и други видове - серум: RA, RSK.
Повторна оценка на животните за метод бруцелоза серологично за 15 ... 30 дни, алергичен - в 25 ... 30 дни.
Крави (юници), биволи, камили разследва независимо от срока на бременността, на овце (kozematok) и svinomatok- през 1 ... 2 месеца след раждането, млади животни от всякакъв вид - от 4-месечна възраст.
Големи и малки говеда имунизират срещу бруцелоза, тествани по начина и в сроковете, предвидени инструкция за използването на ваксини, както и оценка на състоянието им
бруцелоза заболяванията счита установен при разпределяне на култура на Brucella на биоматериал положителен биоанализ или положителни резултати от тези изследвания серологични неваксинираните животни: едър рогат добитък (биволи, як, зебу), камили и коне - едновременно в RID и RA антитяло титър от 200 IU / мл на и по-горе; овце и кози - RA с антитяло титър от 100 IU / мл и по-горе; елен (marals) и кучета с RA антитела титър 50 IU / мл и по-горе; животни от всички видове - в DGC в разреждане на серума 1 и 5 по-горе.
За положителни серологични изследвания неваксинираните животни: едър рогат добитък (биволи, як, зебу), камили, коне, - само в RA с антитяло титър от 50 ... 100 IU / мл; овце, кози, елен (marals) RA с антитяло титър от 25 ... 50 IU / мл - преразглежда след 15 ... 30 дни. При по-високи титри се счита за установено заболяване;
Ако заглавията са едни и същи, те прибягват до допълнителни изследвания (в съответствие с правилата, приети).
Заболяването се счита установен ако неуспешен бруцелоза в едър рогат добитък стада идентифицирани по-рано ваксинирани животни положително отговарят на RA с антитяло титър от 100 IU / мл и по-горе, или (II) на RNC (RDSK) при разреждане 1 и 5 по-горе.
Имунизираните стада от овце и кози разпознават дисфункционално бруцелоза ако положителен бактериологично изследване на аборт фетуси или положителен биоанализ, както и идентифициране между овена, проби и ярки животни положително реагиращи на RA с антитяло титър от 100 IU / мл и по-горе, RSK при разреждане на серума 1 и 5 по-горе.
пациенти бруцелоза при свинете признават, ако тест алергия се потвърждава положителната РСК.
Бруцелин прилага на свине от външната страна на ушната мида в доза от 0.2 мл. Реакцията се отчита при 24 и 48 часа чрез палпация на мястото на инжектиране. Пациенти с животни на мястото на алерген бележка възпалителен отговор под формата на подуване или testovatoy гъста консистенция. При здрави индивиди в локална реакция тя отсъства.
Резултатите от проучването на едър рогат добитък в RID и компактдиска са оценени в съответствие с инструкциите на формулирането и интегрирането на тези реакции.
Упражнения
1. Разглеждане под микроскоп готови продукти.
2. Опишете растежа на култура на Brucella на хранителни среди.
3. Оценка на резултатите от предварително зададената RA ин витро и KR с мляко.
4. Сложете и се вземат под внимание за бруцелоза BPO (фиг. 8).