Културни свойства на микробите

Културни особености на микроби определят от естеството на техния растеж на хранителни среди. В качеството си на постоянен за всеки вид микроб, те са важна диагностична функция.

Растежът на микроби върху твърдата среда.

За изследване на свойствата на колониите на микроби се култивират върху твърда хранителна среда в петриеви панички. Когато посевен материал се опитва да получи изолиран растежа на колония. Чаши с сеитба първо да видят с невъоръжено око или през увеличително стъкло, а след това ги поставя на сцената на микроскоп с главата надолу и да разглеждате колонии при преминаваща светлина с обектив и с малко увеличение на заострен отвор. Колониите се характеризират по размер, форма, контур ръб топография, повърхност, цвят, структура и последователност.

размер колония определя от нейния диаметър. В зависимост от диаметъра разграничи колонии точка (диаметър по-малък от 1 mm), малки (диаметър 1-2 mm), средно (2-4 мм в диаметър) и големи (диаметър 4-6 мм или повече).

Colony е правилната форма - кръг, погрешно - amoeboid, rizoidnaya - заострени, напомнящ на преплетени корени на дървета (Фигура 28).

Символи контур ръб определя, когато се разглежда колония под лупа или микроскоп ниско увеличение. Разграничаване гладки ръбове под формата на ясно определени линии и неравномерно (Фигура 29). Последно се разделя на:

печен ръб, състояща се от голям, леко заоблени или плоски зъби правилната форма;

вълнист ръб, който е малко по-различно от това, на печени, че големите зъби той, да се замъглят;

ерозира или назъбена област, състояща се от остри зъби с различни размери и форми;

фимбрии област като леко въси.

В някои случаи, ясно определена линия разделя колонията от повърхността на средата отсъства. Този край на колонията се нарича неясно.

Освобождаване (профил) се характеризира с издигането на колониите върху повърхността на културалната среда и форма контур във вертикален разрез (фигура 30). Определя се от облекчение колония с просто око или с лупа, когато се гледа отгоре и отстрани.

Отличава: 1) капка форма и куполни колонии с правилна кръгла форма изразени различна степен на изпъкналост, която във вертикален разрез е сегмент на сфера с радиус и се различават само по дължина. Колониите са леко изпъкнала радиус голямата си дължина; купол - по-малко;

2) колония плоско плосък върха, или стръмно наклонени ръбове; има форма на трапец вертикален разрез;

3) колония конус с форма на триъгълник вертикален разрез:

4) колонии с повдигнат зърното и средната ролка периферно;

5) колонии с депресия център;

6) жилището на колониите, пълзящи повърхност на средата.

Фиг. 28. Формата на колониите: а - кръг; б - кръг с печени ръб;

в - кръгла с ролка ръб; д; и т.н. - rizoidnaya; д - ръб rizoidnym;

Ами -amebovidnaya; и - филаментозен; и - сгънете; да - погрешно;

л - концентрична; m - комплекс

Фиг. 29. Острие на колония: а - гладка; б - чуплива; в - съоръжения;

R - работно колело; и т.н. - погрешно; д - мигли;

Е - блокирани; и - влакнеста; и - разклонен

повърхност проучване Colony с лупа или микроскоп при ниско увеличение. Повърхността на колонията е матирана или гланцирана до гланцирана, сухо или мокро, или гладка. Гладка колония означена с буква S на (гладка), заешки уши - буквата R (грубо), което означава, съответно "гладка" и "трудна". Механизмът на образуване на груби и фини форми на колониите поради процеса на разлика на клетъчното делене. Микробните клетки в колонии S-форма, разположени в контакт със своите странични повърхности, клетките са R-форми, при запазване на делене цитоплазмени мостове, вериги форма, които са насложени една върху друга, причиняват грапава повърхност и неравномерно ръба на колонията.

Фиг. 30. Профил на колонии: а - извита; б - crateriform;

в - бучки; R - растящи навътре в агар; г - плосък; т.е. изпъкнали;

Е - Сълзата; и - конична

цвят колония се определя от пигмент, който произвежда култура на микроби. По-голямата част от патогенни бактерии пигмент не образува, така че техните колонии са безцветно или млечен мътен цвят, подобен на опал. При преминаваща светлина, тези колонии в по-голяма или по-малка степен прозрачен. Хромогенните вид микроорганизми произвеждат колонии с различни цветове: крем, жълто, златисто оранжево, синьо, червено, лилаво, черно и др.

Структура колонии, определени в предава светлинен микроскоп при ниско увеличение, скосената отвор или леко намалена кондензатор. В пигментирани колонии и колонии, не предава светлина, тя не е определена.

Поради естеството на структурата на следните видове колони:

1) хиалин - безцветен, прозрачен, без видими дефинирана структура;

2) гранули, които, в зависимост от размера на зърната фино разделен на - и coarsegrained;

3) мустак или влакна, характеризиращ се с наличието на дълги, гъсто преплетени нишки в колония-дебел.

Колониите са хомогенни и хетерогенни. Структурата на първия еднакво във всички части, втората централна част е различно от периферните или отделните сектори имат структура различава масата почивка.

Консистенцията на колонията се определя от физическото състояние се изследва чрез докосване или изваждането й част от линия материал бактериален. По естеството на последователността на колониите са:

1) пастообразна, лесно сменяеми и размива на повърхността на хранителна среда, като масло;

2) вискозна или лигавицата, прилепващо и простиращ се над контура;

3) влакнест или жилав, плътен, отстранени от повърхността на хранителната среда под формата на еластичен филм, съответстващ на големината и формата колонии;

4) чуплива, суха, раздробяване на допир линия.

Характеристики на микробния растеж в течната среда.

Течни хранителни среди характер на микробния растеж е по-малко разнообразен, отколкото на твърда хранителни среди. Въпреки това, тук ние идентифицирахме следните форми на развитие на бактерии.

1. среда бактериалния растеж с еднакво мътност. чийто цвят остава непроменена или променена в съответствие с цвета на водоразтворим пигмент, произведено в култура на микроб. Тази характеристика растеж на много патогенни бактерии, принадлежащи към групата на факултативни анаероби.

2. дъното бактериален растеж се характеризира с образуването на утайка на дъното на епруветката с течна хранителна среда. Утайката може да бъде ограничен или изобилие kroshkovidnym хомогенни, влакнести или прахообразна форма големи флокули, вискозна консистенция, слизеста, крехки или пастообразна. Средата над утайката може да бъде прозрачен или мътен. Цветът на утайката и средата разположен над тях, определя от наличието на пигмента, произведен от културата на микроби. Ако пигментът не образува културата, на средата не променя цвета си и придобива утайка, обикновено бяло или сиво жълт цвят. Долната височината е специфичен за вида на бактериите с анаеробно дишане.

3. париетална бактериален растеж се изразява в това, че хранителната среда в епруветката е напълно прозрачен. Бактериите нарастват, образува повече или по-малко големи ронлив люспи или, обратно, компактни зърна прикрепени към вътрешната повърхност на стената на съда, с които, в зависимост от вида на бактериите се отстраняват лесно или трудно.

4. растеж на повърхността на бактериите се характеризира с появата на филм повърхността на течна хранителна среда, появата и природата на които може да варира:

а) тънък филм е мек, безцветен, има едва забележимо форма плака изчезва, когато разклащане тръбите и разклащане на средата;

б) филмът е влажна, с дебелина, ясно видими за невъоръжено око, вискозен, лигавицата последователност, той се придържа към контура и достига за него;

в) плътен филм, сух вид прилича кожени парчета и когато се опитват да улови материал се отстранява от него изцяло под формата на кръгъл диск, съответстващ на диаметъра на тръбата:

ж) плътен филм, суха, с набръчкана и понякога брадавица повърхност ръбове прикрепени към стените на съда; при разбъркване в течна или докосне бактериална цикъл е разделен на парчета, потъва дълбоко в течността.

цветен филм като културната среда зависи от пигмента, произведени от нарастващата култура на микроби. Растежът на бактерии във формата на повърхност характеристика на микробите на филм-aerofilov.

Растежът в полу-среда.

За идентифициране на характеристики на микробен растеж върху полутвърд хранителен културална среда при изследване се инокулира в колона от 0.2-0.5% полутечен агар. За характеристиките на растеж се проявява най-ясно, защита пункция прави близо до стената на тръбата. Засяване, произведена по този начин дава възможност да се идентифицират движещи раса микробите и да ги разграничат от казана.

Подвижните микроби в колоната маркирани полутечни агар причина опацификация, простиращ се на повече или по-малко равномерно в дебелината на средата.

Фиксираните плесен микробите растат само по време на пробиване на средата, припомня висулки цилиндрична или конична форма. В този случай, на околната среда е напълно прозрачен.

Биохимичните свойства на бактерии

Чрез биохимични характеристики на тествани за кислород, ензимна активност бактерии, способността за разцепване различни въглехидрати, метаболитни продукти се натрупват.

Отношение към кислорода във въздуха. По отношение на кислорода в разделена на микроорганизмите въздуха са облигатни аероби microaerophiles, факултативно анаеробни и облигатни анаеробни бактерии. От отношението на бактерии към кислород се оценява от растежа на културата чрез поставяне на инжекция в колона с хранителен агар. Аеробни развива в горната част на инжекцията анаероби - в долната част и факултативни анаероби - равномерно по време на инжектирането.

Сред биохимичните свойства на културата от най-важните определяне на тяхната ензимна активност.

Използване uglevodovi алкохоли култури на микроорганизми, се определя чрез посяване на 0,1-0,2 см тестови клетки 3 суспензия в епруветките с течна или полутечна среда, съдържаща въглехидрат и индикатор. За откриване на образуването на газ в разцепването на въглехидратите в течната среда се понижава поплавъци. Набор от медиите с въглехидрати и е показател, наречен "цвят" следващата Хис. Name "цвят" диапазон се дължи на факта, че под действието на някои ензими разцепват захар клетки с натрупване на киселина или основа, като по този начин се променя цвета на индикатора и средата, други захари не се разцепват, и цвета на средата не се променя. Хис номер съдържа среда с глюкоза, лактоза, захароза, малтоза и манитол. Дългата линия допълнително се въвежда среда с арабиноза, ксилоза, рамноза, галактоза и др. Полизахариди (инулин, нишесте, декстрин), алкохоли (глицерол, дулцитол, инозитол).

Заразените Епруветките се поставят в термостат при оптимална температура. Се отчитат при 2-4 дни (за бавнорастящи микроорганизми в 7-10 дни). Обърнете внимание на промяната на цвета на промяната на индикатора в околната среда или липсата на цвят, а появата или липсата на газ в поплавъка.

Въз основа на тези данни да сключи захар асимилира учи бактериална култура.

Протеолитична активност. Микроорганизми с протеолитична активност, втечнява желатин, мляко peptonizing. За да се определи тази функция култура тествани бактерии убождане инокулират в епруветки с желатин и култивират в продължение на 4-10 дни. при стайна температура, като се отбелязва скоростта и изтъняване характер: стратифицирана, фуния форма, везикуларен и т.н. (Фиг. 31).

Fig.31. Опции втечняват желатин

Catalase дейност. каталаза ензим образуват много аеробни микроорганизми. За провеждане на спад на проучване на 10% разтвор на водороден пероксид се прилага 24 часа микроорганизъм колония, отглеждани върху твърда среда в Петриева паничка. Изолиране под формата на кислород газови мехурчета показва наличието на бактерии в клетки на каталаза.

Естеството на растеж в млякото. Обезмаслено мляко се разрежда с вода в съотношение 4: 1, добавя индикатор бромкрезол пурпур (2 cm 3 1,6% -ен алкохолен разтвор на 1 дм 3 мляко) или лакмус (10 cm 3 4% -ен разтвор в 1 дм 3 мляко) дозира във флакони от 8-10 cm 3 и се стерилизира в автоклав при 0,05 МРа в продължение на 20 минути. Епруветки с мляко, инокулирано с бактерии проучен култура и култивирани 6-14 дни. при оптимална температура. Образуването на киселини в разцепването на лактоза микроорганизми маркира с индикатор за промяна на цвета. Ако киселината се натрупва в значително количество, то образува съсирек. Бактериите с активни протеази разцепват казеин, причинявайки пептонизация мляко.

Образуването на индол. Някои микроорганизми са способни да разцепват аминокиселината триптофан да образуват индол, който също е диагностичен функция при определяне на вида на бактериите. За определяне на индола използва метод Morel. Тръби от 8-10 cm 3 на стерилен месо-пептон бульон, допълнен с 0.01% триптофан (или без) инокулираните бактерии култура проучване. Съгласно памук щепсел усилваща лента от филтърна хартия, импрегниран с оксалова киселина. Епруветките се инкубират при оптимална температура за 24 часа. Образуването на индол долната част на лентата е оцветен в розово.

образуване на амоняк. Ammonification протеинови вещества от ензимите на микроорганизми, се придружават от освобождаването на амоняк. Тази способност на бактериите да се установи изследва чрез инокулиране на култура в епруветки с месо-пептон бульон което се инкубират в инкубатор при 37 ° С в продължение на 2-3 дни. образуване на амоняк се определя от промяната на цвета на лакмусова хартия ленти подсилени между запушалката и тръбата за врата, така че лентата не докосва културалната среда. на емисиите на амоняк, се определя от промяната на цвета на лакмусова хартия от червено до синьо.

образуване на сероводород. При микроорганизми разцепване сяра съдържащ аминокиселини (цистеин, метионин) се произвежда сероводород. За определяне на образуването на сероводород тръба се инокулира с месо-пептон бульон култура от бактерии и се изследва под запушалката усилваща лента от филтърна хартия, импрегниран с разтвор на олово ацетат. Заразените Епруветките се поставят в инкубатор при оптимална температура за 7-10 дни. сероводород ленти, определени от почерняването поради образуването на олово сулфид.