Клетъчна терапия за застойна сърдечна недостатъчност (експериментално изследване)
Значимостта на разликите, стр <0,05
Миокарда се записва дифузна дегенерация на кардиомиоцити с огнища на некроза в белите дробове - признаци на застойна хиперемия.
Този модел на застойна сърдечна недостатъчност noncoronary генезис е бил използван за изпълнение на задачата.
Търсене на оптимална доставка на клетъчен материал
Оценка на ефективността на клетъчната терапия на конгестивна сърдечна недостатъчност при различни методи за доставка до предварително определена концентрация на клетка показва метод предимство CB. Първо, най-малката загуба на сърдечни клетки в първия ден след трансплантацията (фиг. 2). Второ, значително по-добри резултати в фракция на изтласкване (фиг. 3) и морфологията на миокарда в третия.
Фиг. 2. преразпределение трансплантирани клетки от миокард на плъхове в зависимост от начина на доставка
Фиг. 3. фракция на изтласкване (%) при плъховете в зависимост от начина на доставка на присадени клетки
Плъх миокард само след KB инжекция клетка беше почти никакви околосъдови инфилтрати и дистрофични огнища на кардиомиоцитите. Този път е най-функционална, тя е била използвана, за да намерите най-функционална и безопасна концентрация на клетки.
Оценка на ефективността на клетъчната терапия на застойна сърдечна недостатъчност, в зависимост от броя на клетъчната materialapri комбиниран метод за тяхното въвеждане в сърцето
Фиг. 4. фракция на изтласкване (%) при плъхове-реципиенти 2106 и 10106 клетки и контролната група плъхове
Разликите в резултатите от ехокардиографски проучвания при плъхове получатели в 2106 и 10106 клетки бяха предварително състояние на кардиомиоцитите и микроциркулацията в миокарда. Миокардна перфузионна получатели плъхове 10106 клетки е значително по-добри в сравнение с контролната група. Също така по-висока в сравнение с плъхове, получаващи само 2106 клетки (Фиг. 5). Инфаркт на задръствания и оток в животни реципиенти 10106 клетки са по-малко забележими. Определя се по-ясно изразено интерстициален клетъчните, представена главно от ендотелни клетки и сателитни клетки, възпалителна инфилтрация отсъства. Дегенеративни промени на кардиомиоцитите са били леки.
Фиг. 5. миокарден перфузия при плъхове-реципиенти 2106 и 10106 клетки и контролната група плъхове
Получените резултати могат да се заключи, че клетъчната терапия на дифузно увреждане на миокарда с кръв застой в малки и големи циркулация значително въздействие върху морфологичния и функционалното състояние на сърцето, кръвообращението като цяло, и може да бъде независим метод или съответната опция при лечението на застойна сърдечна недостатъчност поради дилатативна кардиомиопатия. Въпреки това, крайният резултат е полезно може да бъде значително по-добре с протокола за клетъчна терапия метод DCM, KB, съдържащо клетъчен материал от клетъчната концентрация в него на не по-малко от 10,106.
Квалификация клетъчна терапия оптимален вариант (комбинирана доставка метод 10106kletok), оформен на зайци
Параметри характеризиращи сърдечната функция и морфология заешки експерименталните и контролните групи на ден 30 след клетъчна терапия значително различна. Първо, има значително увеличаване на фракцията на изтласкване (фиг. 6), обем на инсулт, както и доказателства за възстановяване на диастоличното компонент в зайци, подложени на клетъчната трансплантация. Нивото на миокардна перфузия, съгласно натрупването на радиоактивен е ясно по-висока в третираната група (фиг. 7).
Фиг. 6. фракция на изтласкване (%) в зайци 10106 реципиентни клетки и животни от контролната група
Фиг. 7. миокардна перфузия при зайци 10106 реципиентни клетки и животни от контролната група
Разликите на функционални тестове бяха инфаркт морфология на зайци в сравнение групи. Отнасяше се от тежестта на дегенеративни промени на кардиомиоцитите, инфаркт и микроциркулацията. За всички тези показатели миокарда зайци от експериментална група (фиг. 8) за предпочитане се различава от тази на контролните животни, където дистрофия кардиомиоцити записан дифузно фокална характер, сърдечно наблюдава и неравномерно кръвоснабдяване (фиг. 9). Като следствие морфо-функционално възстановяване на инфаркт на третираната група в сравнение с контролните зайци нормализира миокардна перфузия на белия дроб (Фиг. 10, 11) и голям диапазон на органи, по-специално на черния дроб (Фиг. 12, 13). Не са наблюдавани признаци на застойна хиперемия, препълване вени и възпалителни инфилтрати в черния дроб.
Фиг. 8. хистологичен разрез на фиг. 9. хистологични срези инфаркт на миокарда при зайци контролират тест група заек. Хематоксилин и групи. Оцветяване-зин. X100-зин. X100
Фиг. 10. хистологичен разрез на фиг. раздел 11. Хистологично
контрол заешки бял дроб на белия дроб заек експериментален
група. Хематоксилин и групи. хематоксилин
-зин. X100 и еозин. X100
Фиг. 12. хистологичен разрез на фиг. 13. хистологични срези
заешки черен дроб чернодробни зайци експериментален контрол
група. Хематоксилин и групи. хематоксилин
-зин. X100 и еозин. X100
Фиг. 14. криоучастъците инфаркт Фиг. 15. Confocal
заек 30 дни след микроскопия на заек. криоучастъците
клетъчна терапия (10106 клетки). атака на 30-ия ден след
Пролиферацията на капилярите с трансплантация. клетки
CD 31 клетки. Образование огнища маркиран с червена флуоресценция
повишена васкуларизация. X400 ruyuschim протеин
метод Комбинация от доставка на миокарда 10106 клетки вероятно е състоянието гарантира оптимално и сигурни механизми за индуциране на трансплантирани клетки репаративна регенерация в не-исхемична кардиомиопатия.
На плъховете модела и зайците със застойна сърдечна недостатъчност метод noncoronary генезис клетка kardioplastiki се играе за определяне на необходимите условия за успеха на процедурата.
Cell терапия DCM извършва в съответствие с протокола за доставка се получава присадката в миокарда в комбиниран начин, позволявайки без риск за живота на животното да влезе в клетката 10106 включително, това е било ефективно. 30 дни след трансплантацията, ние лесно може да видите в миокарда на трансплантираните клетки в светлината на луминесценция. Не е имало necrobiotic дифузно-kardiomitsitov фокусни дистрофични промени, признаци на микроциркулацията Нарушения на секции по светлинна микроскопия. На миокардни криоучастъците вижда активен пролиферация на капиляри.
Така, клетъчната терапия инициира репаративна регенериране на миокарда, допълват съществуващи физиологични състояния, при които тежко увреждане на миокарда е ясно недостатъчно.
Всъщност механизмът за откриване на репаративната регенерация на клетките за присадки ние я разглеждат като сложна многофакторна процес, насочено към ограничаване necrobiotic промени на кардиомиоцитите активиране на ангиогенезата, kolagenoliticheskih процеси, които ние, изглежда, е в състояние да покаже. Ние не сме сигурни, че клетките на присадката наблюдава в миокарда след 30 дни след раждането им му да участва в контрактилната неговата активност, но фактът, че тяхното присъствие, като компоненти на мононуклеарната фракция на хематопоетични стволови клетки, клетки на ендотелни прогениторни, моноцити-макрофаги Той определя подобряването на миокардната функция и свързана с нуждите на тялото си.
- Застойна сърдечна недостатъчност при плъхове и зайци, причинени от доксорубицин разработена на 30-ия ден след прекратяване му вследствие на дифузни лезии кардиомиоцити, нарушена микроциркулацията, която се проявява намален сърдечен дебит, белодробна хипертония, застой в черния дроб.
- Терапия за застойна сърдечна недостатъчност при плъхове и зайци, мононуклеарната фракция на костен мозък, независимо от начина на приложение и размера на материал доставя на клетката, подобрява сърдечната функция.
- Степента на възстановяване на миокарда на плъхове със застойна сърдечна недостатъчност, чрез клетъчна терапия мононуклеарни фракция на костен мозък зависи от предоставянето на клетъчен материал. Най-добрият вариант е комбиниран доставка, интракоронарно - vnutrimiokardialnyh осигуряване на изтласкване увеличение фракция от 27%.
- Степента на нарастване на контрактилната сърдечна функция в плъхове със застойна сърдечна недостатъчност, когато се комбинира начин на приложение мононуклеарни клетки зависи от количеството им. По-ефективна концентрация, както за безопасност и увеличава сърдечната функция е 10106 клетки в 100 мкл 0,9% NaCl. Усилване фракция на изтласкване при 10106 клетки трансплантация е 25%, докато в трансплантацията на клетките 2106 само 19%.
- Клетъчна терапия за застойна сърдечна недостатъчност в зайци чрез прилагане 10106 собствени клетки, мононуклеарната фракция на костен мозък, доставени в комбиниран начин увеличава фракцията на изтласкване, и нормализира кръвообращението в малки и големи кръга.
- Ролята на трансплантирани клетки в миокарда мононуклеарни фракция на костен мозък в механизма на редуктивно регенерация се състои в индуцирането на ангиогенеза и рестрикционни Necro-дегенеративни процеси.
- Възпроизвеждане застойна сърдечна недостатъчност може би в зайци чрез интравенозно приложение на доксорубицин в крайното дозиране на лекарството не е повече от 10 мг / кг телесно тегло на животното.
- Пълен достъп до сърцето на плъх или заек безопасно извършване от средната надлъжна стернотомия.
- Cell лечение на застойна сърдечна недостатъчност на не-исхемичен произход мононуклеарни фракция на костния мозък по критерия за безопасност и ефективност е препоръчително да се извърши доставката на 10106 клетки Обединените (интракоронарно - vnutrimiokardialnyh) метод.
- Сърдечна трансплантация при плъхове и зайци в комбиниран начин на мононуклеарни фракции от костен мозък в количество от повече от 10106 клетки на клетка носи риска от фатални емболия.
ТЕМА ТЕЗА