Ембрион култура - културата на ембриони
Postgamnaya несъвместимост с отдалечената хибридизация настъпва след оплождането. Често, когато това се формира nevskhozhie семена. Причината за това несъответствие може да бъде по време на развитието на ембриона и ендосперм. Когато слабо развитие на ембриона ендосперм не е в състояние да нормална кълняемост. В тези случаи изолиран ембриона и се отглежда в хранителна среда. Отглеждане ембриони върху изкуствени хранителни среди, наречени култивиране на ембриони или zarodysheyin витро. Този метод се основава през 1904 г. Hannig. Култивиране на ембриони ин витро за растежа на специално подбрани ядра медии асептично предварително изолирани от зрели (обикновено форма), семена от незрели семена (в ранните етапи на развитие). В първия случай ембрионите напълно диференцирани, във втората - те са в различни фази на развитие [3, 4].
Практическото значение на културата на ембриони изолирани от зрели семена е да се ускори производството на растения от семена, лошо или не покарал, както и в отстраняването на плода от място, което започва по време на съзряването на семената на растението. състояние ембриони почивка може да бъде кратко, но понякога трябва да преодолее да се прилагат специални ефекти на методи за семена, като стратификация - ефект на ниски температури или обезобразяване - увреждане на кожата на твърдо вещество семената за повишаване капацитета на набъбване за ускоряване на покълване. По принцип механизми латентност и поникването в зависимост от осветлението, температурата на съхранение, присъствието на ендогенни инхибитори. По-специално, семената на някои трайни насаждения, които се размножават вегетативно, не са покълнали в естествени условия. метод на ембриони култура - култура на ембриони, използвани за проучване, както и ефективно управление на състоянието на латентност. Култивиране при стерилни условия на изкуствени хранителни среди позволява да се прилагат различни вещества за преодоляване на латентност и за стимулиране на растежа на ембриона [1].
По време на културата на изолираните ембриони от зрели семена обикновено се използва прост среда минерална захароза без растежни регулатори и витамини, тъй като биологично активни вещества често водят до появата на необичайни форми с нарушена от отделни органи и калус [1, 3, 4]. Ембрионите обикновено се изолират от зрели семена след набъбване. Семената се стерилизират, и понякога допълнително калцинират в пламък дух лампа, и след това асептично се изолират ембриони. От сухи семена изолират зародиш трудно, но е възможно, ако се изисква от условията на опит или култура. Култивирането на ембриони от зрели семена от относително прости, така че може да се уреди по някакъв биологичен профил лаборатория.
Ембрионите са изолирани в ранните етапи на развитие с неузрели семена или семена от микробите веднага след оплождането, много малки, малки тела, от които те се открояват, така че тяхната култура е свързано с определени технологични трудности. Комплекс е изборът на хранителната среда, която трябва да се осигури развитието на ембриона към нормалното си състояние в зряла семето, за да поддържа поникване и растеж. физиологично активни вещества екологични изисквания са различни на различните етапи от развитието на ембриона. Така, комплекс органична добавка (незрели кокосово ендосперм, кестен или орех, зърнени млечни етапи зрялост) необходими за съзряване (диференциация) на ембриона. Въпреки това, след като последният от диференциация те могат да причинят анормален растеж на органи на плода, така че се прехвърля в културална среда с различен състав.
Ембрионите култивирани с незрели семена не само върху повърхността на полутвърд агарна среда, но също така и в течна хранителна среда, в азотна атмосфера. посочените по-горе условия на ембриона култура подкрепят факта, че плодът на различни етапи на развитие изисква специални, уникални за този етап, условия и други външни фактори хранене. Изолираният култура на ембриони, които не се отглеждат само в етап, когато развитието на процесите предимство правилното ембрион, и след това, когато има разделителни процеси само оплодената яйцеклетка, например в много ранен етап 4 клетките.
Култивирането е много малко, не се различава зародиш се характеризира с редица трудности, които могат да бъдат избегнати чрез отглеждане зародиш на семе с парченца тъкан, към който те са прикрепени, и чрез които храна (с плацента). За тази напълно култивирани с плацента и яйчник овула които впоследствие зрели в зиготи или proembryo [1]. Оптималната дължина на незрели ембриони, за да се получи добре развита и отглеждане разсад царевица е 4,5 - 5 mm, което е типично за ембриони на 14 - 18 дни след опрашването, в зависимост от условията на растеж [2].
Независимо от трудностите, свързани с изолиране и култивиране на яйчниците на незрели семена, методът се използва за отдалечени пунктове, в резултат на което нежизнеспособни ембриони. Ако ембриона не умира в резултат на генетични аномалии, като резултат от несъвместимостта с ендосперма, култивиране на ембриони в хранителна среда осигурява ценни хибридни растения. Така получен intergeneric и междуспецифичните хибридни растения.
метод незрял ембрион култура често се използва, когато е невъзможно да се получи ефективно определена генетична комбинация от желаните черти по традиционни методи. Като цяло несъвместимост бариера за развитието на хибридни ембриони се случва в средна и късни стадии на ембриогенезата. Обикновено това се проявява в нарушение на ендосперма, или неговата липса, което води до смърт на ембриона. Специално избран състав за култивиране незрели ембриони компоненти на средата за култивиране осигурява всички необходими вещества за нормалното развитие на ембриона и по този начин се замества ендосперма.
Най-важното изискване при работа с изолираните ядра на различни хранителни среди могат да поддържат техния растеж и развитие. Въпреки факта, че съставът на хранителна среда варира в зависимост от вида на култивирани ембриони е очевидно, че по-младите ембриона, толкова по изискванията към състава на хранителни среди. Например, ако относително зрели ембриони могат да се отглеждат в среда с добавяне на сол и захароза, за нормалното развитие на ембриони изолирани в ранните етапи, етерични витамини, аминокиселини, растителни хормони, както и сложни сложни добавки под формата на екстракт от дрожди, казеин хидролизат, кокосово мляко и т.н. Също така се препоръчва добавянето на манитол и други компоненти, които осигуряват оптимално осмотично налягане, необходимо за правилното развитие на ембриона. Получените хибридни растения при парникови doraschivat [1]. Той е експериментално доказано, че най-добрият начин да се разглеждат като 27 ° С час и 27 ° С ден и нощ -15 0 ° С, в зависимост от генотипа на покарал ембриони царевица незрели [2]. Във връзка с оптимизиране на състава на хранителната среда, е доказано, че добавянето на 2,5 г / л активен въглен не повлиява поникването, но позволи получаването на средата да се получи стабилен рН стойности [2]. Тази мярка позволено, независимо от марката на агар да се получи добър корен развитие и не са нанесени щети за разпределяне на разсад на епруветките и трансплантирани в земята. Ако е необходимо да се стимулират покълването на младите (на възраст 12 дни) ембриони трябва да се използва 1 мг / л 6-ВАР [2].
Освен преодоляване на не-жизнеспособността на незрял начин ембриони ембрион е важно за решаването на други проблеми, като например получаване на линиите и разновидности на растения, стари семена, които почти са загубили своята жизнеспособност, но в същото време растенията са много важни за определяне на развъдната програма. Наскоро голямо значение е използването на ембрионални - ембриони култура в избор за отдалечени сървъри хибридни култури [1].
Ако хибридни ембриони от аборт по време на ранните етапи на развитие, тяхната изолация и култивиране на ин витро все още няма положителен ефект. Нормалното развитие на ембриона в този случай е възможно изолиран от семенните primordia. Основните предимства на този метод е, че съставът на хранителна среда, е по-лесно, отколкото в случая на култивиране незрели ембриони. Освен това, зародиши на семена се разпределят много по-лесно, отколкото незрели ембриони.
Освен това, метод на ембриони - ембриони култура позволява селекция на растения, устойчиви на болестта на ранен етап от развитието им, при условие, че реакцията на инсталацията за възрастен съвпада с реакционни разсад, получени от ембриони [1].
Използвайки метода на ембриона култура - културата на ембриони за научни изследвания в зависимост от развитието на ембрионите на растението и паразита домакин, можете да се култивира на семената и ембриони от някои облигатни паразити в асептични условия ин витро. По този начин, познаване на техниките на семена кълняемост и растеж на ембриони, както и тяхната чувствителност към различните компоненти на хранителната среда подпомага установяването на контрол върху развитието на растението паразит и гостоприемник чрез подходящи химически средства или извличане на такива форми на растения, които са антагонисти на паразита.
Прилагане на метода на ембриона култура - културата на ембриони позволява дори в отсъствието на пълноправен изкуствен климат при минимални разходи да получите допълнителна поколение и по този начин да се ускори процесът на подбор, превод на царевичните линии на цитоплазмена мъжка стерилност [2].