3 Метод за изследване на свойствата на културата
Изборът, изучаване на свойствата на микроорганизмите и тяхното използване за изпълнение на подготвителните процеси на обработка на овча кожа кожени суровини
Есета >> биология >> подбор, изучаване на свойствата на микроорганизмите и тяхното използване за изпълнение на подготвителните процеси на обработка на овча кожа кожени суровини
Преброяват се колонии отгледани при засяване на някои размножаване на две (а) петриеви панички. Резултати паралелно засяване сумират и се определи средният брой на колониите, отглеждани при посяване на това разреждане. Колонии вярват, като правило, без да отваряте чашата. За удобство бележка колония-изчислява точка на външната страна на дънните плочи, като се използва мастило или стъкловидното стъкло. С голям брой колонии дъното на чашата е разделен на сектори, броят на колониите във всеки сектор и резултатите са обобщени или използване полуавтоматични броячи.
2.2.3 Метод на изследване на културни ценности
Културни свойства определят от естеството на растежа на микробни култури на твърди и течни носители на хранителни вещества. Растеж на твърда среда проучен подробно описание на форма, размер, цвят, текстура на повърхността, ръбове и структура на колониите, образувани върху ИПП.
Микроскопско изследване на колониите се извършва под микроскоп. Предвид колония при преминаваща светлина с невъоръжено око, е описан, както следва: формата на колонии; диаметър колона; цвят, който се дължи на пигмент; Колонии облекчение; повърхност; яркост и прозрачност; естеството на краищата на колониите; структура на колонията, неговата консистенция.
От колонии подготви петна след това се оцветяват с Грам и Trujillo. живопис техника Gram е както следва:
1) да се направи една чаша обезмаслено инсулти микроорганизми. Намазки се сушат и се фиксират с пламъка на горелката въздух;
2) петна бяха оцветени за 1 мин тинтява виолетово;
3) Получаване се промива в слаб поток от чешмяна вода в продължение на 2 сек.
4) се оцветяват с Lugol формулировка разтвор за 1 минута.
5) препарат се промива със слаб поток от чешмяна вода;
6) Лекарството се потапя в продължение на 30 секунди в 96% етилов алкохол, разклащане на последната, след което препаратът се изсушава с попивателна хартия;
7) оцветени петна Pfeiffer фуксин разтвор в продължение на 30 сек.
8) Получаване се промива в слаб поток от чешмяна вода до изчезването на цвета на елюата, суши се с попивателна хартия и mikroskopiruyut.
Грам-положителни бактерии са оцветени тъмно синьо или виолетово и Грам-отрицателни червено.
Оцветяването Трухильо е както следва:
1) се загрява до определи намазка;
2) Прилагане на воден разтвор на зелен малахит (2%) и се загрява в продължение на 3 минути в дух на освобождаване на влага;
3) вода за промиване;
4) по-ниска в продължение на 1 мин в 0.25% воден разтвор на основния фуксин;
5) изплакване вода;
6) суха филтърна хартия и mikroskopirovat на.
Оцветяване камшичета от Leffler
Оцветяване zhgutkov е както следва:
контур суспензия се прилага в чиста обезмаслени стъклени слайдове, е наклонена под ъгъл от 450 и се суши на въздух. Изсушеният намазка се излива на 15-20 минути байц Leffler. Трябва да се внимава да не се цапа изсъхва. През това време, поради пропадане на камшичета петно на повърхността, те се виждат в svetopolny микроскоп.
Препаратът се промива с дестилирана вода и се оцветяват с карболфуксин фуксин Tsilya продължение на 3 минути. Боята се промива, суши се и mikroskopiruyut препарат. Клетки и камшичета са боядисани в червено.
2.2.4 Метод натрошен капки
Той се използва за изследване на морфологията и подвижността на микроорганизми.
Спад на микробен суспензия се поставя върху чиста повърхност обезмаслено слайд. Когато се работи с култура култивира върху твърда среда се прилага върху стъклена капка чешмяна вода, последвано от стерилна пипета като малко количество култура и се разбърква в капчица. Покритие стъкло край се поставя върху предметното стъкло и внимателно я поставя на суспензията, като гарантира, че няма никакви въздушни мехурчета между плоските стъкла. Излишната течност се отстранява с филтърна хартия лента.
2.2.5 протеолитични свойства на микроби
Протеолитични свойства освобождаване се проявяват в околната среда на протеолитични ензими, които разграждат протеини в междинни съединения (пептони, полипептиди, аминокиселини) или окончателните разпадни продукти (индола, сероводород, амоняк и др.)
За откриване на протеолитични ензими проучен култура се инокулира в хранителна среда, съдържаща един или друг протеин (NRM, мляко и други).
Културите NRM култивирани в 5 ... 7 дни при стайна температура, като желатин се стопява в пещ. Микробите с протеолитични свойства втечняват желатин. Много протеолитични бактерии произвеждат различен характер изтъняване. Наслояване (протича гладко, от горе до долу), фуния, кратер подобни, napiform, под формата на отглеждане, и др; микроорганизми, без протеолитично дават в растеж NRM без втечняване на желатина.
За откриване на сероводород сее убождане (колона в) по протежение на стената в агара с оловен ацетат (МРА 5% пептон и 0.25% оловен ацетат) или ВСН тръба, в която тръба се поставя върху среда лента на стерилна филтърна хартия, напоена разтвор на оловен ацетат. Ако изпитваното култура с протеин разлагане отделя сероводород, изглежда тъмнокафяво оцветяване (потъмняване) на мястото на инжектиране в плътна среда или филтърна хартия (ВСН).
Определяне на амоняк започнем с това, тръба с бульон култура се поставят розово лакмус, културата се инкубира при 370с за 1 ... 3 дни. В присъствието на индикатор лакмусова хартия амоняк става син цвят.
Намаляване капацитет е решена посев култура на мляко с метиленово синьо. Към стерилен мляко се прибавя на капки 1% воден разтвор на метиленово синьо в синьо оцветяване. След култивиране на бактерии инокулират материал като редуциращ активността се обезцветява лакмус мляко (при намаляване разбират химически метод, включващ разцепване вещество от кислород или присъединяване към водород).
За да се определи каталаза в 3 ... 5 дневно бульон култура, отглеждат ин витро, като 1 cm 3 от 3% разтвор на водороден пероксид. В присъствието на каталаза ензим показва прекомерно барботиране кислород разцепва, т.е. така наречената "разпенването шапка".
2.2.6 Получаване на бактериална суспензия
Като източник на въглерод, използвани в прокариотни микроорганизми структурно енергийния метаболизъм е мазнини и повърхностно активни вещества. Приготвеният синтетична среда фракционна автоклав (1; 0,5; 0,5 МРа) за 30 минути. След това време, средата се разпределя в стерилизирана конична колба от 50 cm3.
За биомаса учи култури от микроорганизми, изолирани в първата серия от експерименти, ние засяване на агар наклонени плоскости.
Така получава култура чрез инкубиране в инкубатор за 24 часа при температура (40 ± 0,5) ° С, при което в края на тръбите с микроорганизми прилага 5 cm 3 съответстващ течна синтетична среда, извършване на процеса на механично действие. Така получената бактериална суспензия в колба, съдържаща 50 cm3 съответните синтетична среда. Култивирането на микроорганизми се извършва за различно време при температура (40 ± 0,5) ° С с променлив механично действие извършва на Shaker Вид, с честота на трептене на 250 об / мин, амплитудата на 6 до 2 часа на ден.