Устройства, методи и среди за култивиране анаероби

Начало | За нас | обратна връзка

Ексикатор - стъклена колба с капак захванат. В дъното има допълнителен контейнер, който се запълва със смес от пирогалол и натриев хидроксид или натриев хидросулфит и натриев бикарбонат. В решетка стойка се поставя култури и мелене покритие чрез вазелин. Ексикатора се поставя в термостат.

метод Fortner. В блюдо на Петри с хранителен агар изсипва
1-2% глюкоза. Средните плочи се изрязват с ширина стерилен скалпел жлеб от около 1 cm една половин чаша посяват култура на аероби (сарцин, Е.коли), а вторият -. Анаеробите култура или изследвани за тяхното присъствие снимки. затворени Инокулираните плочи, запечатани и се поставят обратно в инкубатор. Бързо нарастващото аероби, поглъщане на кислород, като по този начин създаване на благоприятни условия за растежа на анаеробни микроорганизми.

метод Перец. В стерилна петриева паничка се поставят стъклени пръчки, които лежат върху стъклени плочи или стъклени слайдове. В епруветка с 20 мл разтопен и се охлажда до 50 0 ° С с 10% IPA глюкоза (рН 7,0-7,2) е направен и изпитвания материал се прибавя 2-4 капки на 10% натриев хидросулфит в 10% разтвор на натриев карбонат. Съдържание на тръбата бързо се смесват и се излива в чашата с очакването, че агара напълни пространството между плочата на стъклото и на дъното на чашата. Плочите се инкубират при 37 0 С 24-48 часа. Колонии анаеробни бактерии растат под плоско стъкло.

метод Veyon-Vignal. Епруветката, съдържаща 0.5% разтопи и се охлажда до 0 ° С 40-45 диабет агар въвеждане на изпитвания материал и се смесва. Ако е необходимо, материалът се разрежда чрез прехвърляне на следващите 2-3 тръби с агар стопения. Тръбите са набира Пастьор пипети. След запълване на пипета удължена запечатан край и противоположния край запечатва със стерилен памучен тампон и поставени в парафин. Епруветките се поставят в термостат; 2-3 дни в агар колония растат дълбоки, видими при преминаваща светлина, която може да се изолира. За тази епруветка се разрязва над нивото на целеви файл колонии nadlamyvayutsya, колония се отделя и се субкултивират линия за натрупване в чиста култура в подходяща културална среда.

метод Битнер. За покриване на блюдото на Петри с засяването на изпитвания материал, или анаероби изолира култури прикрепени пакет от филтърна хартия, съдържаща пирогалол, К 2СО 3 и талк. Купа запечатан с восък или лента. Съдържание на пакета навлажнена поради получената кондензацията и съставките взаимодействат, което е съпроводено с абсорбция на О2 и освобождаване СО2.

Газ-рас (Generbaganaer). Generbaganaer система се състои от въздух-непропусклива опаковка, направена от прозрачна пластмаса и генератори, съдържащ смес на поглъщане на кислород вещества. Последователността на работа: отстраняване на генератора от пакет, разположен в долната част на херметична опаковка, след това се поставя на чашата (или епруветки) и с култури с помощта на специални скоби за затваряне на опаковката. Инкубиране при 37 0 С

Сряда Kitty Tarotstsi. Той съдържа месо-пептон бульон, 0.5% глюкоза и .15% агар. На дъното на епруветката се поставя за адсорбция на О2 варено чернодробни парчета или мляно слой 1-1,5 cm и се излива 6-7 мл среда. Среда преди засяване регенерирана (загрява в продължение на 15-20 мин. На водна баня за отстраняване на въздуха, и след това бързо се охлажда). След посяване на средата се излива парафиново масло и се поставя в инкубатор.

Полутвърд агар диабет (високо бар). тръбата
6-7 мл разтопен и се охлажда до 0 ° С 40-45 полутечен хранителен агар, съдържащ 0,5-1% глюкоза, което прави изпитвания материал и се смесва. Културите се поставят в инкубатор.

Средата за контрол на стерилност (SCS). Много растежа на анаеробни микроорганизми възможни само на медиите с нисък потенциал за редокс. Следователно, в средата добавя редуциращи агенти, като тиогликолова киселина или нейна натриева сол, цистеин, аскорбинова киселина. редуциращи функции се изпълняват от други компоненти на средата: глюкоза, пептон. SCS съдържа хранителен бульон, препарат витамин ECD, NaCl, Na2 CO3, глюкоза, натриев тиогликолат, цистеин, агар (0,75%). Средата се излива в епруветки в 6-7 мл.

Изолиране на чисти култури от бактерии - аероби на материал, съдържащ смес от микроби zanimaetkak обикновено 3 дни и произведени по следната схема:

Ден 1 - намазка микроскопия на изпитвания материал оцветен от Грам - визуализация микрофлора със сместа. Посевен материал контур на петриева паничка с хранителна среда метода на лента, за да се получат изолирани колонии. Инокулираните плаките се поставят в инкубатор в продължение на един ден.

Ден 2 - изследване на колонии отгледани върху плочите, изборът на изолирани колонии, описание и намазка им микроскопия на изолирани колонии (оцветяване по Грам), за да се провери хомогенността на микробите в колониите. Субкултура изолирани колонии върху агар накланя до получаване на чиста култура. Култури се поставят в инкубатор за един ден.

Ден 3 - за проверка на чистотата на култури, отглеждани на наклона от намазка микроскопия, Грам-оцветени. Когато може да се счита тествани хомогенност изолиране на бактерии от чиста култура завършена.