Полиаденилиращи при еукариотите

Полиаденилиране се извършва или веднага след прекратяване на транскрипцията или след специфична РНК разцепване на нарастващата верига.

Специално ензим - поли (А) полимераза придава на всеки 3 'края на РНК транскрипта, която е предназначена да се превърне молекула РНК, от 100 до 200 остатъци на adenylic киселина (поли (А)), който завършва образуването на първичния РНК транскрипт.

Специфични функции на поли (А) е неизвестен, но се смята, че такива "опашка" насърчава последващите обработени РНК молекули и износа на зрялата иРНК от ядрото.

Един от основните етапи на узряване еукариотна мРНК прекурсор, синтезирано в ядрото, е обработката на 3'-терминална последователности, които са тясно свързани с добавянето на ограничаване група.

Узряване на 3'-края на мРНК е процес от две стъпки. Първо прекурсор губи 3'-терминал некодираща последователност, след което, обикновено в 3 'края е прикрепена поли (А) последователността чрез ензимна полимеризация на AMP остатъци (схема стр. 88).

Има няколко изключения от това правило: иРНК животните хистоновите и иРНК на някои вируси. прекурсори, които са разделени от много специфични ендонуклеази и poliadeniliruyutsya. Остават nepoliadenilirovannymi и U-мяРНК. транскрипти, които са също така РНК полимераза II. В този случай първичния транскрипт таван мяРНК U1. съдържащ най-си 3'-край на няколко излишни нуклеотиди, изнесени от ядрото към цитоплазмата, където премахва излишни последователност, която е блокирана в ядро специфичен протеин инхибитор TPI (3'-крайната обработка инхибитор).

Определени разцепване на 3'-некодиращи последователности в иРНК животни маркирани специфични нуклеотидни последователности (фиг. I.13). Има най-малко две такива последователности, които полиаденилационни сайтове или поли (А) -sites.

Разцепването на РНК директно участват две други фактори: CFI и CFII (фактори разцепване). заедно те образуват стабилен комплекс с РНК. За възстановяване на цялата система за клетъчно-свободен прилагане обработка на 3'-краища ин витро, в допълнение към тези фактори е необходимо да има поли (А) полимераза - ензим, който носи полиаденилиране. Наличието на този ензим не се изисква за разцепване на акта на РНК, и очевидно за стабилизиране на протеин комплекс на обработка, показан схематично на фиг. I.13. Изграждане на комплекс зависи от ATP, но процесът на изграждане не се среща разделяне на своите бета-гама-те години. Не е известно точно кои компоненти на сложни разцепва РНК фосфодиестерни облигации.

Метод за полиаденилиране започва веднага зад РНК разцепване случва толкова бързо, че nepoliadenilirovannyh междинни съединения не се откриват. Такова конюгиране две реакции, необходими за защита на 3'-терминална РНК последователности от нуклеазно разграждане. В този случай актът изисква само фактор полиаденилационен CPSF. но не и на другите три: CSTF. CFI и CFII.

Производителност, (непрекъсната) полиаденилиране на 3'-края на РНК се извършва при скорост от около 25 нуклеотида / и толкова дълго, колкото дължината на поли (А) -sequence достигне около 250 нуклеотиди. След това реакционната производителност, се прекратява и бавно разпределителни свързване на различни молекули AMP остатъци от поли (А) полимераза. Смята се, че elongiruyuschy протеинов комплекс отчита дължината на синтезира поли (А), включващ -sequence PAB II фактор (фиг. I.14). Чрез този механизъм, свързването на определен брой молекули рАЬ II с поли (А) спира удължение на поли (А) -sequences. Такова строг контрол на дължината на поли (А) на преработените 3'-края на мРНК е важно за механизма на действие на контролиране на полуживот на иРНК в цитоплазмата. Без внимателен контрол върху този процес чрез селективно deadenylation невъзможно да се регулира вътреклетъчно разграждане на тРНК. и с това нивото на експресия на съответните гени, включващи този механизъм.

Функциите на опашката на поли-А:

1) насърчаване на износ на зрялата иРНК от ядрото;

2) може да повлияе на стабилността на поне някои от иРНК в цитоплазмата;

3) може да служи като сигнал за разпознаване на рибозомата.

Само транскрипти синтезирани чрез РНК полимераза II, kepami притежават 5'-и 3'-поли-А опашки. Причината за това, вероятно, е фактът, че ензими, които медиират затварящи и полиаденилиране, последвано от разцепване специфично свързани с РНК полимераза II. Например, ако гена. обикновено транскрибирана от РНК полимераза II, се отделя от неговото промотор и е прикрепена към промотор разпознава от РНК полимераза I или РНК полимераза III, синтезираните транскриптите на тези ензими са нито ограничени нито полиаденилирани. Необходимостта за определен тавана и полиаденилиране на тРНК прекурсори може да обясни защо тези РНК се синтезира от различен тип РНК полимерази в еукариоти.

РНК полиаденилиране бактерии толкова често, колкото в еукариоти и има важни биологични функции. Поли (А) иРНК-последователности на бактериална кратък подходящ еукариотен. Дължината им е средно само 14-16 нуклеотиди 80-200 (- в еукариоти) и полиаденилирана само от 1 до 40% от молекулите на всеки вид тРНК в определена клетка (около 100% в еукариоти).