Оцветяване спори в бактерии

Встъпителни обяснения. Бактериални спори в сравнение с растителни клетки са силно устойчиви на неблагоприятни условия на околната среда. Те са закръглени, образуване овална или елипсовидна. Ако диаметърът на спорите не надвишава диаметъра на клетките, в които се образуват спори, наречен бактериална клетка, ако да, в зависимост от разположението на спори в центъра или в края на клетката, се нарича клетката или plectridium нишковиден съответно .. В бацилната клетките в спор може да се разбърква клетка център - централна позиция, в края - терминал и по-близо до единия край - който става към края позиция.

Поради специфичната физико-химичния състав на гъста и здраво обвивка на първия етап спорите оцветяване прилага химикали, които променят структурата на техните мембрани. Въпреки това, по време на следващите спорите оцветяване едновременно петна цитоплазмата и клетката, така че под микроскоп последната изглежда равномерно оцветени. За да останат на наркотици боядисват само споровете, трябва такава "пребоядисан" лекарството е частично променен цвят, като боя в цитоплазмата и я остави в спора. Не е трудно да се постигне, тъй като багрило адсорбирания спората, повече от прикрепени абсорбира в цитоплазмата на клетките.

Следователно, всички методи за оцветяване спори се основават на един принцип: първите спори са гравирани различни материали: хром, солна киселина, сярна киселина, оцетна киселина, амоняк, натриев хидроксид или водороден пероксид и след това оцветени клетката със спорова чрез нагряване и накрая обезцветява цитоплазма и допълнително боя го контрастен боя.

метод Ziehl-Neelsen в Mueller модификация. Muller, модифициране известен метод Ziehl-Nielsen, обикновено се използва за откриване на киселина бацили (диференциална оцветяване на микобактерии и някои микроорганизми в близост към него) snizannoy с характеристики на химическия състав на черупката, предложен неговата употреба за боядисване на бактериални спори.

Преди фиксиращи бактерии размазване формулировка пламък се получава по конвенционален начин (вж. 2.2.1). Освен това, фиксирана пламък и охлажда състав се прилага към 5% разтвор на хромна киселина. След 5-10 минути, тя се промива с вода. Лекарството е покрита с лента от филтърна хартия и подуване навлажнена хартия разтвор Ziehl на. Затопля лекарство през пламък, докато парите (не до кипене) и след това се оттегля своята страна и се прибавя нова порция от боята. Тази процедура се извършва в продължение на 7 минути. Важно е, че боята се изпарява, но хартията не изсъхва. След охлаждане се отделя, лекарството старателно се промива с вода и се блотират с филтърна хартия. В резултат на това третиране, клетките се оцветяват с равномерно спори.

Освен обезцветява цитоплазмата на клетки (но не спорите) чрез третиране с 1% разтвор на солна или сярна киселина в продължение на 15-30 S. При изготвянето на лекарствени спори или Bacillus mycoides Bacillus mesentericus препоръчва обезцветяващ цитоплазма 16-18 S (измерени преброяване на глас от 21 до 37-40). Превишаването на това време може да се обезцвети и спори. след подготовка се промива с вода и се оцветяват с метиленово синьо в продължение на 2 минути.

Ако всички операции се извършват правилно, контраста и се превръща ярко червени спори ясно се разграничават на син фон на цитоплазмата.

метод Пешков. Фиксирана пламък подготовка изсипва син метилен Leffler, тя се оставя да заври и се вари в продължение на 15-20 секунди, задържане на стъклото над пламъка. Намажете dokrashivayut и се промива с вода в продължение на 30 секунди с 0,5% воден разтвор на неутрално червено а. Отново, промива се, суши се и след това се тества лекарство с масло потапяне леща. Спорите са оцветени в синьо или синьо, цитоплазма - в розово.

За да се изследва спора удобни обекти могат да служат като Bacillus mesentericus или Bacillus mycoides на възраст от 4 дни.

Реагенти за оцветяване на бактериални спори.

разтвор 1. Ziehl (виж т. 3.2.2).

2. метиленово синьо Leffler (вж. 3.2.2).

3. наситен воден разтвор на 2 г метиленово синьо багрило и 100 мл дестилирана вода.

4. хромова киселина, 5% разтвор.

5. Сол (или сярна киселина), 1% разтвор.