Методология цитологични частици от тъкани и органи в криминалистика
Научно-изследователски институт по съдебна медицина (Dir - .. проф VI Prozorovsky) на Министерството на здравеопазването на СССР, София
Методология цитологични частици от тъкани и органи с съдебни доказателства. Антонов SN Sud. Мед. експерт. 1978, № 4, стр. 33-35.
В експеримента, нов метод за формулиране на оцетна киселина предварителна обработка разрез под стереомикроскоп и чрез получаване тънки слоеве от всяка тъкан.
Техника за изучаването на тъкани и органи на частици в MEDICOLEGAL ПРЕГЛЕДА престъпни състави
Нов метод се предлага. Частиците, лекувани с оцетна киселина се изучават stereomicroscopically. Получаване на тънки слоеве от всяка тъкан се оказва възможно.
библиографско описание:
Методология цитологични частици на тъкани и органи, по време на съдебно разглеждане на доказателства / Антонов SN // Съдебномедицинска експертиза. - 1978 г. - №4. - S. 33-35.
Вграждане на форума:
Около 20% от съдебни цитологични изследвания, свързани с определянето на регионално (органни тъкани) произхода и пола на сухи микрочастици от човешки тъкани и органи. Сексуална идентичност трябва да се определи и за разглеждане на разчленения труп.
Въпреки това, от суши частици, не винаги е възможно да се приготвят хистологични препарати с добро качество, дори при високи нива микротехнология (Kovacs, 1974). Използвайки техники, приети в цитология (смилане или натрошаване на микрочастиците), той дава възможност да се получи добър лекарства са нервни и епителни тъкани органи и паренхимни (SE Glizer 1967 1972; Ishizu сътр 1974). Частиците на мускулната и съединителната тъкан лечими по-лошо. Освен това, раздробени частици свободно придържат към стъклото и по-нататъшната обработка може да се загуби. Използва за закрепване протеин глицерин несъвместима с откриване Y-хроматин. От твърди тъкани (кости, хрущял), приготвен по-рано цитологични препарати.
Ние поставя задачата да се разработи методология за получаване на равномерно тънък филм на сухи микрочастици neotkleivayuschihsya от всяка тъкан. Изследвахме 72 парчета: череп, ребра, хрущял sterno-ключицата съвместни, кората на главния мозък, кожа, гърдите и главата, стената на тънките черва, взети от 16 трупове по отношение на 1 ден след смъртта. Частиците на mm дебелина на тези части 1-3 се изсушават и се съхраняват при стайна температура в продължение на 1 седмица до 6 месеца. Пресни и изсушени частици са фиксирани в 10% формалин или декалцифициран фиксатор (5 мл трифлуороцетна киселина, 10 мл формалин, с дестилирана вода до 100 мл), се получава tselloidinovye парафин и срезове. 150 се получава хистологични проби се оцветяват с хематоксилин и еозин. Цитологични препарати бяха приготвени от прясно и изсушените частици предварително третирани с различни течности. Частиците се поставят върху часовниково стъкло и под стереомикроскоп MBS-1 се смила (дисекция). Микрочастиците бяха прехвърлени в стъклени слайдове и се третират с цел получаване на тънки слоеве. Изсушените препарати се фиксират с метанол, оцветени с лазур-еозин или със смес от флуорохром (SN Антонов, 1975).
Ние получени и изследвани 380 препарати. Микрофотография са извършени върху плочата "Микро" с лещата 20 и окуляра 10 X X. фигурите от негативи отпечатани в същото увеличение.
За решаване на проблема открихме, което вещества трябва да се обработи частиците на тъкан и чрез това, методи могат постоянно да получат тънки (1-2 клетъчен брой) препарати.
Известно е, че излагането на кръвни клетки в следи течности, като например дестилирана вода, физиологичен разтвор, и течности, съдържащи протеини е неефективен и води до развитието на микроорганизми, които намаляват качеството на лекарствата (SI Lyubinskaya, 1969). Поради това е целесъобразно да се използват други течности, имат свойството да се възстанови размера на частиците, за да ги измие от хемоглобин, както и определя и decalcify тъкан. Сместа беше тестван предложи Ratnevskim (1972), разтвори на 10, 25, 40% оцетна киселина, 0.5 и 5% разтвори на трихлороцетна киселина 10% неутрален формалин, декалцифициран фиксиращите (Romeys, 1953).
Фиг. 1. Инструмент за подготовка на частици.
1 - дисекция заточено игла; 2 - гребените игла; 3, 4, 5 - офталмологични инструменти.
За да се сравни ефектът на тези разтвори и скоби свеж и изсушените частици са със същия размер тъкани вградени в техните тръби. След период от 4 часа преди
4 дни частици бяха изследвани под стереомикроскоп, дисекция инструмент комплект (фиг. 1). Микрочастиците се прехвърлят върху стъклени слайдове, смлени или натрошени. Цитологични препарати, получени беше сравнена с хистологична оценка на степента на компресия на тъканни структури (предимно клетъчните ядра), дебелината на лекарствата и тяхната пригодност за изследване на сексуална хроматин.
Открихме, че течност с фиксиране действия са неподходящи за цитологични препарати, тъй като те губят своята еластичност и адхезия тъкан. Поради тази причина, микрочастиците не може да се смачкване на тънък слой състояние, с неправилна натрошени (рони) и по време на по-нататъшна обработка често идват отлепва. Препарати, получени без еднаква дебелина, и ядрото в клетки са повече от компресиран в хистологични препарати. Едно проучване на секс хроматина в повечето от лекарствата не е възможно.
Най-добри резултати се получават, когато са изложени на разтвори изсушени частици оцетна киселина, независимо от концентрацията. Оцетна киселина се разтваря хемоглобина причини подуване на междуклетъчно вещество, частиците намален обем и просветлени. Създаване на благоприятни условия за изследване под микроскоп стерео. Освен това, обекти запазват еластичност и лепливост, хрущял и костна тъкан след 1-4 дни декалцифициран.
За да се получат еднакви тънки филми, здраво залепени към плъзгача, ние тествахме следния метод. Микрочастиците се третират с разтвор на оцетна киселина се натрошен между две предметни стъкла и се оставят да образуват по такъв скоба. След изсушаване на тъкан отрязана стъклото със скалпел за получаване на два продукта. Тези лекарства са значително по-тънки секции тъкани, клетъчни и тъканни елементи са по-големи и много на лекарството намира в 1-2 клетъчен слой (фиг. 2, вложка). X- и Y хроматин открити без допълнителна обработка, която често е необходимо да се идентифицират пол хроматин в хистологични секции (хидролиза, трипсинизация).
Фиг. 2. Подготовка на изсушените микрочастици. и - хистологичен разрез на кожата на гърдата; б, в, г - цитологично кожата препарати гърдата, скелетен мускул, ребрата.
Предложеният метод е технически прост и различен от всички използвани преди това, че може да се използва за изследване на частици (микрочастици) всички участъци от тъкани, които са във всеки състояние. Получените препарати обикновено не се изискват допълнителна обработка за отстраняване на излишната протеин като хистологични препарати и бързо могат да бъдат приготвени.
Разработената техниката също разширява възможностите на експертно проучване за справяне с въпроси за наличието на частици от животински или човешки тъкани и регионална принадлежност. Тя ви позволява да получите информация за морфологичните особености на тъкани микрочастици на етапа на обработка и дисекция под микроскоп стерео, което е невъзможно при използване на хистологични техники. Тази информация е важна за разработването на препарати от тези части на обекта, които са по-полезни за диагностициране на секс.