Метод за получаване на диагностични серум

Изобретението е предназначено за производството на високо специфичен хиперимунен серум. Животните за производство на имунизирани пет пъти авирулентен антигенен материал интравенозно. Едновременно прилага интрамускулно като имуномодулатор timalin. В третата инжекция на антиген прилага мускулно имуномодулатор циклофосфамид. Самостоятелните кръв и серум се получава. Изобретението се увеличава специфичната активност на диагностични серуми опростява и намалява сложността на процеса за тяхното получаване с висок добив от продукта от заглавието.

Изобретението се отнася за биотехнологии и могат да бъдат използвани в производството на високо специфичен хиперимунен серум, като същевременно намали разходите за труд и животни, които причиняват отпадъци.

Метод за получаване на диагностични серум аглутиниращи бруцелоза, съдържащ имунизиране на зайци, произвеждащи вирулентни живи клетки Br.abortus 146 и 565 Br.melitensis четирикратно, три пъти над 1 седмица 4-ти пъти в рамките на 2-3 седмици, общо обезкървяване след 2 седмици последната инжекция, първите три инжекции извършени в смес с равен обем пълен адювант на Freund. Серум титър е по-малко от 1: 1600.

[Диагностика серум аглутиниращи бруцелозен сухо. Производство Наредба № 273-82. Одеса Enterprise bakpreparatov].

При използване на живо вирулентен култура изисква строг режим за борба с епидемия, серум недостатъчно активна, методът е трудоемко, отнема много време.

Процесът е дълъг и труден.

Метод за получаване на диагностични видове специфични чума серум [II Derteva и др. Sb.nauchnyh работа в анти-чумата съоръжения. - Саратов, 1966, стр. 151-162]. Животновъди имунизация се провежда три курса с двуседмични почивки между тях. В първите два курса на инжектиране се извършва 3 пъти след 4 дни в 6 инжекции трети курс след 4 дни. Във всеки разбира антиген дозата се увеличава с всяка инжекция. Взимана кръв от животните 7-9 дни след последната инжекция.

Титри на аглутиниране серум 1: 50-1: 200. Серумът не е специфична, метод за получаване на много дълъг и труден.

Метод за получаване на серуми за производство луминисцентни антитела антракс спори [серум диагностичен антракс спори адсорбира луминесцентно сухо. Регламент SNIPCHI Производство N 156-80].

При този метод, имунизацията на зайци се извършва авирулентни спори Bac. anthracis 10 пъти с 3-дневни интервали, подкожно инжектиране 5 5 IV с нарастващи дози от микроби. 7 дни след последната инжекция се извършва кървене и подготовка серум. Производство титър ФРПИ достига 1: 3200.

Серумните недостатъчно активни.

По този начин, всички известни методи за получаване на диагностично моно- или поливалентен серуми имат общи недостатъци на недостатъчна активност получени серуми сложността на производствения процес, нисък добив от целевия продукт, дължащи се на високо производство животински отпадъци, които не осигурява възможност за масово производство на диагностични продукти.

Целта на изобретението е да се увеличи специфичната активност на диагностичен серуми опростяване и намаляване на сложността на процеса за тяхното получаване с висок добив от продукта от заглавието.

Целта се постига с това, че животните петорен производство имунизирани с авирулентен антигенен материал интравенозно, интрамускулно прилага едновременно като имуномодулатор timalin, трета инжекция се прилагат интрамускулно допълнително циклофосфамид, разделени кръв и серум получен.

Във връзка с метода на изобретението прототип получи диагностика серум има следните характеристики. Използване като имуномодулатор Thymalin допринася значително за специфични титри серум антитяло чрез увеличаване на броя на производство на антитела клетки чрез стимулиране на функцията на макрофагите и хелперни Т-клетки. Циклофосфамид, като класически имуносупресант, също активира magrofagi стимулиране фагоцитната, цитотоксични и потискащо (относно основно Т-лимфоцити) функция [DN Лазарев Алехин EN Имунната стимулант. М. Medicine, 1985, стр. 67-70, 147-150]. Тази селективност на действие имуностимулант, от една страна, и някои селективни имуносупресори в действие - от друга страна, са оптималната комбинация от продукти от двете групи и начините на тяхното използване да активира някои имунни механизми и изключва други.

Възможността за практическо използване на предложения метод се илюстрира с примери за производство серуми използване на пълния набор от функции на претендираното изобретение.

Пример 1. Получаване на чума диагностика серум. Зайци за производство прилагат интравенозно на всеки четири дни петкратно фракция 1 Yersinia Pestis при нарастващи дози: 0.1 мг; 0.15 мг; 0.2 мг; 0.25 мг; 0.3 мг. В същото време се инжектират интрамускулно с 5 мг Thymalin и трета интрамускулно инжектиране допълнително въведени 100 мг циклофосфамид. На 7-ия ден на животните да кървят. Активност в серуми RNIF достига 1: 16,384 или по-висока, където серум имат висока специфичност.

Пример 2. Получаване на серум диагностициране на бруцелоза. Зайци за производство инжектират интраперитонеално на всеки четири дни петкратно poligruppovoy разтворим антиген от B.abortus 19, B.melitensis Rev-I, B.suis 61 в нарастващи дози от 1 мг; 1.25 мг; 1.5 мг; 1.75 мг; 2 мг. В същото време се инжектират интрамускулно с 5 мг Thymalin и трета интрамускулно инжектиране допълнително въведени 100 мг циклофосфамид. Активността в серуми RNIF достига 1: 16384 или по-висока.

Пример 3. Получаване на диагностика антракс antisporovoy серум. Всички операции, свързани с имунизация, производителите зайци се изпълняват в същата последователност, както при получаването на диагностичен серум Brucella. водоразтворим антиген, получен от спор Bac щам. anthracis I CO, обработва в автоклав при 1.5 атм в продължение на 2 часа. Активността в серуми RNIF 1: 16384-1: 32768.

Пример 4. Получаване на диагностичен poligruppovoy чума, туларемия, бруцелоза, Sapna, melioidoznoy серум.

Всички операции, свързани с имунизация, производителите зайци се изпълняват в същата последователност, както при получаването на диагностичен серум Brucella. Антигени агенти инжектирани в комплекса при следните дози: чума - 0.1 мг; 0.15 мг; 0.25 мг; 0.3 мг, и антигени на туларемия, бруцелоза, сап и melioidosis - 1 мг; 1.25 мг; 1.5 мг; 1.75 мг; 2 мг. Активността в серуми RNIF достига 1: 16384 или по-висока за всеки съставен компонент.

Пример 5. Получаване poligruppovoy дизентериен диагностика серум. водоразтворим poligruppovoy антиген, получен от типични щамове на всеки шигелоза видове (Sh.dysenteriae, Sh.flexneri, Sh.boydii и Sh. Sonnei) и се инжектира в същата последователност и със същите дози както при получаването на диагностичен серум Brucella. Активността в серуми RNIF достига 1: 16384 или по-висока.

Пример 6. Получаване на treponemal диагностика серум. водоразтворим ultraozvuchenny treponemal антиген се инжектира в същата последователност и със същите дози както при получаването на диагностичен серум Brucella. серум активност ФРПИ достига 1: 16,384 или по-висока.

По този начин, изобретението е възможно.

При сравняване с метода на прототип показа следните предимства: значително намаляване на продължителността на процеса на имунизация с 49-54 до 27-30 дни чрез елиминиране на етапа на получаване на животните за имунизация и антиген едновременно инжектиране и имуномодулатори, повишен добив от желания продукт поради увеличаване на производството на антитела в животни производството и намаляване на потреблението на антигенни материали, значително увеличаване на специфичната активност в серумите ФРПИ 1 512 - 1: 2048 до 1: 16384 - 1: 32,768. Използване на изобретението в областта на биотехнологиите ще позволи да организира масово производство на високо специфични серуми за производството на диагностични продукти.

Метод за получаване на диагностични серум, съдържащ множество имунизация на животни-произвеждащи авирулентен антигенен материал в комбинация с имуномодулатори, събиране на кръв и отделяне на суроватка, характеризиращ се с това, че като имуномодулатори използвани timalin и циклофосфамид, имунизация се извършва пет пъти, антигенен материал се прилага интравенозно, имуномодулатор timalin - IM едновременно с инжектиране на антиген, където циклофосфамид се прилага само веднъж на третата инжекция.