Как да запазим Botox в сухите и възстановени форми

Използването на ботулинов токсин като лекарствен продукт се нуждае от разработването на подходящи производствени процеси отговарят на най-високите стандарти за безопасност и качество на фармацевтични продукти. Изключителните свойства на лекарството са довели до изискванията за безопасност не само за продукти, но също така и за служителите и условията на труд в производствения процес. В момента има редица клинични продукти, получени с помощта на различни производствени процеси и с различни крайни дозирани форми.

Спецификата на производството на ботулинов токсин

Свойства на ботулинов токсин

Активният елемент в препарати от ботулинов токсин (Botox или BT) е протеинов комплекс, получен от Clostridium ботулинов. Комплексът се състои от биологично активен невротоксин и няколко протеини. При физиологични условия, се приема, че комплексът се отделя от чист невротоксин.

Молекулното тегло на комплекса е около 150,000 далтона. Той се състои от тежка верига протеин (приблизително 100,000 далтона) и протеин на лека верига (около 50 000 далтона), свързан с един или повече дисулфидни мостове (връзките). Системата включва също и други нетоксични протеини, имащи хемаглутиниращи свойства.

Ботулинов токсин - един от най-мощните токсини в природата. Средната летална доза (LD50) BT серотип А е 0.001 мкг / кг.

лекарство активност се изразява в единици (IU), една единица съответства на средна летална доза за мишки. Следователно, ED 50 означава, че съдържанието на флакон 50 може да убие мишки. За 70 килограмов човек се счита летална доза от 3000 IU. Специфичната активност на Botox® е около 20 единици / нг невротоксин протеинов комплекс. Ботокс се използва широко в неврологията, рехабилитация, урология, лечение на болка, мигрена, главоболие, изпотяване, както и за естетични процедури.

Безопасното и ефективно използване на лекарства на базата на Botox зависи от правилното съхранение на продукта, подходящ избор на дозата и използването на подходящи техники.

Производителите на продукти, базирани на ботулинов токсин

В момента основен производител на тип А Ботокс за клинична употреба е мултинационална компания Allergan (Калифорния, САЩ, Уестпорт).

Търговски марки Allergan:

• Botox® / Botox®
• Козметични / Vistabel® / Vistabex® / Vista®.
• Ipsen Pharma (Франция) и Рексъм (United Kingdom)

Това е вторият по големина с търговски марки и Dysport® Azzalure®. Мерц Естетика (Германия) произвежда и марки Xeomin® Bocouture®. Три други производители са в Азия. Medy-Tox (Корея) пусна марка Meditoxin® / Neuronox® / Siax®, чието производство започва в Корея, и в момента се разработва и в други страни, като например в Латинска Америка. Hügel Inc. също базирана в Корея, произвежда друг тип лекарство А Botox наречен Botulax (Zentox Regenox или другаде). Институт по Биологични продукти Ланджоу (LIBP, Ланджоу, Китай) освободен лицензиран наркотици BTXA, който се разпространява в Хонг Конг, както и в други страни под различни имена:

• Lantox в България;
• Lanzox в Индонезия;
• Prosigne в Бразилия;
• Liftox в Еквадор;
• Redux в Перу (лекарството се предлага в повече от 30 страни).

Тип B серотип Ботокс нарича Myobloc® / Neurobloc® произведени в САЩ WorldMeds (Кентъки, САЩ). Първоначално продуктът е предназначен за пациенти, които развиват антитела към тип А. одобрен за клинично приложение лекарството, но за лечение изисква значителни дози 50 пъти по-високи, отколкото тип А, поради по-ниската активност на единица токсин. Продуктът не е била използвана в естетическа практика.

България е регистрирала следните лекарства Ботокс тип А: Botox®, Disport®, Lantox®, Xeomin®.

Производство на ботулинов токсин

Clostridium ботулинов е облигатен спорообразуващи анаероби. Тази положителна бактериа, който се открива в цялата природа. За успешното представяне на клиничен материал е необходимо да се спазват редица изисквания.
Анаеробните изисквания означават, че кислород трябва да бъдат изключени от средата, в първите етапи на култивиране на бактерии в биореактор (ферментатор) или стъклен съд. Традиционните медии култура включват редуктор, за да запази анаеробни условия, както и допълнителен азот. По време на растежа на бактериите произвеждат няколко летливи киселини, която поддържа анаеробна среда и определя характерния вкус на отглежданата култура.

Необходимо да се спазват най-строгите мерки за сигурност, за предотвратяване на замърсяването на околната среда. Газовете се развили по време на етапите на растеж и налягане преди да се освободи трябва внимателно да се филтрува, за да се елиминира възможността за разделяне на бактериални аерозоли.

В края на жизнения цикъл на бактериите неизбежно настъпва образуване на спори. В крайна активния продукт, съдържаща спори не трябва, обаче добавя към стъпките на производствения процес на пречистване от спори, обикновено ultramikrofiltratsiya.

Суровият токсина се пречиства от разтвора на културата чрез утаяване с киселина като кристален комплекс от токсин свързани протеини. кристален комплекс се разтваря отново в разтвор, съдържащ натриев хлорид и човешки серумен албумин, и се филтрува преди вакуум или изсушаване чрез замразяване.

Форми на препарати Ботокс

Botox активно производство включва култивиране на бактерии, пречистване на суровия TDB, получаване на клинично продукт като комплекс (или пречистена) невротоксин и окончателното съхранение. За удобство при съхраняване на лекарството може да бъде формулиран като лиофилизиран прах, който може да се разтвори преди употреба с физиологичен разтвор или вода. Дозираната форма може първоначално да бъдат представени като разтвор. За съжаление, Botox трудно да се стабилизира (т.е. може да съхранява, когато е сведена до минимум намаляване на биологична активност).

Краен продукт или медикамент е комбинация от токсин, нетоксични протеини и помощните вещества. Хранителни продукти от различни фирми се различават по:

• щам култивирани бактерии;
• методи за получаване и пречистване на лекарството;
• концентрация на стабилизатора (албумин);
• наличието на добавки (лактоза, захароза, натриев хлорид).

Botox и Dysport са стерилна лиофилизирана форма BT тип А под формата на прах във флакон вакуум запечатани. В тази форма на Ботокс е стабилен в продължение на около 4 години. Например, един флакон BOTOX (100 U) съдържа около 100 единици интегрирани BT тип А, 0.5 мг човешки серумен албумин и 0,9 мг натриев хлорид.
Други търговски форми Botox: Dysport (смес BT сложни на албумин и лактоза в прахообразна форма); Myobloc (TDB разтвор от тип В, ​​албумин, сукцинат и натриев хлорид при рН 5.6).

Условия на съхранение основа с ботулинов токсин

Ботулиновият токсин лесно губи активност

Ботулинов токсин - много чувствителна отрова който лесно се подлага на денатурация със загуба на токсичност.

Обикновено, ботулинов токсин активност (което е вътреклетъчен пептидаза) зависи от пространствената конформация (структура). BT тип А детоксифициран при температури над 40 ° С (по-специално в алкална среда), под влияние на различни химикали, както и образуването на мехурчета в / въздушен интерфейс течност. Например, алкохолът не може да се използва за отглеждане или почистващо кожата състав преди инжектиране, тъй като причинява денатуриране и неутрализира токсин.

Разреждането на токсини комплекса до ниски концентрации, използвани в медицината, резултатите в бърза детоксикация на Ботокс в отсъствието на стабилизиращ агент. Отглеждане на Botox разтвор, съдържащ мг / мл токсин, към разтвор, съдържащ нг / мл, представя значителни трудности поради бързата загуба на специфична токсичност при такова високо разреждане.

За да се стабилизира ботулинов токсин използване на животински протеини (човешки серумен албумин и желатин). Въпреки това, наличието на протеини в крайната формулировка представя потенциални проблеми, дължащи се на факта, че някои стабилни вируси, приони или други инфекциозни или патогенни агенти могат да замърсят Botox, намерено в средата за получаване.

Удобства за възстановяване (размножаване) лекарства ботокс

Сухата форма на Botox продукт може да бъде възстановен (преведени под формата на разтвор за инжектиране) разреждане с стерилен физиологичен разтвор без консерванти (0.9% разтвор на натриев хлорид).

Токсинът е много чувствителна на механично напрежение, топлина и рН, така че трябва да се внимава по време на разреждане, така че да не предизвиква прекомерно нагряване или турбулентност. Тъй BT денатурира докато барботиране или разклащане силно разтворител внимателно се инжектира във флакона. Разтвореният BOTOX е бистра, безцветна течност без никакви твърди вещества.

Ефикасността Botox може да бъде намалена чрез ниски концентрации на токсин и наличието на химически вещества в разтворител.

За по-голяма клинична ефикасност, производителите препоръчват лекарите да използват даден продукт за определен период след разреждане в зависимост от марката.

Условия на съхранение състави, съдържащи ботулинов токсин

Таблица 1 представя условията на съхранение лиценз, приети в момента за трите най-големи групите продукти.

Таблица 1. Условия на съхранение, лицензирани за различни марки BT продукти в големи региони на света (официални данни)

H \ г - продукт, който не е на разположение в този регион.
Първоначално Botox се съхранява при температури под -5 ° С, докато Dysport винаги се съхранява при 2-8 ° С Botox сега се приема за съставния набор от условия на съхранение: или под -5 ° С или при температура 2-8 ° С Продължителността на времето за съхранение на Ботокс и Dysport до 3 години, както и 2 години съответно.

Някои от новите формули с по-малък брой единици, като например Azzalure® или Vistabel®, имат срок на годност "родители", т.е. изходни материали.

Стабилност и условията на съхранение след разреждане на Botox препарати

Разтворения препарат не трябва да се замразява. Замразяване може да ускори -денатурация Ботокс, значително намаляване на продължителността на пост инжекция. Доказано е, че частично денатуриран поради неправилно съхранение на лекарството Botox®, ще продължи да има ефект, но срокът на валидност значително намален. Други изследвания са показали, че намаляването на активността на токсина се намалява с течение на времето, въпреки че една седмица след размножаване могат да бъдат спасени около 50% от първоначалната дейност.

Производителите могат да предоставят само ограничена информация за стабилността на разредените лекарства, толкова много клиницисти извършени собствени проучвания, за да се увеличи срока на годност на разредения продукт, или използването на алтернативни разтворители. На първо място, тези изследвания са насочени към проучване на възможността за запазване на клиничните ефекти за дълго време след разреждане.

Основният риск за понижено лекарство - микробно замърсяване като среда богата протеин (HSA) и е почва за растеж на бактерии. Въпреки това, някои проучвания показват, че Botox дейност може да продължи до 6 седмици, когато се съхранява в хладилника.

Таблица 2. Условия на съхранение на разредени лекарства, лицензирани за семейства BT продукти в различни региони на света