имунофлуоресценция реакция (директно риф, и индиректно RNIF) като метод за бърза диагностика

метод имунофлуоресцентен (RIF, имунофлуоресценция реакцията, реакционната Coons) - Метод откриване на специфични Аг чрез Am конюгиран към флуорохром. Тя е с висока чувствителност и специфичност.

Той се използва за бърза диагностика на инфекциозни заболявания (идентификация на патогена в материала), и за определяне на АТ и левкоцити повърхностни рецептори и маркери (имунофенотипизиране) и сътр. Cell.

Откриване на вирусни и бактериални антигени в инфекциозни материали, животински тъкани и клетъчни култури, използващи флуоресцентно антитяло (серуми) е широко използван в диагностичен практика. Получаване на серуми флуоресцентен основава на способността на някои флуорохром (например, флуоресцеин изотиоцианат) да влиза в химична връзка с суроватъчни протеини без да се нарушава тяхната имунологична специфичност.

Има три вида методи: преки, косвени, които да допълват. RIF директен метод се основава на факта, че антигени на тъкани или бактерии, лекувани с имунен серум антитела, маркирани с флуорохроми, могат да светне UV лъчи флуоресцентен микроскоп. Бактериите в намазка, серум, лекувани с луминесцентен блясък в периферията на клетката под формата на ресни зелено.

Непряко RIF метод за идентифициране на антиген - антитела използване антиглобулиновия (анти-антитела) серум, белязано с флуорохром. За тази цел тампони окачване микроби са третирани с антитела анти-микробен диагностичен заешки серуми. Антитялото, несвързани антигени на микроби се измиват и останалите антитяло за откриване на микроорганизми чрез обработка намазка антиглобулиновия (анти-заешко) серум белязан с флуорохроми. Резултатът е сложна антитела антимикробна микроб + заешко антитяло + анти-заешки маркирани с флуорохром. Този комплекс се наблюдава под флуоресцентен микроскоп, както е в директен метод.

Механизъм. При изготвянето на намазка от плъзгащ материал на пробата се определя на третирани пламък и имунната заешки серум, съдържащ антитяло срещу патогенни антигени. За образуването на антиген - подготовка антитяло се поставят във влажна камера и се инкубират при 37 ° С в продължение на 15 минути, след това внимателно се промиват с изотоничен разтвор на натриев хлорид за отстраняване на несвързания антиген антитела. След това лекарството се прилага срещу флуоресцентен антиглобулиновия серумен глобулин заек, се оставя да престои в продължение на 15 минути при 37 ° С и след това препаратът се промива добре с изотоничен разтвор на натриев хлорид. В резултат на свързване флуоресцентен антиглобулинов серум фиксирани към антиген-специфични анти-тела са оформени луминисцентни комплекси на антиген - антитела могат да бъдат открити чрез флуоресцентна микроскопия.

4. спални детски ясли на детето въздух намерени 75 т / m3 стрептококи, 12 т / m3 ауреус и 1 м-т / m3 Туберкулозната бацили. Създайте санитарно-бактериологични оценка на въздух и да се очертаят плана си за преструктуриране.

Разглеждане билет № _54

Ретровируси. HIV инфекция (СПИН) и неговите причинители.

човешки имунодефицитен вирус, който причинява ХИВ инфекция, която приключва на развитие на синдрома на придобита имунна недостатъчност.

Причинителят на ХИВ инфекция - лимфотропичен вирус, принадлежащ към семейството на Retroviridae лентивирус род.

Морфологични характеристики: вирус РНК. Вирусен форма на частиците сферична обвивка се състои от двоен слой от липиди, проникнали гликопротеини. липидната обвивка получени от плазмената мембрана на клетката гостоприемник, в която вирусът се възпроизвежда. Гликопротеиновите молекула се състои от две субединици, върху повърхността на вириона и неговите проникващи липидните мембрани.

Virus ядро ​​конус форма, се състои от капсидни протеини на редица матрични протеини и протеазни протеини. Genome образува две РНК вериги за процеса на възпроизвеждане е HIV обратна транскриптаза или обратна транскриптаза.

Геномът на вируса се състои от три основни структурни гени и регулаторни 7 и функционални гени. Функционални гени изпълнява регулаторните функции и осигуряване на изпълнението на процесите на възпроизвеждане и да участват в вирусен инфекциозен процес.

Вирусът засяга главно Т- и В-лимфоцити, някои клетки от моноцитен серия (макрофаги, бели кръвни клетки), клетки на нервната система.

Културни свойства: клетъчна култура на Т-лимфоцити и моноцити Човешки (в присъствието на IL-2).

Антигенен структура: вирус тип 2 - HIV-1 и HIV-2, HIV-1, е повече от 10 генотипове (подтипове): А, В, С, D, Е, F ..., се различават в аминокиселинна състав на протеини.

HIV-1 са разделени в три групи: M, N, О. Най изолати се отнася до групата М, където 10 се изолира подтипове: А, В, С, D, FL, F-2, G, H, I, K стабилност : Чувствителен на физични и химични фактори, умира в отопление. Вирусът може да се задържи за дълго време в сухо състояние в засъхнала кръв.

Патогенни фактори, патогенеза: Вирусът се прикрепя към лимфоцити, влиза в клетката и възпроизвежда в лимфоцитите. В резултат на възпроизвеждането ХИВ в лимфоцитите скорошен колапс или губят техните функционални свойства. В резултат на размножаване на вируса в различни клетки е натрупване на органи и тъкани, и се установи в кръвта, лимфата, слюнка, урина, пот, изпражнения.

Когато HIV инфекция е намален брой на Т-4 лимфоцитите нарушена функция на В-лимфоцити, инхибира функцията на природните клетки убийци и отговора на антигени се намалява и разстрои продукти на комплемента, лимфокини и други фактори, регулиращи имунни функции (IL), като по този начин идва дисфункция на имунната система.

Клиника: засягат дихателната система (пневмония, бронхит); ЦНС (абсцеси, менингит); Стомашно-чревен тракт (диария), има злокачествени неоплазми (тумори на вътрешните органи).

ХИВ инфекция се среща в няколко етапа: 1), периода на инкубиране, средно 2-4 седмици; 2) етап на първични прояви характеризират с първи остър треска, диария; асимптоматична фаза стъпка е завършена, и устойчивостта на вируса, възстановяване на здравето, обаче определени HIV антитела в кръвта, 3) етап на вторични заболявания проявява респираторни заболявания на нервната система. Hung с HIV последното, четвърто терминал stadiey- СПИН.

Вирусологични и серологични изследвания включват методи за определяне на HIV антигени и антитела. За тази цел, ELISA, PCR, и IB. Серумите на пациенти с HIV-1 и HIV-2 съдържа антитела срещу всички вирусни протеини. Въпреки това, за да се потвърди диагнозата откриване на антитела за GP41 на протеини, gpl20, gpl60, p24 HIV-1, и антитела за протеини gp36, gpl05, gpl40 от HIV-2. HIV антитела се появяват 2-4 седмици след заразяването и се определят на всички етапи на ХИВ.

Метод за откриване на вируса в кръвни лимфоцити. Въпреки това, за всяка положителна проба за потвърждаване на резултатите, поставени реакцията IB. PCR се използва също, способен да открива HIV инфекцията в инкубационния период и ранни клинични, но неговата чувствителност е малко по-ниска от IFA.

Клинично и серологично диагноза се потвърждава от имунологични изследвания, ако те покажат наличие на имунодефицит в пациента в процес на разглеждане.

Диагностична тест имуноанализ система за откриване на антитела на ХИВ - вируса включва AH адсорбира върху носител, антитела срещу човешки Ig. Използва се за serodiagnosis на СПИН.

Лечение: използване на инхибитори на обратната транскриптаза, действащи в активирани клетки. Съставите са производни на тимидин - азидотимидин и phosphazide.

Предотвратяване. Конкретна - не.

Влияние на физични и химични фактори на микроби. Мутация и неговото значение за практическата медицина. Примери. Стойността на околната среда.

Действието на химични и биологични фактори.

действие Chemicals

Химикали могат да инхибират или напълно потискат растежа на микроорганизми. Ако веществото инхибира растежа на бактерии, но след отстраняване на растежа им отново се възобновява.

Антимикробни средства с оглед на химична структура и механизъм на тяхното бактерицидно действие на бактерии могат да бъдат разделени в следните групи: оксидиращи халогени, метални съединения, киселини и основи, повърхностно активни вещества, алкохоли, оцветители, производни на фенол и формалдехид.

Оксиданти. Тази група включва водороден пероксид и калиев перманганат.

Халогени. Хлоро, йодо и техните препарати: хлорирани вар, хлорамин В, pantotsid, йод алкохолен разтвор 5%, iodinol, Йодоформ.

Съединения с тежки метали (оловни соли, мед, цинк, сребро, живак, органометални съединения на среброто: Protargolum, колоидно сребро). Тези съединения са способни да предоставят както антимикробна и разнообразни локален ефект на приемащата тъкан.

Киселини и основи. В основата на бактерицидното действие на киселини и основи са дехидратация микроорганизми, промяна в рН на хранителната среда, хидролизата на колоидни системи и образуването на кисели или алкални албуминати.

Багрила имат свойствата да забави растежа на бактериите. Те са бавни, но по-избирателно.

Формалдехид, безцветен газ. На практика се използва 40% воден разтвор на формалдехид (формалин). И газообразен формалдехид, разтворен във вода е вреден ефект върху вегетативни и спори форми на бактерии.

Действието на биологични фактори

Действие биологични фактори проявяват главно антагонистични микроби, когато отпадъчните продукти на някои микроби причиняват смъртта на другите.

Антибиотици (от гръцката анти -. В., Bios - живот) - биоактивни вещества, образувани по време на живота на гъбички, бактерии, животни, растения, и по синтетичен начин, даващ възможност за селективно потискане и убиват бактерии, гъбички, Rickettsia, големи вируси, протозои и някои червеи.

3. Реакция на биологичната активност на бактериално ензими ревматизъм, диагностика и практическо значение, защитната роля на антитела срещу ензимите в придобития имунитет (определяне antigialuronidazy и анти-стрептолизин О).

Ревматични треска - общ инфекциозно заболяване на алергичен характер, което се отразява на съединителната тъкан, най-вече на сърдечно-съдовата система, както и на ставите, вътрешни органи, на централната нервна система. Смята се, че причината за ревматизъм е активирането на патогенни микроорганизми, предимно бета-хемолитични стрептококи група А. Това играе основна роля в етиологията и патогенезата на ревматично заболяване. На първо място, заболяването се развива на фона на стрептококовата инфекция. На второ място, в кръвта на пациенти разкрива голям брой антитела към микроорганизмите на групата. Трето, предотвратяване на заболяването се извършва успешно с антибактериални лекарства.

При ревматоиден артрит, синовиалните мембрани, за неясни причини секретират големи количества ензим глюкозо-6-фосфат дехидрогеназа, който също разгражда дисулфидните връзки в клетъчната мембрана. В същото време има "изтичане" на протеолитични ензими от клетъчните лизозомите, които предизвикват увреждане на околната костта и хрущяла. Тялото отговаря на този от производството на цитокини, между които има и тумор некрозис фактор # 945; TNF-a # 945. Pathways в клетки, които са предизвикани от цитокините, допълнително да влошат симптомите на заболяването. Хроничен ревматоиден възпаление, свързано с TNF-a # 945;, много често причинява увреждане на хрущяла и ставите, което води до физически увреждания.