дисплей вирус

Вирусите се размножават само в живи клетки. Следователно, култивирането на вируса се извършва в тялото на животно, пилешки ембрион или в тъканна култура

Култивирането на вируса в животни. Най-често този метод се използва за изолиране на вируса не е в състояние да причинят цитопатни ефекти в клетъчни култури и не може да се възпроизвежда в черупката на яйцата (някои арбовируса, бяс, шап вируси, коксаки вируси, лимфоцитна хориоменингит за вируси). Материалът на тест се въвежда в организма с тропизъм на вируса на специфични тъкани.

Отглеждането в черупката на яйцата. В тъканите на ембриона и неговите мембрани, жълтъчната торбичка се размножават много патогенни вируси. Когато се култивират отчита тропизъм на вируса на определени тъкани. За изследвания вземе алантоична течност; това се аспирира с пипета Runflat Chorio-алантоиден мембрана. Наличието на вирус в алантоична и околоплодната течност на заразените ембрионите се определя в имунологични реакции.

Култивиране в тъканна култура. В момента най-голямата практическото прилагане получи еднослойните култури от първични триптинизира и непрекъснати клетъчни линии. Източникът на клетки са ембрионална тъкан и тъкан, получена от човешки време на работа. Най-често се използва клетъчна култура, получена от нормални и ракови тъкани. Широко използвани клетъчни линии, Hela, получени от рак на маточната шийка; Нер-2, получен от злокачествен тумор на ларинкса; HF - от тъканта на рак на устната лигавица. След култивиране в тъканна култура, индикация за наличието на вируса се извършва за идентифициране на специфична клетъчна дегенерация. За тази заразената клетъчната култура е разгледана в ниско микроскоп увеличение и запис на цитопатичния ефект на вируса на клетките, което може да се прояви в образуването на гигантски клетки и symplasts полиядрени; дегенерация на клетки и развитие на клетъчни пролиферативни заболявания, както и образуването на вътреклетъчни включвания в цитоплазмата или ядрото на инфектирани клетки или цвят проба (наличие или липса на растеж на чувствителни системи за изпитване).

Първични клетъчни култури - това монослойни култури, които могат да възпроизвеждат само в основното поколение. За първични култури от изходен материал се използват: ембрионални или зрели тъкани на животни.

Културите poluperivivaemyh клетка - са получени от различни човешки фетални тъкани от първични култури. Клетките poluperevivaemyh култури се размножават бързо, да оцелеят до един месец, с дневна смяна на обстановката. Са силно чувствителни към много вируси.

Непрекъснато клетъчна култура - култура на клетки, които могат да се размножават неограничено ин витро чрез култивиране. На дълги пасажи към първоначалните им качества могат да бъдат променени. За да се запазят първоначалните качества на майка културата на клетки, отгледани в хранителна среда, матраци, passiruya дневно.

Указание за необходимостта от цитопатичен вирус (CPP) действие. CPE - набор от морфологичните и функционални промени в клетката под влиянието на вътреклетъчния вируса, което води до нарушаване на клетъчния метаболизъм, за спиране на синтеза на NK инхибиране на синтеза на протеини. Предлага освобождаването и активирането на клетъчни лизозомни ензими, които предизвикват разграждане на клетъчни компоненти, т.е. развитието на СРЕ, която се изразява в simplastoobrazovanii, включване образование, pycnosis ядро.

Указание за необходимостта от CPE на вирус. Инфекция на изследване се провежда монослойни култури (клетъчни монослоеве) снимки. За тази сканиране микроскоп при ниско увеличение непрекъснат клетъчен слой. културалната течност се аспирира и внимателно пипета с пипета 0,1 мл тестов материал се прибавя към тръбата и културалната среда до 1 мл. За да се контролира броя на тръби остава чиста. Епруветките се инкубират при 37 0 С и mikroskopiruyut дневно за откриване CPD.

Индикация на вируса в gemadsorbtsii реакция. Gemadsorbtsiya - е способността на клетъчната култура, която е заразен с вирус, адсорбира еритроцити. Това явление е свързано с възможността да се включи в мембраната на вирус-специфични протеини хемаглутинин инфектирани клетки с вируса, които са свързани еритроцити поради специални рецептори и се адсорбира върху повърхността на инфектираните клетки.

Указание за необходимостта от цветна проба на вируса. Цветна проба на базата на регистриране на промени в цвета в среда, която съдържа fenolrot (LED) и се поставя в него тестов материал. Ако материалът е с вирус, тя разрушава клетъчния монослой и те стават nesposobnymy в метаболизма. Собствени вирусни метаболитни системи не е, следователно, кисели метаболитни продукти не освобождава, и средата на културата, не променя цвета си. Ако материалът не е вирус, монослойни клетки живеят, функция, секретират киселинни продукти на обмяната на веществата, което води до промяна на цвета на средата, става жълт.