Ap №4
Уфа, BSAU, Катедра по инфекциозни болести,
zoogigieny и vetsanekspertizy
Лабораторна работа № 4
Покритие на капсула и спори образуване микроорганизми. Определяне на микробна подвижност.
Целта на обучението. Научете основните методи за боядисване на спорове. Проучване на видовете микроби, в зависимост от местоположението на камшичета. Определяне на мобилността на микроорганизми.
Материали и оборудване. Културите сено Bacillus, стъклени плочки, стъклени плочки с луната, кавър очила, микроскопи, тампони с бои, потапяне на петрола, памучни тампони алкохол.
Оцветяване на спора. Всички методи за оцветяване спора се основава на предоставяне на проникването на багрилото през кожата achromophilous спорове. Ето защо, използва Mordant.
Оцветяване спор Zlatogorovu. На фиксираната намазка прилага:
Карболин магента, багрило в продължение на 5-10 минути.
2% разтвор на сярна киселина се поддържа в продължение на 2-3 секунди.
Разтвор на метиленово синьо оцветени за 3-5 минути.
Намазки: Противоречия червени вегетативни форми - синьо.
Покритие на капсули. микробна клетка тяло се покрива с насипен слой на лигавицата. В някои видове микроорганизми, този слой се развива много силно и след това той нарече капсула.
Капсула - лигавицата слой обвивка, а муцин субстанция, с високо молекулно полизахарид, който се синтезира в цитоплазмата и секретира на повърхността на клетъчната стена (външната обвивка се получава слой).
Наличието на капсулата е важен индикатор за диагностика при идентифицирането патогени и диференциация на някои инфекции (антракс, пневмококова пневмония, и т.н.). Патогенни микроорганизми образуват капсулата в заразения организъм. Това е фактор, вирулентност и защитава бактериалната клетка чрез фагоцитоза и бактерицидно действие на серума. Техните размери са често по-високи от тялото на микробни клетки. Химичен състав нехомогенни капсули: някои от тях се състоят от протеинов комплекс, други - полизахариди. Капсулата и останалата част от клетките са оцветени различно: първата, тъй като служи като защита, и често се намира в патогенни микроорганизми.
Има няколко метода капсула оцветяване.
Капсулен вещество е силно оцветени. Следователно, когато получаване на състав на капсула за откриване на следните правила:
А намазка се получава от свеж материал, като капсулата бързо лизирани.
Химически определи намазка, metahromoticheskie мастило използва за боядисване, т.е. по време на употреба, цитоплазмата на който е оцветен в един цвят и капсулата - в друга;
Отмива с вода, цитонамазка, трябва да е мека, а в краткосрочен план
Покритие на капсули Mihin. На фиксираната намазка прилага:
Метиленово синьо Loeffler (по-добре от стария разтвор), оцветени в продължение на 2-3 минути. когато затопляне.
Промива се с вода и се суши.
Намазки: тялото на микробните клетки в тъмно синьо, капсула - светло розово.
Покритие на капсули Olten. На фиксираната намазка прилага:
Прясно горещ 2% шафранинов разтвор петно за 5-7 минути.
Бързо се изплаква с вода и се суши.
Намазки: клетка тяло е боядисан в червен цвят тухла, капсула - жълто-оранжево.
Определяне на микробна подвижност
В движи видове транспорт органи са камшичета, които извършват въртеливи движения. Местоположението им върху тялото на различни микробни клетки. Камшичета са с различни дължини. диаметър им е толкова малка, че те не са видими в светлинен микроскоп (под 0.2 микрона). Различни групи от бактерии на броя и местоположението на камшичета различно. Камшичета лоши възприемат цветовете. Методи комплекс оцветители нарушават автентична форма камшичета, така че в лаборатории оцветяване камшичета не извършва и тестваните бактерии в дневна състояние.
В зависимост от разположението и броя на микроорганизмите подразделят камшичета (Фигура 5), за да:
а) monotrihi - микроорганизми, които имат по един от полюсите на едно камшиче. Това е най-подвижни бактерии, активно движение, транслационни (Pseudomonas);
б) lofotrihi - микроорганизми имат по един от полюсите лъч камшичета активно движение, транслационно (Listeria);
в) amfitrihi - микроорганизми, имащи камшичета на двата полюса микробни клетки се движат произволно;
ж) peritrichous - микроорганизми, чиито камшичета са разположени по повърхността на клетките, се движат произволно (Е.коли).
Фигура 5 подреждане на видове камшичета бактерии
За определяне на подвижността на бактерии е необходимо да се използва на култура на не повече от ден-а, като старите култури губят способността да се движат. Изследване, проведено от подготовката смачкана или висящи капки.
"Висяща капка" метод. Висяща капка се получава с вдлъбнатина на плъзгача (полумесец). Edge Lune намазва с тънък слой от вазелин и се прилага към покривно стъкло микроорганизми. Ако те се отглеждат в течна среда, като спад на култура ако гъста, първо на стъкления лист се прилага капка изотоничен разтвор на натриев хлорид и след това културата на микроби. Подсилете предметно стъкло на 180i внимателно спуска върху капака, така че намалението е в центъра на вдлъбнатината, след което се връща в първоначалното си положение. Този препарат се суспендира капчиците с вътрешната повърхност на стъклото на покритие и се съхраняват в запечатан влажна камера Това дава възможност да се наблюдава движение на микроби за продължителен период от време. Лекарството се счита за леко затъмнена област (малка бленда), който увеличава контраста на неоцветени форми.
метод "натрошен капка". Спад на бактериалната суспензия се прилага за конвенционален микроскопско стъкло и внимателно покрийте с капак стъкло и леко натиснете с пръст. Микроскопия е извършена, както и в метода "висящи капка".
1 Техниката на оцветяване MIKHIN.
2 Техниката на оцветяване Olten.
3 Техниката на оцветяване Zlatogorovu.
4 Подгответе натрошени наркотици и висящи капка.
Въпроси за самопознанието
Какво е спор?