За изучаване на морфологията на микроорганизмите

За проучване на морфологията на микроорганизмите: а) получаване на лекарства, б) оцветители.

Проучване микроорганизми морфология.

Бактерии. Морфологията на бактериите зависи от условията на растеж в хранителна среда, температурата и други фактори. Най-характерните за морфологията на бактериите в млади култури. Формата на bacta-RII разделена на сферична, пръчковидна форма и гофрирани.

Морфологични свойства включват не само формата, но и размера на клетките, наличието на спори и капсули, мобилността и естеството на цвят-ки бактерии Грам. За проучване на морфологията на бактериите в laborato- Ries-крайния продукт.

Получаване на лекарства. Препарати (намазка) бяха получени от бактериални култури. Бактериална чиста култура - е в микробна клетка потомство, т.е. rasplodka един вид на микро-ба (без други примеси), отглеждани върху хранителна среда ...

При подготовката на наркотици от култура на бактерии, отгледани върху хранителна среда, трябва да следвате правилата на стерилност. Култура тръби, взети в лявата ръка се поставя между палеца и показалеца си и държани в наклонено положение. Bacto-riologicheskuyu контур (метал или платина тел прът), като дясната ръка и се калцинира в пламъка изгори-ки или алкохол лампата. Малкият пръст на дясната ръка се отстранява памучно марля тапа от тръбата и я държи, без да докосвате съраунд-ING обекти около пламъка на горелката. Краищата на тръбата леко obzhi-AIT пламъка, което стерилна линия на епруветка, охлажда се, без да докосва вътрешните стени. След усилването малко количество култура, цикълът се отстранява от тръба, която е запушалка, носейки чрез пламъка на предварително горелка. Wading-ку постави в статив и започват да се намажете подготовка.

За получаване на препарат от бульон култура в чиста, обезмаслен слайд капка стъкло се прилага със стерилна линия и се суспендира фино разпределяне на повърхността на стъкло под формата на размер намазка 1,5-2,5 cm.

Ако лекарството се получава от култура култивира върху твърда среда, първият на стъклото предизвика спад на стерилна вода, а след това спада допринесе малко количество култура и се стрива.

След прилагане на културата върху стъклени колби калцинират в пламъка на горелката, и продуктът се суши на въздух, след което се фиксира на пламъка провеждане 3-4 пъти с гърба на стъкло (нагоре ход) проходния пламъка на горелката. При определяне микроорганизми умират и са прикрепени към стъклото. Мъртво-стенд-нето, боядисани добре, отколкото живеят.

Покритие на лекарството. Фиксирани образци се оцветяват, защото, когато се гледа под микроскоп неоцветени намазки микробни клетки не са видими. За оцветяване бактерии Laboratories riyah работници използвани (водни) разтвори на анилинови бои (метиленово синьо, фуксин сърцевина, сафра-нин, малахитово зелено и т.н.). Боя се излива в специални бутилки с капкомер.

Бактериите се оцветяват с прости и сложни методи.

Обикновено метод боядисване се извършва както следва: по-Fix Rowan тампон прилага 2-3 капки на воден разтвор на багрило ла (например, метиленово синьо или пурпурно) и се оцветява в продължение на 2-3 минути. След това се измие боята, изплакнете с лекарството vayut вода и суха между листа филтърна хартия и се изследват под микроскоп. За готвене и оцветяващи средства се използват за определяне на миещи средства (фиг. 2). Бутилката се поставя върху стойката, промива препарати на моста е разположен на чашата за източване.

Когато сложен метод оцветяване извършва два пъти пръстен или повече оцветители. Комплекс бактерии оцветяване методи се основават на физико-Chemic кал свойства на микробни клетки. ги прилагат, за подробно проучване на структурата на бактерии и техните различия. Най-честият начин на боядисване сложни бактерии е метода на Грам, предложен през 1884. За оцветяване по Грам на намазка фиксирани върху лента от филтърна хартия се поставя, тинтява виолетово прилага 2-3 капки 1-2 минути,

Хартия отстранява с пинсети, източени боя и остатъкът се излива 2-3 капки разтвор на Lugol за 1-2 минути. След това разтворът се изпразва и намазка се прилага няколко капки етанол отстранени 30-40 S. Тогава намазка се промива с вода и се оцветяват с магента (2-3 капки от разтвора в продължение на 1-2 минути). Лекарството се промива добре с вода и се суши с филтърна хартия и се изследват под микроскоп с обектив потапяне.

Някои от бактериите чрез метода на оцветяване по Грам в цвета лилаво (грам-положителни), другата - в розов цвят (грам-отрицателни). Разликата е, поради неравномерното оцветяване на бактерии химичен състав на клетъчната стена. Грам-положителни бактерии Мюрейн дълги (до 95%), отколкото при Грам (5-10%).

1) клетъчните стени на грам-положителни бактериални Мюрейн на свързани главно с полизахариди, сред които заемат важно място тейхоева киселина. Такива химически състав на клетъчната стена твърдо държи багрило виолетово и обезцветява с алкохол.

клетъчните стени на грам-отрицателни бактерии и Мюрейн свързани главно с липидите. Teyhoenye киселина не. Микробните клетки от такива бактерии не е в състояние да носи здраво виолетов цвят. При лечението на алкохол обезцветени и допълнително оцветяване магента дава клетка розовия цвят.

Оцветяване на спора. За оцветяване на спора в лабораториите на Пол често образуват метод на Muller, Shsffera-Fulton и сътр.

метод на Мюлер е както следва. На фиксираната намазка над пламъка се прилага няколко капки от 5% воден разтвор на хромова киселина за 3-5 минути. След това се промива с вода и се суши. Пуснати на намазка лента от филтърна хартия и 3-4 капки прилагат карбол фуксин Peel оцветени с повторно нагряване (преди появата-ЛИЗАЦИЯ пара) в рамките на 3-5 минути. Боята се отмива и намазка обезцветява с 5% разтвор на сярна киселина в продължение на 30-40 секунди. Намазка отново се промива с вода и се оцветяват с разтвор на метиленово синьо в продължение на 1-2 MIM. След промиване с вода и сушене, филтърна хартия Valnju намазка изследва под микроскоп. Спорите са оцветени в червено, вегетативно част на клетката - в синьо.

метод Schaeffer-Fulton е както следва. Фиксираната намазка оцветени с 5% воден малахитово зелено нагрява, докато парите в продължение на 1-2 минути. препарат бе след това се промива с вода и се оцветяват с 0.5% шафранинов във воден разтвор за 1 минута. остатък мастило Смай-vayut вода и се суши с филтърна хартия тампон. Микроскопия под микроскоп изглеждат зелени спори, вегетативни форми - червени.

Покритие на капсули. Laboratories често провеждат проучвания за идентифициране на депозити на капсули. Капсулата е слабо възприема цвят и прости методи на оцветяване не се откриват. Капсула и бамя Шива метода метод Romanowsky-Giemsa Muromtseva и сътр. Romanowsky-Giemsa е както следва. Фиксирана намазка оцветени с производствена фабрика за бои, която се състои от лазурно и еозин. Боята се разрежда с вода 1:10 и лекарство-боядисани vayut за 20-30 минути. Тогава намазка се промива, суши се с филтърна хартия. Капсулата е боядисана в розово, тялото на микробните клетки - в синьо.

Съгласно метод Muromtseva фиксиран лекарствен оцветени завършен боя Muromtseva 20-30, промива се с вода и се суши. Капсулите са боядисани в бледо розово, микробните клетки - в тъмно синьо.

Плесени. За изучаване на морфологията на гъби препарати бяха смазани от капки, както и за определяне на мобилността на микроби - средства за трошен спад и висящи капка. Тогава лекарствата под микроскоп обектив-ТА 8 и 40 при леко намалена кондензатор.

Дребен метод спад се основава на следното. В средата на чисто обезмаслено слайд покритие бактериологично линия Coy капка микробна култура се отглеждат в течна хранителна среда, внимателно покрита с покривно стъкло. Капка тънък слой запълва пространството между капака и чашата обект Nym.

За получаване на препарат от култура на микроби възрастен ЛИЗАЦИЯ на гъста хранителна среда първоначално нанесено върху стъкло капка от стерилна вода и след това в което го прави малки количества от изследвания микроорганизъм и покрита с покривно стъкло.

Висяща метод капка е както следва. Културата на микроорганизми причини бактериологично контур на стъкления лист, и се прилага на предметно стъкло с вдлъбнатината (отвора). Ръбовете на кладенците преди това намазва с вазелин за да прикачите покритие стъкло. Разглежда под микроскоп за получаване се поставя на етап покривно стъкло на нагоре, т. Е. лещата. Drop виси свободно в Lune, и за дълго време да не изсъхва, което дава възможност за дълъг период от време, за да наблюдава на мобилността на микробните клетки.

В изследване на морфологията на гъбички върху предметно стъкло, нанесете капка вода и от две култура preparoval-ционни игли (игли, въплътени в дървена пръчка), за да една малка част от мицела на гъбата. Неговата внимателно разделен на стъклото, без да унищожава хифи, sporangiophores, конидиофори, прикриването vayut покритие стъкло и изследва под микроскоп.

Mucor (capitatum Тестът) - Единични клетъчни форми. Sporangiophores разположени поединично, по-рядко храсти. Памукообразно мицел в горната част образува множество черни глави. Спорите сив, кръгли или овални, с полупрозрачни на микроскоп.

Penicillium - плесени конидиофори са прегради, разклонени под формата на четки, са разположени в краищата на клонове sterigmata, и върху тях заоблени, гладки спори в вериги (конидии). Мицел е нисък, расте в хранителна среда. Тестът колонии са оцветени в зелено.

Aspergillus - мухъл гъбички, едноклетъчни konidienosets без прегради. Sterigmata намира на прръчковидни удебеляване конидиофори. От sterigmata простират по радиуси спори (конидии) кръгла форма черно.

Млечни плесен - мицел е бял с прегради. Край нишка почивка мицел, спори, които са с кръгла, овална, и правоъгълни форми солна (oidii).

Ацинозна плесен - Konidienosets многоклетъчен. Махнете се от него кръг на зелени маслини с овална Конидите Raspaud Лага в ациозни натрупвания. Тестът колонии са черни.

Шоколад мухъл - Спори цвят шоколадово кафяво, образуват дълги вериги под формата на мъниста.

За изучаване на морфологията на микроорганизмите - 3.5 от 5 въз основа на 4 вота