Венда частно училище - виртуалното училище

ДНК у дома

Наследствеността, гени, ДНК. Изглежда, че тези думи отдавна е престанало да бъде научна гледна точка, във всекидневния живот, а сега са познати на всеки ученици, да не говорим за учениците. Но без ДНК, повечето от нас никога не са виждали, въпреки че, за да го видите - това е съвсем реална, дори и в домашни условия. В един от генетични лаборатории на стената, например, е такова твърдение:

Методи за изолиране на ДНК.

1. Вземете нещо, което съдържа много ДНК. Така например, боб (но могат да бъдат свински черен дроб, хайвер или репички).

2. Място в смесител около 100 мл (половин чаша) на този продукт, се добавя 1/8 чаена лъжичка сол и 220 мл (чаша) от студена вода. Смесете в продължение на 20 секунди. Миксер "готви" мобилния си боб чорба.

3. Щам смес през цедка или парче марля или найлон (Събиране доста подходящо).

Полученият пулп се добави 1/6 от неговото количество (това ще бъде около 2 супени лъжици) на течен препарат (миене на съдове, например) и разбъркайте добре. Оставете за 8-10 минути.

4. Излейте течността в чаши или други стъклен съд, така че всеки се изпълни с не повече от 1/3 от обема.

5. Добавете към всяка епруветка за малко, или сок изцеден ананас или контактни лещи разтвор и внимателно се разклаща, превръщайки и огъване на тръбата (ако разклаща прекалено енергично, счупи ДНК и няма да видите нищо).

6. Наклон тръба и бавно се излива в това малко етилов алкохол и че образува слой на върха на боб смес. Лейте, като алкохол и смеси не е връзка. ДНК се появява във формата на люспи.

7. дървена пръчка (молив) ги хване и да изследва под микроскоп.

Това ръководство е предназначено за учени - до известна степен е шега и никой от тях ДНК по такъв начин, не произвежда, и все пак, ако наистина го използвате, вие ще успеете! възстановяване на ДНК, обаче, е малка, и веществото - не особено чисти, но се вижда през микроскоп дълго, тънки нишки - ДНК кристали - това е напълно възможно.

Какво се случва с боб или свински черен дроб в процеса, описан изкуство и защо крайния резултат ДНК е отделена от всички други вещества в клетката са една голяма част?

ДНК е известно да съществува във всяка клетка, което означава, че можете да го изберете от всеки плат - дори от кости на животни, рибени люспи или дърво, когато клетките не са толкова много, в сравнение с размера на извънклетъчната матрица.

По принцип, ако изследователят не си струва всеки специален проблем, той се опитва да изберете за тъканта, в която малко междуклетъчно вещество и много от самите клетки. Желателно е, че тъканта е лесно се разпада на тези компоненти и клетките не са претоварени протеини (като мускул), липиди (например мазнини) или полизахариди (като мозъчни клетки).

2. Фракциите тъканни клетки.

е необходим за механично се прекъсне връзката между тях, като правило, много по-малко усилия, отколкото да увреди самата клетка: плат миксер, от които ние ще се разделя наследственост вещество в отделни клетки. И тъй като с нашите методи за извличане на ДНК изисква повече или по-малко, отколкото цялата, цели клетки, ясно е, че консерви грах, царевица или осолени херинга за такива експерименти не работят - това е по-добре да се вземе нещо прясно замразена, ако сте сигурни, че продуктът се размразява по време на съхранение на няколко пъти.

Малко необходимо да се добави сол към разтвора, така че клетките не нахлу преди време: вътрешното налягане на съдържанието на клетъчната мембрана от вътрешното налягане уравновесена луга отвън.

3. макромолекула пресата

Както за филтриране, е необходимо да се отстрани механично от клетъчната суспензия всякакви примеси, включително големи парчета плат - всички същите вещества, които ще се обработват сместа няма да могат да проникнат дълбоко в тези конгломерати, и за извличане на ДНК те ще бъдат безполезни.

Не поставяйте твърде много на разтвора в съда, все още има много да се излее, в допълнение, ако сместа е в излишък, ще бъде трудно да се разбърква.

5. освободен от протеини

Какво толкова има в нашия микс! Въпреки това, протеини са - най-вече, и те са най-стабилни комплекси с ДНК. Има техники където протеини се отстраняват от разтвора на няколко етапа. Например, някои от тях са лесно денатуриран и се утаява чрез прибавяне на концентрирани разтвори на соли. В лабораторията на тези техники работят добре, и от грунта, изследователите се освобождават чрез поставяне на тръбите за няколко минути в центрофуга.

Веднага ще пристъпи към пречистването на ДНК от остатъчни протеини със специални ензими, които могат да разрушат тези молекули. Това е такова вещество съдържа сок от ананас. Те се - същия протеин, така че ананасът, от която изцедения сок трябва да бъдат свежи: ензимът не е най-малък шанс да останат без промяна в компот или консервирани храни. Като решение за почистване на обектива, ако ще да го използва - не забравяйте да вземете хапче за отстраняване на протеинови отлагания! На собствените си решения за съхранение на контактни лещи не са активни вещества не съдържат - в противен случай нашите очи, а не да бъде слаб.

Фактът, че ензимите са разположени, може да се съди от намаляване на вискозитета на разтвора. Ако не, сложи сместа на топло място (около 37 ° С) в продължение на половин час, понякога то може да бъде необходимо да се добавят повече сок от ананас или за почистване на обективи решение.

6. ДНК се утаява от разтвора

ДНК сега е плаващ в свое собствено решение. Протеините не се придържат към него, въпреки че останките на различни молекули в сместа е все още много. При лабораторни условия, отстранени тези нежелани части, старателно разбъркване на разтвора с фенол и / или хлороформ. След центрофугиране, тръбите са на дъното на фенол и / или хлороформ с него разтварят протеини и по-горе - водна фаза, съдържаща ДНК. Водната фаза се събира в отделна епруветка и по-нататъшната работа, тъй като относително чист разтвор.

При липса на центрофуга и органични разтворители, работата, която изисква освен специални мерки за сигурност, етапът на почистване в дома трябва да пропусне и утаяване на ДНК директно от "замърсен" разтвор.

Забележка веднъж - да замени водка етилов алкохол или парфюм невъзможно, ако концентрацията на алкохол е ниска и пада, когато се смесва с водната фаза до 60-65% ДНК в кристално състояние няма да мине.
Отчасти поради тази причина, изсипва алкохол в епруветка със сместа ДНК-съдържащи трябва да бъдат внимателно това наслояване от по-горе. След това долните слоеве алкохол частично смесва с разтвора на ДНК, процесът на кристализация започва нуклеинови киселини, и те се издигат към повърхността (където по-концентриран алкохол) под формата на люспи.

Ако се излива алкохол на върха няма да работи и всички безнадеждно смесени, след това с малко количество етанол не успеете, и когато голяма започва да кристализира не само ДНК: в утайката ще падне и протеинови остатъци, и нещо друго от източника на клетките.

7. Какво имаме? (Виж фигурата по-долу)

Чистите кристали от ДНК наподобяват топки от оплетени влакна, но не забравят, че може да се види точно кристално вещество, не си макромолекули, и казват от външния им вид, която съдържа гени, изолирана нуклеинова киселина, е, разбира се, е невъзможно. За да разберете това, е необходимо да се разтворят ДНК. Въпреки това, "да се чете" последователността на нуклеотидите в дома, уви, е невъзможно: тя изисква не само специално оборудване, но също така и скъпи реагенти.

Все пак, ако имате добър поглед върху кристалите и да са имали време да изсъхне, можете да наблюдавате как се разтваря ДНК. Тя започва да се подува и да стане желеподобната медузи, и само след няколко дни, разтворът е хомогенен.

Процесът може да се ускори, ако тръбата често се разклаща.

Желая ви успех започва генетика и молекулярна биология!

Изготвен: биология учител НОУ "Уенди" Leduhovsky NV