Съвременни методи за диагностика на левкемия по говедата
ДНК - свързващ компонент на всеки жив организъм (освен в РНК, съдържаща вируси на определени етапи на нейното съществуване). При мишки и хора, E.coli, и ДНК на слон е разположен на същия принцип - макромолекула полимер, състояща се от единици - нуклеотиди. Нуклеотидите са 4 типа: А, Т, G и С. всички живи същества А, Т, G, С нуклеотиди намерени в ДНК, но в различни комбинации. Колкото по-близо един до друг вид са разположени на еволюционната стълбица, толкова по подобен тяхната последователност на ДНК, в същото време, дори и членове на едно семейство може да намерите такива ДНК сайтове, които ще бъдат строго индивидуален.
Използването на този биологични свойства формира на базата на метода на полимеразна верижна реакция (PCR), който, според американското списание «Наука», е най-забележителното откритие на последните години.
При благоприятни условия, вградени провирус образуват нови вириони, които по-pochkovyvayutsya от клетъчната мембрана, за да инфектират нови клетки.
За диагностика на левкемия прилага клинично, anatomopathological, хистологични, хематологично, серологични и молекулярни биологични методи.
Всички различни клинични признаци на левкемия може да бъде разделена на специфично и неспецифично.
Повечето изследователи сочат към първоначалния вид на неспецифични симптоми, и след това има специфични, които могат да бъдат диагностицирани (Н. Румянцев, TM Shaternikova, 1963; G. A. Simonyan, 1963 EM Nym и др. 1970). Тъй като заболяването се развива в някои животни намаляване на реактивност, летаргия. Относително рано при пациенти с левкемия животни записва нарушение на сърдечносъдовата дейност (глух сърдечни тонове, понякога им дуалността), импулсен слаб пълнене, възможно аритмия. Сред неспецифични симптоми на левкемия включват нередовни смола, диария и запек.
Специфични клинични симптоми, характеризиращи се с прогресивно увеличаване на повърхността (паротидната, подчелюстната, predlopatochnyh, коляното на гънки nadvymennyh) и вътрешни лимфните възли, exophthalmos. (V. М. Lemesh и др. 1987).
Въпреки това, както при всички диагностичен метод, RID не е без недостатъци.
По този начин, присъствието на левкемия латентна фаза, където не антитела на вируса в кръвта, усложнява диагноза на заболяване. Тя е създадена експериментално, че след инфекция на латентен период инфекция (за периода от момента на заразяване до появата на антитела за вирусни антигени) продължава от 2 седмици до няколко месеца, обаче, постепенно се приспадне от стада RID-позитивни животни теоретично е възможно да се постигне пълна собственост възстановяване от левкоза (A . Burny, Bruck С, Cleuter Y. 1985). Независимо от това, в подобряването на стада, не са имали контакт с други хора, след няколко месеца или дори години изолирани животни с антитела към VLKRS (VM Nah- Мънсън, 1986). Това може да се обясни левкемия характеристика феномен на имунологична толерантност, когато наблюдава virusonosi- менти без антитяло. Имунологична толерантност - частична или пълна загуба на способността на организма да участват в имунния отговор на специфичен антиген.
Във връзка с гореизложеното, с цел да се ускори заздравяването на пълни говеда стада от левкемия, че е целесъобразно, заедно с косвени методи ELISA и RIA се използват, които откриват директно вирус или провирус в заразените животни.
В момента широко разпространеното използване на PCR при диагностицирането на левкемия, по наше мнение, е ограничен от следните фактори: високата цена на оборудването и реактиви за PCR, липсата на пазара на сертифицирани диагностика и не е напълно наясно с мястото на PCR диагностика в системата за борба с левкемия дейности.
Възможно е, че въпреки много високата чувствителност на PCR, в процеса на развитие Leu уловки са такива периоди, когато нивото на провирусна ДНК е минимална. В такива случаи, RID е по-информативно. Така че има смисъл "почиства" PCR, Ридберг и IFA-негативни животни в такава комбинирана употреба на диагностичните методи, гарантирани бързо и ефективно възстановяване на стадото.
Важно приложение е разследването на PCR внесени добитък намира в карантина, за да се предотврати VLKRS доставка от една държава в друга.
По този начин, има най-малко три области на успешното прилагане на метода PCR при диагностицирането на левкемия: идентификационни носители провирусна ДНК между Rydberg отстъпка и IFA отрицателни животни в изследването на нови внесени селскостопански животни и откриване на инфектирани телета в ранна възраст.
В биотехнологични лаборатории SKNIIZH използване на PCR метод се изследва 1013 кръвни проби за присъствие на провирусна ДНК VLKRS. Таблицата показва различните VLKRS инфекция животновъдни ферми.
Анализ на резултатите, ние бихме искали да се отбележи следното. Домашни само една от фермите (CJSC SCWO) са напълно свободни от носител провирусна ДНК LKRS.
Юници от Холщайн черно-шарен порода в тази икономика са били внесени от Холандия и не са имали контакт с местните животни. Сред другите внесените животни (АД "Plemzavod" Кубан "п = 354, подадена от Унгария) чрез RIA не са идентифицирани положително реактивен и PCR не успява да открие един провирусна ДНК LKRS носител. Освен това, провирусна ДНК в пробата се идентифицира и телешки кръв, получена от PCR положителни животни. Провирусно превозвачи са били отстранени от стадото.
Фермата на "отглеждане комплекс" Olginsky "от 97 анализирани проби 67 се получават чрез Rydberg отрицателни животни. 15 от тях са PCR позитивни.
При анализа на данните за превоз на провирусно, ние открихме, че процентът на заразените телета за 3-4 месеца (на базата на PCR изследвания) на практика съответства на процента на АПИ-позитивни животни от същите услуги, но в по-късна възраст (до 3 години). Това най-вероятно означава, че инфекцията на животни се извършва в ранните етапи на живота (трансплацентарно и до 3 месеца), а първите имунологични признаци на заболяването се появяват в повечето животни след първото кърмене.
Ето защо, ако разделянето се извършва чрез PCR юници на медии провирус и здрави през първите 2-3 седмици от живота на животното, можете да възстановите здравето на икономиката е много по-бързо.