Серологични тестове в лаборатория диагностицирането на инфекциозни заболявания

В защита на тялото срещу чужди антигени са решаващи имунологични механизми, които антитела и имунни клетки. В основата на имунологични механизми - специфична реакция между антитела или лимфоцити (образува под влияние на тялото, уловен в антиген) и антиген. Основните функции на антитяло - антиген свързващи и последващо отстраняване от тялото.

Въпреки това, тези реакции между антитела и антигени, могат да възникнат извън тялото (ин витро) в присъствието на електролит и възможно само в присъствието на комплементарността (структурно сходство, афинитет) на антигена и антитялото.

Като специфично антитяло срещу специфичен антиген може да разпознава и идентифицира от други антигени и серумни антитела срещу известен антиген.

Антиген-антитяло реакция ин витро специфичен феномен придружено от вид - аглутинация, утаяване, лизис.

Така всички серологични тестове, използвани за две цели:

1) откриване на антитела в серума на пациента, използвайки стандартни-диагностика антигени (за серологична диагностика на инфекциозно заболяване);

2) да се идентифицират неизвестни антигени чрез известни стандартни серуми, съдържащи специфични специфичност антитяло (серологично определяне на патогени).

Например, ако серум на пациента реагира със специфични микробни антигени - това означава в серума на пациента има антитела срещу този микроорганизъм.

Серологичната диагностика - взети стандартен антиген (diagnosticum), който е жив или инактивиран бактерии, вируси или техните антигени (компоненти) в изотоничен разтвор.

Серологично идентификация - използва стандартен антисеруми, които са получени от имунизирани животни (големи количества антитела се появяват в кръвта на животни, в резултат на множество имунизации агент).

Аглутинацията - серологичен реакция между антителата (аглутини) и антигени (agglyutininogenami), разположени на клетъчната повърхност на бактериални, и се образува в резултат на антиген-антитяло комплекс (аглутини).

аглутинация механизъм - под влиянието на йони електролитни намалява отрицателен повърхностен заряд на бактериалните клетки и така те могат да се доближи до разстояние, при която се адхезията на бактерии.

Микроелементи, микроскопска картина лепя:

1) На-аглутинация (соматична) - зърна, микроскопия - бактериални клетки полюси залепени заедно за образуване на мрежа.

2) Vi-аглутинация (Капсула) - гранули, микроскопия - свързване възниква през повърхността на бактерии клетка.

3) Н-аглутинация (флагелати) - аглутини взаимодействат с камшичета имобилизиране бактерии чрез микроскопия - krupnohlopchataya, адхезия на бактериални клетки в камшичета.

Реакционната аглутинация се използва за откриване на антитела в серума на пациенти, като бруцелоза (реакция Райт Heddelsona), коремен тиф и паратиф (Widal реакция) други инфекциозни заболявания, както и определянето на патогена, изолирана от пациента. Същата реакция се използва за определяне на кръвна група, използвайки моноклонални антитела срещу алоантигени еритроцити.

Различни изпълнения прилагат реакция аглутинация: разгърнати, ориентиране, непряко и сътр.

За определяне на антитела в пациент представляват аглутинация разположени: от разреждания на серума на пациента се добавя суспензия от убити бактерии (diagnosticum) и след няколко часа инкубация при 37 ° С под внимание най-високо разреждане (титър) серум при които са настъпили аглутинация, т.е. се образува утайка.

Символи и скорост аглутинация зависи от вида на антиген и антитяло.

Ако е необходимо да се определи патогена изолирани от пациент, избран индикативна реакция аглутинация използване диагностични антитела, т.е. провеждане на серотипа патоген. Ориентиране на взаимодействие се осъществява нанася върху предметно стъкло. К 1 капка диагностичен имунен серум при разреждане 1:10 или 1:20 се прибавя чиста култура на патогена, изолирана от пациента. Ако се появи флуоресцентна утайка, след което реакцията се провежда в епруветки с нарастващи разреждания диагностика серум се добавя към всяка серумна доза-W 2 капки агент суспензия. Реакцията се счита за положителна, ако аглутинация наблюдава при отглеждане, в близост до диагностичен серумен титър. Контролите (серум разреден изотоничен разтвор на натриев хлорид или суспензия на микроби в същия разтвор) се утаяват под формата на люспи трябва да отсъства.

Други свързани бактерии могат да бъдат слепени същата диагностична аглутиниращ серум, което ги прави трудно да се определи. Следователно аглутиниращи антисеруми са адсорбирани, които кръстосано взаимодействие антитела се отстраняват чрез адсорбция техните съответни бактерии. В тези съхранени серуми антитела, специфични само за дадена бактерия. Получаване начин monoretseptornyh диагностичен аглутинация серуми бяха помолени A.Kastellyani (1902).
индиректна реакция (пасивни) хемаглутинация (IHA) се основава на използването на червените кръвни клетки (или латекс), адсорбирани на техните повърхностни антигени или антитела, които взаимодействат със съответните антитела или антигени от серума на пациенти причинява свързване и загуба на еритроцити на дъното на епруветките или клетките под формата на печени утайка , RNGA се използва за диагностициране на инфекциозни заболявания, определяне на гонадотропин в урината при установяване на бременност за откриване на свръхчувствителност към лекарства и хормони в други случаи.
инхибиране на хемаглутинация (HAI), базирани на блокадата, инхибиране на вирусни антитела на имунен серум, в резултат на вирус да аглутинира червени кръвни клетки губят собственост. HAI използва за диагностициране на много вирусни заболявания, агенти, които (грипни вируси, морбили, рубеола и кърлежи енцефалит др.) Може да аглутинира еритроцити на различни животни.
Аглутинацията за определяне на кръвни групи се използват за установяване на система АВО чрез еритроцитите RA, използвайки антитяло на кръвна група А (II), В (III). Контрол е серум не съдържа антитела, т.е. AB (IV) антигени на кръвни групи, съдържащи се в червените кръвни клетки от групи А (II), В (III); Негативен контрол не съдържа антиген, т.е. използване еритроцити група 0 (I).
В реакция на аглутинация за определяне Rh Rh серум използва (най-малко две различни партиди). В присъствието на теста върху мембраната на червените кръвни клетки Rh антиген аглутинация на тези клетки. Контрол са стандартни Rh-положителни и Rh-отрицателни червени кръвни клетки от всички кръвни групи.

Аглутинацията за определяне antirhesus антитяло (непряко взаимодействие на Coombs) се използва при пациенти с интраваскуларна хемолиза. Някои от тези пациенти показват, Rh антитела, които са непълни. Те взаимодействат специфично с резус-положителните червените кръвни клетки, но не доведе до тяхното аглутинация. Наличието на тези непълни антитела се определя индиректно взаимодействие Coombs. За тази Rh антитела в Rh + еритроцити бяха добавени положителен антиглобулинов серум (антитяло срещу човешки имуноглобулини), което води до аглутинация на еритроцитите. Чрез взаимодействие на Coombs диагностицирани: патологични състояния, свързани с интраваскуларна лизис на еритроцити имунната произход, например хемолитична болест на новороденото: Rh-позитивни еритроцитите се свързват към плода кръв циркулиращ непълни антитела Rh фактор, който преминава през плацентата на резус отрицателни майки.

Реакция koagglyutinatsii - разнообразие RA: патогенни клетки, определени от стафилококи предварително обработен диагностичен имунен серум. Staphylococci, съдържащ протеин с афинитет към имуноглобулин неспецифично адсорбира антимикробни антитела, които след това взаимодейства с подходящи активни центрове микроби, изолирани от пациенти. В резултат koagglyutinatsii образувани люспи, състоящи се от Staphylococcus, антитела, диагностични серум и определени микроби.

Схема за създаване реакция аглутинация.