Разработване и използване на методи за определяне на серотипа циркулиращите вируси генотипове
S.L.MUKOMOLOV * A.A.KOLOBOV ** I.A.SOZINA * M.LAPPALAYNEN *** E.A.KAMPE-NEMM ** N.V.ZHELEZNOVA * II Малков * V.A.SHPEN **
aboratoriya вирусен хепатит Sofiyaskogo Институт Пастьор, * Лаборатория на Научно-изследователския институт по чиста биохимикали ** пептиди, Департамента по вирусология, Университета на Хелзинки, Финландия ***
Вирус на хепатит С (TOS) се отнася до патогени с изключително изразена хетерогенност на населението. Установено е, че пациенти с хронични HS, свързани с различните генотипове на вируса по различни начини, за да се срещнат interferonoterapiyu.Opredelenie генотипове HS важни епидемиологични проучвания, тъй като той позволява прехвърлянето на добре документирана патоген.
За изследване на разпространението на GS варианти на вируса в някои области на България (София, Нижни Новгород, Уфа, Белгород) и съседните страни (Беларус, Казахстан, Грузия) метод на серотипа ние бяха тествани от анти-NS4 положителни серуми, получени от 474 души, включително 157 дарители кръв на 237 пациенти с хепатит с, и 80 лица от рисковите групи (интравенозно наркомани, пациенти с рак, пациенти на хронична хемодиализа центрове, туберкулоза болници, и др.).
Резултатите от "сляп" тестване 154 серуми с известните генотипове на вируса на хепатит С чрез RFLP са показани в Таблица №1. Като цяло serotipirovano 148 проби (96.1%). Пълен мач серен- и генотипове, наблюдавани в 130 от 148 серуми (87.8%). За отделните генотипове тази цифра е по-различно. Най-високата честота на съвпадение резултати, наблюдавани за HCV-1 - (92.5%) с индекс на разсейване от 87.1% до подтип 1b серум до 100% за серуми със смесени подтипове 1а + 1с; за HCV-3 - 94.3% (всички серум третира подтип 3а). Най-ниският процент на съвпадение на резултатите се наблюдава при изпитването на серумите на RFLP принадлежащи към HCV-генотип 2 (80%). Когато серотипа 5 серуми беше установено, че може да се дължи на генотипа HCV-4. Въпреки това, когато се сравняват резултатите с мач данни RFLP се наблюдава само в 2 проби (40%).
Високата корелация на резултатите, определящи генотипи GS получи две много различни методи, позволяващи за изучаване на циркулиращ серотип на вируса HS варианти в определени територии. Резултатите от тази част от проучването са обобщени в Таблица №2. Като цяло, всички изследвани области, определени генотипове циркулация 3 GS, в няколко случая в районите четири определени генотип на HCV-4. Най-често тя се определя HCV-генотип 1 (от 47.1% в серум от Грузия до 74.4% - от Беларус). На второ място в класацията, от скоростта на откриване на почти всички заети площи HCV-генотип 3 (15.5% в серуми от Беларус до 34.0% - от Нижни Новгород). Много по-малко проучени серум съдържа тип-специфични анти-HCV NS4-2. Максималната честота на откриване на този генотип е създадена в серума на Беларус (12.7%), Казахстан (13.7%) и най-малко - в серума на София (3.8%). В 35 серуми от всички региони проучени, с серотипа за установено наличието на анти-NS4 различни генотипове (генотипи смесени). Най-голям дял на серуми със смесени генотипове в пробите направени бяха определени HCV-1 и HCV-3 (26 от 35 - 74.3%) в същото време, т.е. най-честите генотипове. Други варианти на комбинации са много редки - HCV-1 + HCV-2 (8,6%), HCV-2 + HCV-3 (11.4%). HCV-1 + HCV-4 в комбинация разкрива две серуми от Джорджия (5.7%).
Материалите от настоящото изследване показват, че използването на синтетични пептиди, съответстващи на антигенни детерминанти на не-структурен протеин NS4, като основен компонент имуносорбентен ELISA могат успешно да се открият генотипове на вируса в серума на GS заразени с причинител на хората и следи патогена циркулацията genovariants в регионите.
Таблица 1. SOPOSTAVLENIE PEZULTATOV генотипове ЗА ОПРЕДЕЛЯНЕ VIPUSA GEPATITA С METODAMI RFLP И SEPOTIPIPOVANIYA