Основно проучване имунодефицит на клетъчния имунитет
Изследване на повърхностни антигени на Т-лимфоцити. Определяне на повърхностни антигени на Т лимфоцити чрез поточна цитометрия позволява да се проучи тяхната узряване, диференциация и активиране (таблица. 18.8).
Ин витро стимулиране на Т-лимфоцити. Нарушения на съзряване и диференциране на Т-лимфоцити с имунна недостатъчност на клетъчния имунитет възникнат на различни нива. Така, в тежък комбиниран имунодефицит нарушен узряването на Т-лимфоцити в тимуса, което се проявява в липсата на повърхност CD2 антиген на Т-лимфоцити. При това заболяване, липсата на CD3 също са възможни. И CD4 Т-лимфоцити неспособност да се синтезира цитокини. лимфоцитите синдрома изложени на мембраната на активирани Т-лимфоцити не са антигени HLA клас II. Когато синдром синдром на Wiskott-Aldrich намалена експресия на CD43 антиген. участва в активирането на Т-лимфоцити.
Тежки имунодефицитни дефицит на клетъчно-медииран имунитет е придружен от тежка дисфункция на Т-лимфоцити. въпреки че абсолютната и относителната броя на тези клетки може да бъде нормално.
За ин витро стимулиране на Т-лимфоцити, като се използват следните съставки:
- Митогени - PHA. конканавалин А, и т.н. -. причини неспецифично (не се дължи на свързването към рецепторите антиген разпознаване) активиране на Т-лимфоцити.
- Разтворими антигени - антигени от кандида албиканс. тетаничен токсоид - свързване към антиген-рецептори памет Т-лимфоцити, за да предизвика специфично активиране на тези клетки.
- Алогенните клетки (смесена лимфоцитна култура) активират Т-лимфоцити, като мечка на антигени си повърхност HLA клас II.
- Антитела към повърхностните антигени на Т-лимфоцити, които участват в тяхното активиране, - CD2. CD3. CD43.
Активирането на Т-лимфоцити обикновено се оценяват по следните параметри:
Под действието на митогени, антигени и алогенни клетки в покой Т-лимфоцити се активират, превърнати в бластни клетки и започват да се разделят.
Следователно, активирането на лимфоцитите се оценява чрез инкорпориране на3Н-тимидин или 14C-в ДНК. Лимфоцитна реакция стимулатор варира в зависимост от дозата и продължителността на инкубацията, следователно, преди изследването е необходимо да се изгради нормалните криви на нивото на включване на изотопа стимулант на дозата и времето на инкубиране на лимфоцити. Нивото на радиоактивността на клетките се определя чрез stsintillyatsioinogo брояч и изразени като брой на минута. Резултатът се оценява от нивото на радиоактивност нестимулирани (спонтанно пролиферация) и стимулирани лимфоцити и индекса на стимулиране (съотношение на радиоактивност стимулирани лимфоцити ниво радиоактивност на нестимулирани лимфоцити). Освен това е възможно да се изчисли съотношението на нивата на радиоактивност пациенти стимулирани лимфоцити и здрав човек. Спонтанно пролиферация на лимфоцити се увеличава при пациенти, които са имали множество кръвопреливания. пациенти с алергични и автоимунни заболявания. бактериални и вирусни инфекции. както и при новородени.
В смесена лимфоцитна култура се използва за оценка на способността на Т лимфоцити разпознават антигени HLA алогенни В-лимфоцити и моноцити. Стимулиране на клетки (алогенни В клетки) инактивирани чрез облъчване или митомицин. Реакцията на лимфоцити на пациента се оценява чрез включване в ДНК белязан тимидин.
За да се оцени клетъчния имунитет имунизация динитрохлорбензол понякога се използва. Той се прилага интрадермално и само за диагностични цели. Въпреки това, тъй динитрохлорбензол има силно дразнещо и канцероген, изследването се извършва рядко.
Генетични изследвания. При пациенти с тежко увреждане на клетъчния имунитет може химеризъм (наличие на клетки от различни генотипове в едно тяло). Той се среща в контакт с майката кръвни клетки в кръвта на плода. преливане на кръвни съставки, и трансплантация на костен мозък. Ако кръвта на пациента съдържа противоположния пол клетка химеризъм е лесно да се идентифицират, намирането на клетки с мъжки и женски кариотипове. В други случаи, провежда кръв типизиране на HLA клетки от пациента. Това изследване показва също, липсата на HLA клас II антигени върху активирани Т-лимфоцити, когато са изложени синдром лимфоцити.
Сканиращ електронен микроскоп показва Т лимфоцитите върху повърхността на които няма микровласинките, което е типично за синдром на Wiskott-Aldrich.
тимус биопсия се прави в редица случаи за потвърждаване на диагнозата на тежък комбиниран имунодефицит. В недостатъчност на клетъчния имунитет определено retikuloepitelialnyh групи от клетки в тимуса, без Hassall телца и ясна граница между кората на главния мозък и гръбначен мозък, рязък спад в броя на тимоцити. Thymus биопсия извършва хирурзи, притежаващи уреди на тази операция.
Биопсия на лимфен възел. Когато клетъчен имунен дефицит в биопсия на лимфен възел разкри изпразване paracortical област. Поради риска от инфекция на раната и анестезия усложнения от биопсия на лимфен възел се извършва само когато други лабораторни тестове не позволяват да се потвърди диагнозата.