Обратната транскриптаза (обратна транскриптаза)

Обратната транскриптаза - ензим, който синтезира ДНК от РНК.

Някои от вирусния геном не е ДНК, както обикновено, и РНК. Тези вируси са наречени ретровируси (ретро - назад). В 1970 гр. D.Baltimor H.M.Temin отвори и механизъм за предаване на информация на вирусна РНК в ДНК, т.е. противно на това, което се случва в клетките на висшите организми. Този процес се нарича обратна транскрипция. и ензима, носи, се нарича обратна транскриптаза или обратна транскриптаза (revertase).

Обратна транскриптаза или ензима обратна транскриптаза на РНК-зависима ДНК полимераза, чрез които обратна транскрипция - - синтеза на ДНК на шаблон на РНК (обратна транскриптаза, [лат transcriptio - пренаписване.); кодирана от геномите на някои РНК вируси и подвижни генетични елементи на генома на висшите организми, важна "инструмент" за genenoy инженерство. Обратната транскриптаза има най-малко три ензимни дейности:

1) ДНК полимераза, като се използва като шаблон и двете РНК и ДНК;

2) активността на RNase Н хидролизира РНК в РНК-ДНК хибрид, но не един или двойно-верижна РНК, и

3) ендонуклеазна активност ДНК.

Отваряне независимо D. Н. Temin и Балтимор през 1970 г., в РНК онкогенни вируси (Нобелова награда за 1975 г., заедно с R. Dulbecco).

По този начин, на обратната транскриптаза може да извършва ДНК синтез на RNA шаблон, полимеризация четирите дезоксирибонуклеозид трифосфати. И точно както ДНК полимеразата, са достъпни само в семето.

Обратна транскриптаза използва в синтеза на двойноверижна ДНК, комплементарна на РНК (особено иРНК), за последващо клониране в плазмидни вектори, при получаването на библиотеки (klonotek) сДНК. Обратната транскриптаза, ДНК полимерази като могат да се използват за въвеждане на радиоактивен или флуоресцентен маркер в ДНК сонди съставени подходящо белязани дезоксирибонуклеозид трифосфати.

Способността да се синтезира ДНК на шаблон РНК, при определени условия е доказано за термостабилна ДНК полимераза Thermus Thermophilus. Това позволява да се използва за директно откриване на специфични РНК в биологични проби от PCR. Съвременните версии на този подход правят възможно в една реакционна смес (и тръбата) за синтезиране на обратно транскрипторна реакция, малък брой копия на амплифицираните ДНК фрагменти върху шаблон РНК, която веднага се използва същия ензим като матрица по конвенционален PCR (една тръба PCR).

Обратна транскриптаза птичи вирус на миелобластоза активност в допълнение полимеризация притежава 5 '-> 3' и 3 '-> 5' дейности ekzoribonukleaznymi и разцепва РНК в РНК-ДНК хибриди от механизъм производителност,.