Лабораторна диагностика на микоплазмени инфекции

Материал за изследване може да бъде в кръвния серум на пациента и секрети от инфектирани органи (слюнка и други подобни).

1. бързи тестове (реакция): ELISA и IFA - за откриване на антиген; PCR

2. бактериологични метод (количествен култура) се използва за откриване на урогениталния микоплазма.

3. Serodiagnosis (реакция): IFA и RIF - за откриване на антиген;

4. Molecular генетична диагностика - PCR (количествено), ДНК-ДНК хибридизация.

DEMONSTRATsIIRikketsioznye антигени сух живо комбинирана ваксина E тиф, сух жива ваксина на koksiell burneti М-44, диагностика серум, антибиотици.

Урок номер 26TEMA: Основите на медицинска микология

ПРОВЕРКИ

1. Методи за лабораторна диагностика на гъбични инфекции и техните характеристики. Обща класификация на гъбични инфекции и общите характеристики на групи. 2. патогени повърхностни микози (keratomikozov): забелязан лишаващи черен лишеи, черен Пиедра, бяло Пиедра. Микробиологична диагноза. Патогените epidermophytosis фута (дерматомикози) спортна и ноктите, Microsporum, Trichophyton, favus, rubrofitii. Микробиологично diagnostika.3. Патогени или подкожни микози subkutannyh: споротрихоза, Хромобластомикоза, мицетома, feogifomikoza. Микробиологично diagnostika.4. агенти причинители на системни или дълбоки микози: хистоплазмоза, бластомикоза, паракокцидиомикоза, кокцидиоидомикоза, криптококоза. Микробиологично diagnostika.5. агенти причинители на опортюнистични гъбични инфекции: кандидоза, зигомикоза, аспергилоза, penitsillioza, Fusarium, пневмоцистоза. Микробиологично diagnostika.6. Патогени mycotoxicosis, микробиологична диагностика. Некласифицирани гъби: lobomikoz, rhinosporidios. Микробиологична диагноза.

Характеристики gribovGriby - хетеротрофни еукариоти с храна за процес на адсорбция,

Размножава се по полов път или безполово чрез спори. Клетъчната стена се състои от 2 часа слоевете naruzhnogo- vnutrennego- хитин и целулоза.

Структура гъбички: гъбички тяло може да се състои от една клетка или клетки, общата клетъчна стена - хифи, които, когато са сглобени форми на мицел.

Възпроизвеждането на гъбички: полово или безполово чрез спори.

Видове гъбички

3. Идентификация на културни и биохимични свойства.

4. Определяне на изолирана култура противогъбично метод чувствителност диск дифузия.

Заболявания, предизвикани от патогенни гъбички се наричат ​​микози. Микози са класифицирани в зависимост от процеса на локализация и агресивност на патогена с нормална или отслабена организъм. Разпределяне повърхност (keratomikozy), кожа (дерматомикози), подкожно и дълбоко (системно), опортюнистични микози и mycotoxicosis.

В случай на повърхностно развитие микози гъбички се появява на повърхността на епителните тъкани (епидермис, коса, нокти) без проникване в жива тъкан. Имунен отговор и възпалителен отговор отсъстват. Пораженията не са опасни за живота, често не изискват специална обработка и да се създаде само козметичен проблем. Примери на микози са многоцветни (питириазис) лишей (патоген -. Pityrosporum пърхот биовар orbiculare) (. P.furfur биовар овале) и себореен дерматит.

В случай на кожни микози инфекция се ограничава до роговия слой на епидермиса, поражението на ноктите и косата. Основните симптоми, причинени от възпалителен отговор в епидермиса, дермата и космените фоликули. Гъбични метаболити задействат остро възпаление и проникване на антигени в епидермиса беше имунен отговор към развитието на забавен тип свръхчувствителност. кожни лезии и ноктите (онихомикоза) може да предизвика Candida и (рядко) nedermatofitnye плесен (различни видове Aspergillus. Penicillium. Alternaria. Fusarium и т.н.). Винаги е вторичен опортюнистични инфекции, свързани с отслабването на съпротивителните сили на организма.

Подкожните микози възникват при влачене травматични сапрофитни гъби спори в подкожната тъкан (например, трески). Налице е хронична възпалителна реакция (гранулом, понякога с гноен компонент), която е разпределена към кожата (дермата и епидермиса), но обикновено не се разпростира извън първичния тумор. Най-често срещаните подкожни микози се срещат в тропическите страни. Повсеместност има само споротрихоза (Sporothrix schenckii).

Системни (дълбоки) микози са най-тежки гъбични инфекции. Патогените дълбоки микози - диморфни гъбички, които живеят в почвата или разлагаща органични основи и са намерени в някои географски райони. Човешки инфекция се проявява чрез инхалация на патогена. Основният фокус на отглеждане - лезията светлина, но дихателните пътища обикновено е лека и отзвучава спонтанно. По-често възникват разпространени форми, включващи вътрешни органи, следователно, една група от заболявания е известен също като системни микози. Прогнозата на разпространените форми на непречистени тежко и често с летален изход.

Гъбите имат широк арсенал от адхезионни фактори, които могат да бъдат закачени на различни тъкани и изкуствени повърхности. Колонизацията на гъбички се придружава от производството на хидролитични ензими, които увреждат бариери тъкан, улесняване на проникването. агенти причинители на гъбични инфекции не произвеждат специфични токсини, и се концентрират до патогенезата на възпалителни процеси на мястото на гъбични заразяване. разработване на грануломи, понякога с нагнояване в центровете на колонизация. За системни микози средства, характеризиращи се с инвазия на съдовата стена с тромбоза, тъканна исхемия и некроза, отваряне на пътя за инфекция дълбоките тъкани. Тази група включва хистоплазмоза (Histoplasma capsulatum), Cryptococcus (Cryptococcus neoformans), бластомикоза (Blastomyces darmatidis), кокцидиоидомикоза (Coccidioides immitis) и паракокцидиомикоза (Paracoccidioides brasiliens).

Опортюнистични гъбични инфекции, причинени сапрофитни видове проникващи от външната среда или част от микробни общности на човешкото тяло. Патогени е много ниска, и те обикновено не причиняват поражения при здрави лица, както и да се развива само в имунокомпрометирани тяло. Рискови групи са пациенти с диабет, изгаряния, травма, злокачествени тумори, недоносени новородени, пациенти със СПИН и други. Предразполагащ фактор е продължителна употреба на антибиотици. Повечето от агентите на опортюнистични микози се отнася до сапрофити, които инфектират хората чрез респираторния тракт или храносмилателния тракт. Най-добре известни заболявания на тази група включват аспергилоза (Aspergillus fumigatus), зигомикоза (някои видове Rhizopus, Mucor, и т.н.) и penitsillez (някои видове Penicillium). Спектърът на гъбични инфекции, постоянно нараства, главно поради епидемията от СПИН. Въпреки това, най-често между патогени на вторичен гъбични инфекции кандидоза случва - може би само опортюнистични микози ендогенен характер.

Fungi използва не само отслабени имунитет, но могат активно да блокира имунния отговор чрез подтискане на функцията на Т-лимфоцити, макрофаги, неутрофили, комплемент (gliotoksin Aspergillus fumigatus. Мано C.albicans и др.).

Mycotoxicoses. Mycotoxicoses - група от заболявания, причинени от поглъщането на токсични метаболити, микотоксини, генерирани от някои гъбички колонизиращи храни или селскостопански продукти. Най-често срещаните патогени микотоксини - гъби от рода Aspergillus и Fusarium.

Имунитет. Микоза (с изключение на повърхността) са придружени от широк спектър от имунни отговори. Важна роля в противогъбично защитата се играе от два механизма: Т-зависим отговор на макрофаги, които действат в рамките на грануломатозно възпаление и неутрофили, подкрепен от антитела и комплемент. Отслабването на един от трите елемента (фагоцити, комплемент-antitala) намалява ефективността на реакцията, предразполагащ към инвазивни усложнения. Не е случайно, че пациенти с неутропения са изложени на риск за развитие на общи форми на опортюнистични гъбични инфекции.

Микробиологична диагноза на гъбични инфекции. За диагностика на гъбични инфекции се използва микроскопско (включително хистология), микологичен (култура), серологични, алергологични, методи за молекулярно-биологични и други изследвания. В зависимост от клиничните прояви на тест заболяване материал са: засегнатата коса, люспи кожа, нокти, така, кожата и ноктите skarifikaty, гнойта, храчките, пунктата лимфните възли, костен мозък, вътрешните органи, кръвта, гръбначно-мозъчната течност, стомашен сок, жлъчка, табуретка, . парченца тъкан и т.н., с цел по-добре да се разгледа засегнатата област се използва лупа, при пациенти микроспория - луминесцентна лампа, в светлината на който засегнатото косата е смарагдовозеления сияние.

Микроскопични метод. Микроскопско изследване на оцветени и неоцветени проучване (роден) материал. Когато микроскопия на родния препарати може да се определи характеристика подреждане на спори в засегнатата косата, кожата люспи в мицела и ожулвания с нокти. Латекс състави са получени от материал с вискозна или течна консистенция. Най-често използваните методи Грам петното (гъбични клетки, обикновено Грам-положителни), Romanowsky-Giemsa, Gomori (metenaminovym сребро), McManus (перйодна киселина и Schiff реагент), Ziehl-Neelsen и др. Ако е необходимо да се прилагат луминесцентно имунен серум (RIF).

Биологичната метод. Инфекцията се провежда в експериментални животни за изолиране на чиста култура на гъбички, изследването на патогенни свойства патоген, тестване на нови лекарства. Материал прилага на животни по различни методи, да се вземе предвид естеството на избраните култури, дадени на животните аутопсия и хистологично изследване реакция makroorgnizma.

Серологичната Методът се използва за диагностициране на хистоплазмоза, бластомикоза и други гъбични инфекции. Използвайте RA, RP, IHA, ELISA, IFA, имуноблотинг.

Алергична метод. Алергичен получаване на проба от интрадермално приложение на алергени съответния (суспензия от убити гъбична култура филтрати, полизахарид и протеинови фракции от патогени клетки). Се отчитат на 20 минути (директни) и 24-48 часа (забавена реакция).

Хистологично изследване може да открие на гъбата в тъканите, да изучават своята морфология и особености на патологичния процес, причинена от него в организма.

Нови подходи за лабораторна диагностика се основава на откриването на гъбични инфекции в кръвния серум и други субстрати fungalnyh антигени, такива като манан (кандидоза) и галактоманан (аспергилоза), специфичните метаболити (D-манитол, оксалова киселина - аспергилоза) и генетични маркери в PCR. Тест система за PCR позволява откриване на до 40 вида гъбички, включително всички клинично важни видове.

Гъби от рода Candida - основните представители на опортюнистични гъбични инфекции. Кандидоза се причинява повече от десет вида на дрождени гъбички от рода Candida на (C.albicans, C.tropicalis, C.parapsilosis, C.krusei, C.lusitaniae, C.glabrata и др.). Абсолютен лидер е С. albicans - нормално сътрапезник на устната кухина, червата, влагалището, а понякога и на кожата. Кандидоза - най-често срещаните опортюнистични гъбични инфекции на човека, тъй като С. albicans превозвач има почти универсален характер на всяко сериозно нарушение на локална или системна имунитет може да предизвика тяхното активиране. Вероятно екзогенна инфекция, особено в болнична среда, което е по-характерно за други видове от Candida. Кандидоза проявява необичайно широк спектър от клинични патологии - ограничена от кожата и лигавиците (млечница, вулвовагинит) до система слузести лезии и хематогенен метастази тракт във вътрешните органи (пневмония, менингит, ендокардит, остеомиелит, артрити и така нататък.); от поражението изтощен новородени до тежко заболяване при имунокомпрометирани възрастни.

Candida не се отнася към истинското диморфен гъбички, както в тъканите могат да бъдат идентифицирани като дрождеви клетки и хифи. Преход в мицеларен форма може да се наблюдава чрез култивиране при по-ниска температура (22-25 ° С) или с изчерпване на хранителната среда. Дрожди фаза е представена от овални или кръгли blastospores клетки (4-8 микрона), и умножаване многополюсен пъпкуване. Мицелни фаза е представено чрез вериги от продълговати клетки, образуващи pseudomycelium. Тя случайно подредени мая blastospores. Някои видове, включително С. albicans. hlamidiospory образува терминал.

Инфекция често се среща ендогенно. Първоначално колонизация на Candida деца се случва по време на преминаването през родилния канал на майката или кърмене. Урогениталния кандидоза предавани по полов път. Разграничаване кандидоза на кожата, ноктите била и нокти, лигавицата (млечница), хронична генерализирана (грануломатозен), разпространена (висцерална) кандидоза.

Лабораторна диагностика на кандидоза е да се идентифицират микроскопски техники патогени, изолирането и идентифицирането на чист гъбична култура, разкриването на материала или неговите антигени ДНК серологично и алергични проби.

Микроскопско изследване включва проучване на оцветени и неоцветени препарати. Грам Candida оцветява в тъмно лилав цвят, понякога с розов централната част на клетката, Ziehl-Neelsen - в синьо до розово жълти включвания на липиди, Romanowsky-Giemsa - розово-жълт цвят с тъмно пурпурен включвания volutin и червена хроматинова вещество. Лекарствата са открити кръгли или овални начинаещи дрождеви клетки и pseudomycelia. Диференциацията на патогенни гъбички в материала също се извършва с IEF.

Микологична изследвания. Изолирането се извършва на чиста култура от плътен медии Sabouraud жълт агар-агар Candida, или други подобни. За да се подтисне растежа на бактерии, свързани с тези среди добавени пеницилин, стрептомицин или други антибиотици. Културите се инкубират при 30 ° С Колонии на Candida в рамките на 2-3 дни имат средни размери, белезникав цвят и матова повърхност, тъй като те стават растеж перлен нюанс и те имат височина куполовидна. Изолираният чиста култура за идентифициране pseudomycelium засети в течна среда -. Картофи, моркови, картофи бульон, и т.н. За да се идентифицира гъбички от рода тип Candida определят образуване на филаменти, присъствието на хламидоспори, изследване на ензимната активност (С. albicans фермент глюкоза и малтоза с производство на киселина и газ). Важна особеност на растеж гъбички С албиканс е възможността за образуване на тръба - тръба с форма на израстъци blastospores (RT тема).

Серология. Serodiagnosis проведе обикновено при висцерални форми на кандидоза. Използвайте RA, IHA, IFA. който се извършва със сдвоени серуми.

Алергия изследвания. При извършване на тест за алергия използва стандартна Candida алерген -. Цимент гъбични клетки (200 милиона на 1 мл), загрява се при 80 ° С в продължение на 2 часа алергените в обем от 0.1 мл инжектира интрадермално за деца увреждания разреждат 10 пъти. Резултати от реакция (зачервяване, пъпка) сметка за 24-48 часа. Ефективността могат да бъдат показателни за отделните имунни отговори към антигени, рода Candida гъбички.

За диагностициране на инфекция с С. албиканс, използвайки PCR.