Лабораторна диагностика на ХИВ инфекция, безплатни курсови работи, есета и дисертации

1. Определяне на вируса и неговите антигени или РНК копия на материали от пациента или заразени с ХИВ.

2. Серологично диагноза, базиран на засичането на специфични антитела на повърхността (др120 и др41) и вътрешна (р18 и р24) протеини на ХИВ.

3. Идентификация на патогномно (специфичен) за промени ХИВ инфекция в имунната система.

4. Лабораторна диагностика опортюнистични инфекции (СПИН-свързани заболявания).

1. Вирусологично диагноза. Материалът за изолиране на ХИВ -
Т-лимфоцити кръв, костен мозък, левкоцити, лимфни възли, мозъчната тъкан, слюнка, семенна течност, цереброспинална течност, кръвна плазма. Полученият материал Infect обезсмъртена Т-лимфоцити (Н9). Индикация на HIV в клетъчна култура се извършва чрез CPP (symplasts на образуване) и имунофлуоресцентни техники, електронна микроскопия, за ...
изразена активност на обратна транскриптаза. Съвременни методи изследвания позволяват да се открие заразените лимфоцитни клетки от 1,000.

Откриване на вирусни антигени в инфектираните Т-лимфоцити се извършва с помощта на моноклонални антитела.

През последните години, критично при определяне на тежестта и прогнозата на HIV се определя като броя на копията на HIV РНК в кръвната плазма чрез полимеразна верижна реакция (PCR) - т.нар вирусното натоварване. Ако пациентите не получават лечение, вирусен товар е под границата на откриване (това е по-малко от 5000 копия на HIV РНК в 1 мл плазма) указва отсъствието на прогресията или забавят развитието на болестта. Инфекциозността докато минимален. Висок вирусен товар (повече от 10 пет копия на РНК / мл) при пациенти с CD4-лимфоцитите в 300 мкл от 1 винаги показва развитието на заболяването.

2. Серологично диагноза. В момента най-широко разпространени.

Материал за изследване - серум.

В серологичната диагностика на ХИВ инфекция в първата фаза ELISA, използвайки стандартни диагностични системи immunoenzyme. скрининг метод. Принципът на метода се основава на класическата версия на пряк ELISA. Имуноабсорбентен за ХИВ антигени са полистиренови плаки. При извършване на тест блюда с ямки при разреждане на серум и се инкубира. След свързването към AG плата тройно промиват от несвързаните протеини. След това плочата за кладенци като конюгат - анти-човешки имуноглобулин, белязан с ензим. Образуването на специфичен комплекс AH + при идентифициране на въвеждане на ензимен субстрат (орто-фенилендиамин и разтвор на водороден пероксид). В резултат на ензима от субстрата варира пропорционално багрилни среда идентифицирани в антитела на пробите. Резултатите отчитат фотометър. Наличието на вирус-специфични антитела в серума в бъдеще трябва да бъде потвърдена чрез изследване на метода на имунната блотинг.

Имунната Петното - доказателство тест за откриване и разлика между антитела към различни HIV протеини. Тя се основава на разделянето на HIV протеините в молекулното тегло чрез полиакриламидна гел електрофореза. В следващите HIV антигените са прехвърлени на нитроцелулозна мембрана. Тогава нитроцелулозната мембрана се третира с тествани серум ХИВ антигени. При този вирус-специфични антитела образуват комплекс с конкретен AG (др120, gp41, р24, р18). Крайната фаза на изследването - откриване на антиген-антитяло комплекси с различни HIV протеини. Към това се добавя конюгат - анти-човешки протеини, ензим-белязани или етикет радиоизотоп. В този случай на местата на имунни комплекси, определен етикет. По този начин, в серума на пациента открити (или не се засича) вирус-специфични антитела срещу всички или няколко антигени на HIV.

3. Оценка на имунния статус. Проучването има за цел да се определи:

1) съотношението на CD4 / CD8 клетки (нормални = 2> в СПИН - 0.5 и <);

2) съдържанието на CD4 клетките (<200 клеток/мл.);

3) наличие на левкопения, тромбоцитопения, лимфопения;

4) увеличаване на концентрацията на Ig А, Ig G и CIC в кръвния серум;

5) намаляване на лимфоцитите пролиферативен отговор на Т-клетъчни митогени;

6) липса на DTH реакция на кожата няколко анамнестични антигени (състояние на анергия).