Лабораторна диагностика на дифтерия

Diphtheria - остро инфекциозно заболяване, причинено от дифтерия бацил (Corynebacterium diphtheriae) на, harakterizuyuscheesyamestnym фиброзни лезии на лигавицата и назални роторите (diphthera - филм), както и тежка интоксикация с поражението на сърдечно-съдовата система, нервната система и надбъбречните жлези. Лабораторна диагностика на дифтерия осъществява съгласно схема 14.

Шофиране 14.Mikrobiologicheskaya диагностика на дифтерия

Микроскопски метод в момента не е в действителност се използва поради ниското си съдържание на информация поради субективността на счетоводството и се извършва само по искане на лекуващия лекар. Микроскопия подлага намазки оцветяват чрез оцветяване по Грам, метиленово синьо, от Neisserial (за откриване на включвания volutin). Дифтерия бацил (Corynebacteriumdiphtheriae) оцветяване на Neisseria съдържа полярен намира тъмносин, почти черен, включване volutin и подредени като римски цифри V или X, докато подобно на тях дифте-роиди и lozhnodifteriynye бактерии (Corynebacteriumpseudodiphtheriae) зърна volutin не и се намира в един затвор. Проектиран като пряк метод flyuorohromirovaniya дифтерия пръти korifosfinom, оцветяване volutin включване в червено-кафяв цвят, и в цитоплазмата в зелено или жълт цвят, което подобрява метода микроскопия ефективност.

Бактериологични метод -В главен метод за диагностика на дифтерия. Материалът на тест се инокулира с един от специална хранителна среда за култивиране на дифтерия пръти, най-често в средата на Clauberg (Gly-IPA с Cerinu, дефибринирана кръв и натриев телурит, забавяне на растежа на едновременното непатогенния микрофлора). В средносрочен Clauberg Corynebacterium diphtheriae образува два вида колонии:

а) сиво-черен с радиални бразди повърхностно наподобяващи CEE ток стайни или розетка (биовар гравис);

б) черни, кръгли, изпъкнали колонии колонии поради телурит възстановяване (биовар mitis).

В типичен намазка от дифтерия Bacillus колонии показва наподобяват клавикули Грам-положителни пръти, разположени в V или римски цифри X, съдържащи зърно volutin (фиг. 16). Остатъкът от колониите субкултивирани върху кръвното IPA за изолиране на чиста култура.

Фиг. 16. дифтерия - Corynebacteriumdiphtheriae. Оцветяване на Neisseria. Местоположение в рамките на римски цифри X, или V, чрез включване volutin полюси. X900

Идентификация на изолирани култури се извършва като се вземат предвид най-напред всички ключови свойства (генотоксичност, наличие tsistinazy). Генотоксичност обикновено определя като се използва гел утаечна реакция (метод "чаша"). За тази петриева паничка с хранителна среда (IPA, 15-20% конски серум, 0.3% малтоза, 0.03% цистин) насложени лента от филтърна хартия, импрегнирана с анти-токсичен дифтерия серум (5000 AU / мл) чаша суши 30 минути в пещ, след това ивици изследваната култура перпендикулярна лента от хартия. Като контрол токсикогенни задънена кръг. Културите се инкубират в инкубатор при 37 0 ° С в продължение на 18-20 часа. В присъствието на генотоксичност на ставите с текущата Sina антитоксични антитела в културалната среда формира бяла утайка линии наподобяващи антени. За да се определи генотоксичност дифтерия бактерии също разработени ELISA и PCR.

Tsistinazu от изолираните култури (Pisa проба) се определя по метода на инжектиране сеялки култура проучване цистин бримки на IPA с оловен нитрат. Културите се поставят през нощта в инкубатор при 37 0 С в присъствие на среда, образувана tsistinazy почерняване (образуване PBS) по време на инжектирането, около която се появява кафяв облак.

Изолираният култура се идентифицират и да го разграничи от други непатогенния Corynebacteria биологични свойства (Таблица 16).. За да се определи линия уреаза култура при изследване се поставят в епруветка, съдържаща алкохолен разтвор на карбамид и фенол червено индикатор. Епруветката се инкубира в продължение на 30 минути в пещ при 37 0 ° С, с наличие на съдържание уреаза на тръбата е оцветена в червено.

При разпределяне nontoxigenic култура получаване аглутинация реакция с дифтериен серум за откриване на антиген видове Corynebacterium diphtheriae.

Серологично - RA, Phragmites за идентифициране на антитела в серуми на сдвоен пациенти с дифтериен.

Таблица 16.Biologicheskie свойства Corynebacteria