Гнилостните (протеолитични) бактерии

Те са важни патогени на влошаване на млечни продукти, причина разбивка на протеини (протеолиза), при което може да има различни малформации храна в зависимост от дълбочината на протеин разбивка. Антагонистите гниене са млечнокисели бактерии, така гнил разлагане продукт на процеса настъпва когато млечната не е процес.

Протеолиза (протеолитични свойства) проучване посяване микроорганизми в мляко, мляко агар, месо-пептон желатинови (NRM) и навити в кръвния серум.

коагулиран мляко протеин (казеин) под влияние на протеолитични ензими, може да се сгъне с отделяне на серум (пептонизация) или разтваря (протеолиза).

Млечни агар около колониите на протеолитични микроорганизми от широка зона на мляко просвета.

Културата NRM произвеждат инжекция в колоната на околната среда. Култури се отглеждат 5-7 дни при стайна температура. Микробите с протеолитични свойства втечняват желатин. Микроорганизмите не притежават протеолитична способността им да растат в НМН без разреждане.

Културите навита в кръвния серум протеолитични бактерии също причиняват втечняване и микроби не притежават това свойство, не променя своята консистенция.

В изследването на протеолитични свойства като способността на микроорганизмите да образуват индол, сероводород, амоняк, т. Е. разцепва протеините на крайния продукт газ.

Гниене бактерии са много широко разпространени. Те се намират в почвата, вода, въздух, червата на хора и животни, на хранителни продукти. Тези микроорганизми са спорообразуваща аеробни и анаеробни бацили, хромогенни и факултативни анаеробни бактерии bessporovye.

Спорообразуващи. Чрез гнил аероби и да сте. -Saint субтилис ви пръчка. mesentericus - Картофени пръчици, можете. мегатерий - зеле ви пръчка. mycoides - гъба ли пръчка. Cereus и др.

Чрез спората гниещи анаероби са бактерии от рода Clostridium (Cl. Putrificum, CI. Sporogenes, CI. Перфрингенс и други видове).

Спорообразуващи аеробни и анаеробни бактерии принадлежат към едно и също семейство Vasillaseae.

Всички спори гнилостните са доста големи дебели пръчки достигат размери 0.5-2.5 х 10 (у клостридиален - 20) микрона, боядисани Грам положителна, подвижни до спорообразуването, капсули не образуват. Изключение е Cl. перфрингенс - стационарни образуващи капсули коли. Клетките са подредени на случаен принцип, можете. Cereus и вас. mycoides верига

Повечето клетки са къси сено бацил. Ние бацили спори обикновено са разположени централно в клостридии -subterminalno. Последно често е под формата на ракета за тенис, лъжица или лодка. В Cl. sporogenes почти всички клетки съдържат спори (фиг. 29). Клетките Cl. Perfringens, като правило, не съдържат спори и често подредени в затвор, или римски цифри V.

Спорообразуващи аероби растат добре на общия хранителен медии. В МРВ те причиняват помътняване на среда, често - формирането филм и флокулът. Вие. Cereus не причинява помътняване и образува лека утайка с разклащане нараства тръба под формата на облак или еднократно вълна.

Фигура 29 # 8209; Spore гнил: Вас. субтилис: а - колония; В - клетки; Вие. mycoides: в - колонията; R - клетки; Cl. sporogenes: г - колонии; д - клетки

Вие. субтилис произвежда набръчкана повърхност белезникав филм.

На MPA аеробна бацил расте в големи колонии от сиво-бяло. Вие. mycoides Конусно образуват колонии, наподобяваща гъба, откъдето идва името пръчки (от гръцки - myces. гъби) (risunok29). Някои щамове на този микроорганизъм се изолира кафяво или розово-червен пигмент. Кафявата или кафяв пигмент може също така да се разпределят щамове Вас. mesentericus.

Вие. субтилис произвежда сухи сбръчкани белезникави колонии. Колонии на вас. Cereus под ниско микроскоп увеличение има lokonoobrazny ръб или тип медуза глава.

Спорообразуващи анаероби отглеждат в специална хранителна среда - говеждо-екстракт бульон чернодробно (MPPB), средно коте Tarotstsi, както и глюкоза кръв агар. Те причиняват замъглено бульон агар да образуват колонии със заоблен малка зона на хемолиза, т.е. избелване - .. Разтварянето на червени кръвни клетки.

Спора притежават добре определени протеолитични свойства втечнява желатин, коагулиран и peptonized мляко, защото хемолиза, секретират амоняк, сероводород и допълнително разпределя анаероби и индол. Възможност да ферментира много въглехидрати, с изключение на Cl. putrificum, който все още няма saccharolytic свойства.

Bessporovye. Включи хромогенни и факултативни анаеробни бактерии. Чрез пигментни гнил включват Pseudomonas fluorescens, Пс. Aeruginosa (семейство Pseudomonadaceae), Serratia marcescens (семейство Enterobacteriaceae) (съответно флуоресцира в синьо гной бацил и прекрасно). Група факултативни анаеробни бактерии включват Proteus вулгарис (Proteus коли) Ешерихия коли и рода Escherichia (Ешерихия коли) (семейство Enterobacteriaceae).

Bessporovye гнилостните са малки (2.1 х 0.6 m) Грам отрицателни подвижни бацил, който не образува спори и капсули. Клетките са подредени произволно. Повечето кратки coccobacillus клетки са прекрасни пръчки. Coli Proteus има полиморфни клетки (Фигура 30).

Bessporovye пръчки са едни и мезофилни. Бактериите от рода Pseudomonas често могат да бъдат психрофили. Микроорганизмите растат добре на общ хранителен медии. В МРВ доведе до прекомерно мътност на бульон, понякога появата на филма, хромогенен - ​​промяна на цвета на средата. На МРА ekrashennye образува цветен пигмент заоблени блестящи прозрачни колонии (Фигура 30).

Фигура 30 # 8209; Bessporovye гнилостните: Pseudomonas Aeruginosa: а - колония; В - клетки; Pseudomonas fluorescens: в - клетка

Coli излъчва флуоресцентно зелено-жълт пигмент, който е разтворим във вода и следователно ИПП е оцветен в цвета на пигмента.

Pseudomonas Aeruginosa също осигурява водоразтворим пигмент е синьо-зелен цвят, който се състои от две пигменти: синьо - и жълт pyocyanin - флуоресцеин.

Прекрасна коли колонизира, боядисани в ярко червено или череша червен цвят се дължи на неразтворими във вода пигмент продигиозин на.

Coli Proteus не образуват колонии върху твърда среда и расте под формата на леко vualeobraznogo плака ( "пълзящи растеж"). Escherichia образува сиви средни полупрозрачни колонии.

Bessporovye пръчки втечнява желатин, коагулиран и peptonized мляко, за да се образува амоняк, сероводород и понякога индол. Saccharolytic свойства са те слаб.

Coli Proteus има висока протеолитична активност. То се намира в 100% от пробите от продукти, засегнати от гниене. В тази връзка, като се има предвид общото название на Протей, посочвайки "вездесъщ", конкретно име вулгарис означава "нормален", "прост".

Escherichia Coli рода Escherichia има ниска способност протеолитично. Тъй като не се хидролизира цялата протеинова молекула към етапа на гниене е свързан пептони, разделянето им да образуват амини, амоняк, сероводород. Предизвиква коагулация на мляко, не втечнява желатин, тя има висока ензимна активност за лактоза, глюкоза и други захари.

За количествено определяне на протеолитични микроорганизми (с изключение на E.coli), използвайки мляко агар. Отделно получава 2% воден агар и обезмаслено мляко. Двете медии се стерилизират поотделно при 121 ° С в продължение на 10 минути. При употреба, агар стопения се прибавя 20% обезмаслено мляко и топла след цялостно смесване на сместа се излива в петриеви блюда.

За да се приготви воден агар в 1 дм 3 вода е питейна 20грама агар смила фино и се нагрява до кипене. След разтваряне на агар в гореща смес се филтрува през филтър от памук, излива се в колбата при 50-100 cm 3 затворени с тапи от памук и се стерилизира.

За да се определи количеството на протеолитични бактерии се извършва чрез посяване 1 cm 3 всеки от избрания продукт разреждане в петриеви блюда и се изсипва мляко агар. Културите се инкубират при 30 ° С в продължение на 48 часа и след това преброяване на броя на колониите от протеолитични бактерии (с широки зони мляко избелване).

Способността да се разцепи протеини са също форми и актиномицети. Много протеолитични микроорганизми образуват липаза ензим, който предизвиква разграждането на мазнините. Най-изразен липолитичен способността да имат форма, флуоресцентни пръчки и други бактерии от рода Pseudomonas.

Те са причинители на ферментация маслена киселина, което доведе до млечна захар и соли на млечната киселина (лактат) се разцепват до получаване маслена, оцетна, пропионова, мравчена киселина, етил, бутил, пропил алкохоли. Те са способни да разграждат протеини и асимилира азот от протеини, аминокиселини, амоняк и някои представители - молекулярна азот от въздуха.

Маслена киселина бактерии принадлежат към Clostridium вида, обединяваща 25 видове почви анаероби (Cl.pasteurianum, Cl.butyricum, Cl.tyrobutyricum и др.), Които бяха предварително колективно наречени Cl. amylobacter.

Маслена киселина бактерии са Грам-положителни пръчки от цилиндрична форма с размер на 5-12 х 0.5-1.5 микрона подвижен до спорообразуването. Капсулите не формират спори и се намират неизлечимо който се намира към края. Клетките имат формата на клубове, тенис ракети или лъжица (Фигура 31). Спорите кипи в продължение на 2-3 минути, не умират по време на пастьоризация. Преди образуването на спори в цитоплазмата на клетките се натрупва гранулоза - krahmalopodobnoe йод вещество се оцветяват в синьо.

Фигура 31 # 8209; маслена киселина бактерии

Маслена киселина бактерии са облигатни анаеробни бактерии. Характеристиките на тези микроорганизми са ефервесценция и неприятна миризма на маслена киселина. Оптималната температура от 30-35 ° С, температурни граници растеж на 8-45 ° С

В университет лаборатория култура на маслена киселина бактерии са в среда картоф. В малък дълго колба врата или тръба като няколко високо сурови картофени филии, се налива вода 3/4 обем, прибавя се 2,1 грама от креда и пастьоризира при 80 ° С за 10 минути, след това се инкубират при 37 ° С След 1-2 дни се развива маслена киселина ферментация.

В сирене количествена сметка на маслена киселина бактерии спори (анаеробни бактерии мезофилни laktatsbrazhivayuschih) се провежда върху плътна-ацетат лактат селективна среда (Ch. 18).

Количествени предвид маслена киселина бактерии произвеждат чрез ограничено разреждане, покритие тестов материал в епруветки със стерилна пълномаслено или обезмаслено мляко и парафин (2.1 д). След засяването епруветка се загрява на водна баня за 10 минути при 90 ° С, охлажда се до 30 ° С и се инкубират в продължение на 3 дни. при температура от 30 ° С

Наличието на маслена киселина бактерии се определя чрез образуването на газ, мирис на маслена киселина, в присъствието на микроскопски препарат спора на големи пръти, като положителна реакция в гранулозните. Гранулозис - krahmalopodobnoe вещество е цитоплазмен включване и оцветени с йод (разтвор на Lugol) в син цвят.

Clostridium има добре дефинирана и saccharolytic протеолитична активност. Ферментирало мляко, захар, абсорбират соли на млечната киселина (лактат) се получава масло, оцетна киселина, пропионова киселина, мравчена киселина, малко количество етанол и голямо количество СО2 и Н2 газове. В резултат на това, образуването на изобилие газ, те могат да причинят малформации късно подуване сирена.

Освен анаеробна Clostridium маслена киселина ферментация може да предизвика бактерии от рода Pseudomonas, особено флуоресцентни пръчки.

Enterococci наречен млечна стрептококи чревен произход, т.е.. Е. Те са представители на нормалната микрофлора на червата на човека и животните и освободени в околната среда в доста значителни количества (в 1 г изпражнения до 10 -10 9 жизнеспособни индивиди), но те са приблизително 10 пъти по-малко бактерии в колиформи (CGB). В момента, ентерококи се считат за втори само на CGB санитарно-показателни микроорганизми в язовирите на изследването, особено проби от кладенци за вода, басейни, отпадни води, почвата, битови предмети.

За ентерококи включва два основни вида коки семейство Streptococcaceae, род Enterococcus: вх. фекалии (биоварианти Ent. liquefacieus и вх. zymogenes) и Ent. fecium (биовар Ent. говежди).

В този вид направи друга, по-рано, принадлежащи към род Streptococcus: E.durans, E.avium, E.gallinarum, E.casseliflavus, E.malodoratus, E.cecorum, E.dispar, E.hirae, E.mundtii, E .pseudoavium, E.raffinosus, E.saccharolyticus, E.seriolicida и E.solitarius. Така, рода Enterococcus съдържа 16 вида микроорганизми.

Биовар E.liquefaciens често жител на рак на гърдата, така че той се нарича mammokokkom (от латински Mamma Glandula -. Мляко желязо).

Enterococci са diplococci овална или кръгла размер 0,6-2 х 0.6-2.5 микрона, понякога уреждане вериги, Грам-положителни, спори и капсулите не представляват неподвижни. Факултативни анаероби и умножават по обикновени хранителни среди, но трябва да се използват в хранителни среди с инхибитори на потискане придружаващи флора (колиформени бактерии, Proteus и др.). Най-добрият ръст се наблюдава с добавянето на глюкоза в средата, маи продукти и други стимулатори на растежа. Когато култивиране се образува утайка и дифузно помътняване се наблюдава в течни хранителни среди. Твърди носители ентерококи колонии са малки, сиво-син, прозрачни, кръг с гладки ръбове, изпъкнал, с лъскава повърхност. На кръвен агар, в зависимост от БИОВАРИАНТ те могат да дадат хемолиза (Ent. Liquefaciens), промяна на цвета около колониите на зеленикаво-кафяво, като хемоглобинът се превръща метемоглобин (Ent. Фекалии). Оптималната температура на растеж е 37 ° С, - граници 10-45 ° С

За да се определи ентерококи използва средно мляко с полимиксин от Калина. 100 cm 3 от 1,5% хранителен агар (ИПП) се добавя глюкоза - 1 гр, дрожди диализата (екстракт автолизат) - 2 cm 3. стерилизира при -112 ° С за 20 минути; рН 6.0. Преди напълване в блюдото на Петри се добавят 100 cm 3 от среда: Crystal Violet - 1,25 cm 3, 0.01% воден разтвор; твърди 2,3,5-трифенилтетразолен хлорид (ТТС) до 10 мг; стерилна обезмаслено мляко - 10 cm 3; полимиксин -200 единици / мл.

Типични ентерококи колонии върху тази среда имат закръглена форма, гладък ръб, лъскава повърхност, с диаметър 1,5-2 mm, червеникав цвят с протеолиза област на лека син фон.

Enterococci се hemoorganotrofami, тяхната ферментация тип метаболизъм, се разгражда до глюкоза и манитол, и киселина газ, но не са каталаза активност (в сравнение с други Грам-положителни коки). Антигенни структура са едни и същи и принадлежат към групата D класификация Lensfild.

Характеристиките на ентерококи от мезофилен млечна стрептококи Sherman от тестове са показани в Таблица 18.

Таблица 18 # 8209; Диференциране на ентерококи от стрептококи