Диагностика на субклиничен мастит - прилагане на ефективни методи за диагностика, лечение, и

Диагностика на субклиничен мастит

Латентен мастит се диагностицира чрез изследване на мляко бързо диагностичен тест, последван от потвърждаване на диагнозата и бактериологичното разбивка уреждане.

Лактиращи крави в стопанството на скрининг за латентна мастит веднъж месечно. Разглеждане количества мляко след доене.

Лабораторни методи се основават на директни и индиректни методи за преброяване на соматични клетки.

Чрез директен метод включва броя на стъкло-Preskottu Брийдън, който е контрол и за автоматично отчитане на соматични клетки в млякото.

Когато това чист предметно стъкло се поставя върху хартия облицовани с лист в квадратчета 1 cm страна. Пробата на мляко се смесват добре с помощта на микропипета и депозиран на 3-4 квадратни слайд на 0.01 cm 3. изготвянето капка мляко е равномерно разпределена върху площта на квадрат стъклена пръчка или дисекция игла. Намазка се суши на въздух, фиксирани и едновременно прилагане на първата обезмаслени метанол в продължение на 10-15 минути и след това смес алкохол-етер, за да изсъхне. Оцветеното мазилно мастило работен разтвор Romanowsky-Giemsa (3-4 мл търговски разтвор на 100 мл дестилирана вода) от underplating или вертикална позиция прозорец за 20-30 минути. След оцветяване на намазка се промива с вода и се суши при стайна температура. Изброяване на соматични клетки са под микроскоп с обектив потапяне. Всеки сърфиране намазка 100 полета. В брои броя на клетките умножени по коефициент, като се вземат предвид стойностите на обектива и окуляра и определяне на техния размер в 1 cm 3 от мляко. За отстраняване коефициент използване областта определения диаметър обектно-м оглед на микроскопа на, и изчисляване на площта на един зрително поле съгласно формула 2. Яр изчислява колко областта изглед на микроскопа на са разположени на площ от 1 cm 2. Този резултат се превръща в обем.

Пример: Определяне на скоростта на превръщане на 7 и окуляр леща 90. зрително поле 17, разположени отделения противопоставят метър. Размерът на един участък - 0.01 mm. Диаметърът на зрителното поле - 17 х 0.01 mm = 0.17 мм, радиусът - 0,085 мм. площ на едно поле на - 3.14 0.085 х 2 = 0.023 mm 2 или 0.00023 cm 2 площ на зрително поле ще бъде равен на 0.00023 cm 2 = 0.023 х 100 cm 2. На площ от 1 cm 2, тези сайтове са: 1: 0.023 = 43.48. Взети обем мляко 0.01 cm 3 до 100 пъти по-малък от съотношение 1см 3 в този случай ще бъде равен на 4348 (43,48x100).

За крайния резултат е средна от две повторения.

На директни методи за преброяване на соматични клетки включват методи камера за NM Khilkevich, II Archangelsky и др. VI модификация Slobodjanik, брои с помощта на електронно устройство "Fossomatik". Електронни броячи на частици: tselloskop ", Колтър гишетата" pikoskel, кондуктометрично хемоцитометрична марка GTSMK-3 и др.

Индиректни соматични клетки определят с помощта на диагностични реагенти belomastina, mastidina, dimastina, mastoprima, Уайтсайд проба, съдържаща повърхностно активни съединения (повърхностно активни вещества). Повърхностно разрушаване на клетъчните мембрани, ДНК освободени от ядрата и влизат в реакция за образуване на желе. Според степента на образование желеобразна съсирек косвено съди за броя на соматичните клетки в млякото. Млякото за взаимодействие с диагностичен реагент извършва контрол на млечната плочи или PLA-1 PLA-2 с четири Lune съответно фракции от вимето на кравата. Определяне на соматични клетки при използване на диагностични реагенти проведени в мляко от отделните вимето листа или млечни крави.

След всяко изследване трябва да се измиват с млечно-контрол плоча.

Тест с belomastinom. Реакцията се основава на способността на повърхностно активно вещество да образува гел с мляко, съдържащо соматични клетки. В млякото на изследването (отделяне) на вимето на кравата, diagnosticum разрежда с дестилирана или вряла вода в съотношение 1: 3 (100 мл belomastina прибавят 300 мл вода). Време на използване на работния разтвор на 8 месеца.

За провеждане на тестове с Lune belomastinom млечна контрол плоча (МСР-1) от съответните вимето листа доят до 1 мл мляко и 1 мл diagnosticum на работен разтвор чрез пипета. Сместа се разбърква с реагент на мляко стъклена пръчка в 9-10 секунди. Резултатите от реакцията:

Отрицателна реакция (-) - течна смес остава хомогенна;

съмнително реакция (-, +) - лигавицата резба, оформен в сместа;

положителна реакция (+) - смес става последователността на мазен маса или желатинов съсирек.

За наблюдение на резултатите от лечението на пациенти с мастит мляко на тестваните животни в продължение на 10-14 дни след прилагане на лекарството.

При събиране на мляко с отрицателна реакция, съдържаща 1 мл до 500 хиляди соматични клетки, съмнителни - от 500 000 до 1 Mill.;. с положителен - над 1 милион.

Пробата, съдържаща 2% разтвор mastidina. За да се получи 2% разтвор mastidina 100 мл 10% разтвор, произведен дома промишленост, се добавят 400 мл дестилирана или преварена вода. В Lune млечна контрол плоча (PLA-1 PLA-2) от съответните вимето листа nadaivayut до 1 мл мляко и 1 мл 2% разтвор, получен mastidina използва пипета или разпределителна машина течност. Сместа се разбърква с реагент на мляко пръчка във всяка Lune PMC-1 последователно в продължение на 10-15 секунди. При използване на PMK-2 с реагента смесване на млякото се извършва едновременно във всички Lune, чрез завъртане на въртящата се плоча в хоризонталната равнина. Имайте предвид реакцията на плътността на желе:

отрицателна реакция (-) - хомогенна течност;

съмнително реакция (-, +) - следи образуването желе;

положителна реакция (+) - ясно видими съсирек, който може да бъде изхвърлен от Lune пръчка с разбъркване.

На PMC плоча 2 за отрицателни реакции:

(-) - хомогенна смес;

(-, +) - когато съмнително реакция по време на въртене на плочата на дъното Lune забележими тънки влакна (нишки) без тенденция за образуване на тромб;

(+) - положителна реакция различен вид или слаб бързо образуване на гъста съсирек концентрира при въртене плоча в центъра на полумесец.

Определяне на рН на цвят мляко с 2% разтвор mastidina:

бледо лилаво, опушен - нормално мляко рН (рН = 6.5-6.8);

почти бяло - високо мляко киселинност (рН по-малко от 6.5);

тъмно виолетово - мляко повишена алкалност (рН по-голямо от 8).

Пробата с 5% натриев mastidina. разтвор mastidina се получава като се използва дестилирана или варено топла вода.

Формулиране на проби и поддържане zheleobrazovaniya Реакцията се провежда както в изследването с 2% разтвор на мляко mastidina.

Определяне на рН на цвета на мляко:

оранжево, оранжево-червен (червено-оранжев) - нормална реакция мляко (рН = 6.5-6.8);

жълт - повишена мляко киселинност (рН по-малко от 6.5);

червено - висока алкалност на мляко (рН по-голямо от 6.8);

червено и червено - изразена алкалност на мляко (рН по-голямо от 7.0).

Пробата с 1% разтвор mastoprima. Получаване Mastoprim представлява жълтеникав прах, състоящ се от смес sulfanol (4 части) с натриев хидроксид (1 част). разтвор mastoprima се получава в дестилирана вода.

Анализ с dimastinom (. Mutovin на VI) Dimastin включва реагент 2: akrilsulfonat повърхностно активно вещество и бромкрезол пурпур индикатор.

Анализ с rozolovoy киселина. Млечният и контролира плоча вземане 10 мл мляко и се добавя 1 мл 0.1% разтвор rozolovoy киселина в 65% алкохол. Обикновено съдържанието става светло розово на цвят. В патологията на съдържанието на оцветяване има цвят от светло до тъмно червено.

Тест с мастит диагностик. Съставът диагностик мастит включва: 100 мл вода, sulfanol-30-trinolinfosfat 5g, бромтимолово синьо - 0,02 д, 1% rozolovoy киселина 0,5 мл разтвор.

В контролните ямки млечна плоча вземане на 1 мл мляко и 1 мл реактив и се разбърква. Хомогенна смес - мляко от здрави крави; присъствието на плътен гел като съсирек, вискозна маса или рядко слуз - положителна реакция на латентна мастит.

Бромотимолово проба на Ераст. Реагент: 0,1 грама bromtimolblau + 100 0 96 мл алкохол. Вземете 5 мл мляко и 1 мл реактив в епруветка се разклаща. При нормална жълтеникав цвят, жълто, жълто-зелено, жълто-зелено. Патология - светло зелено, зелено, светло зелено, синьо-зелено и синьо

Бромотимолово проба от Logvinova. Реагент: 0,1 г индикатор бромтимол 20 + 0 96 мл алкохол + 80 мл дестилирана вода. Взема се 1 мл мляко и 1 мл проба бромтимолово в Lune устройство за определяне на качеството на млякото. Ако син цвят на сместа на реакцията е положителен. Ако жълтеникаво или без модификация, реакцията е отрицателен.

Тест с бензидин. Той се използва за откриване на кръв в пигменти мляко. Тръбата се излива 5 мл 3% разтвор на водороден пероксид и 2 мл наситен разтвор на бензидин в ледена оцетна киселина. След внимателно разклащане сместа се прибавя 2-10 капки мляко. Положителна реакция - смес първо се боядисани в зелено, и минути в тъмно синьо; отрицателно - смес от светлина с белезникав едрозърнеста утайка.