А метод за диагностика на отравяне с тежки метали

ARDAVICHENE Татяна

A61B10 - Други методи и средства за диагностициране на такива инструменти за вземане на клетъчни проби, биопсия за диагностика чрез имунизация (ваксинация за профилактика или терапия A61B 17/20); определяне пола на детето в ембрионалния период; определяне на овулация (Таблица G06C 3/00 менструалния цикъл); устройства за изследване на ларинкса

Републики (61) В допълнение към авторите. svid-брой (22) Съобщените 030278 (21) 2576496 / 28-13 (51) М. Cl.

Приложение, което е 61 M 10/00 присъединяване

Ardavichene Т. A. (71) Заявителят

Иркутск държавен медицински институт (54) метод за диагностициране ОТРАВЯНЕ

Изобретението се отнася до лекарство. а именно Относителните диагностични методи. систематичен начин на тялото.

Известен в методи медицинска практика за диагностика на отравяния с тежки метали като талий, олово и др чрез определяне на концентрацията на хемоглобин кръв, на броя на еритроцитите, ретикулоцити, еритроцити базофилна-пробита, и в урината â € "концентрация порфирия, нови и г -aminolevulinic киселина.

Известен е метод за диагностициране на отравяния с тежки метали чрез идентифициране на нуклеинови киселини в еритро 15 tsitah. Същността на този метод се състои в това 0,1-0,2 мл кръв се прехвърлят в охладена центрофуга. епруветки, съдържащи натриев цитрат охлажда, разбърква се и се центрофугират 20

6 минути при 15 000 об / мин. Еритроцитите се промиват два пъти с натриев ацетат и към него се прибавя 30-кратно количество диетилов етер. След разбъркване и отдекантиране етер до 25 остатъци

Ку смес се прибавя диетилов етер, етанол и ацетон в съотношение

30: 1: 1, които след смесване, се отстранява от водната помпа въздушна струя. Лекуващи 30 кал органични разтворители екстрахират примерни нуклеотиди LH-лечение на физиологичен разтвор на трихлороцетна киселина.

Екстрактът се отделя чрез центрофугиране, промива се три пъти с ледено студен етер и С9 се прилага към изходните ленти от хартия до около 0.1 мл.

След изсушаване, лентите от хартия с покритие с тези проби, извършени. DYT ohlazhdeyiya условия електрофореза при напрежение 850-950 V в 2.5 силата на тока, потенциал капка

30 V / cm и рН 3.9 в продължение на 2 часа. Елуирането се извършва 0 0.5 мл 1N. разтвор на солна киселина при 260 нм Spektrofotometriruyut $ 1й.

Въпреки това, с помощта на известни методи за диагностика на отравяне с тежки метали, не е възможно да се определят началните или ранните признаци на интоксикация. По известни методи за диагностика разкрива присъствието на интоксикация, когато кръвната система, разработена значими нарушения водят до стимулиране на еритроидни костния мозък. В периферната кръв има голямо количество регенеративен; kletokretikulotsitov, намерено дегенеративни форми на червените кръвни клетки â € "bazofil745506 nopunktirovannye еритроцити. Нарушена синтез хем, както е видно от повишена концентрация на L -aminolevulinic киселина и п, р външен вид в урината.

Целта на изобретението е да се осигури ранна диагностика на отравяне с тежки метали.

Целта се постига

Аз определено, че dazoksiribonukleinov б) киселина и съдържанието му в ПГ 20,689,7 млн. Еритроцитите диагностицира отравяне.

Методът е както следва .obrazom.

При определяне на ранни признаци на интоксикация posleduemoy кръв 15 от неговото пречистване и центрофугиране отстранява ядрени клетки и плазмата и червените кръвни клетки от останалата vschelyayut дезоксирибонуклеинова киселина (ДНК) и количеството U Су DYT на отравяния с тежки метали, като в кръвта на здрави еритроцити човешки дезоксирибонуклеинова киселина отсъства. Тази киселина се появява в синтеза на еритроцитите, ако е необходимо всяко вещество, способно да увеличи тялото sporotivlyaemost токсично действие метали. Така че, когато съдържанието dezoksiri. bonukleinovoy киселина 20,6-89,7 нг на милион. еритроцитите диагностициране отравяне.

Пример. За да се определи най-ранните признаци на отравяне с тежки метали от еритроцити на субект vschelyayut дезоксирибонуклеинова киселина (ДНК) с двойна дължина на вълната спектрофотометрия.

Процесът на количествено определяне на дезоксирибонуклеинова киселина (ДНК) в еритроцитите е разделена на три основни етапа.

Определяне на общия брой на еритроцитите маса нуклеинова киселина (C NN), т.е. концентрация

След това, filtroval- солна хартията втори диск се прибавя 2 мл смес

40 1.2 п. разтвор на перхлорна киселина

0,05 М магнезиев хлорид и чрез

20-30 мин филтрува. по този начин се подчертава само веднъж рибонуклеинова киселина (RNC).

45 се измерва на кювета плътност филтрат чески спектрофотометър Ор, тези на 1 см при дължина на вълната 270 нм и

290 нм и изчисляване на концентрацията извършва рибонуклеинова киселина (C "" ") с формула

С р-р QY-C, където C ®vЂ "

Определя се концентрацията на еритроцитна маса рибонуклеинова Kis (Srsch,).

От разликата между сумата от концентрацията на нуклеинова киселина (C NC) и концентрацията на рибонуклеинова киселина (РНК) (Тя-SPW = Sdn) се оценява от концентрацията на дезоксирибонуклеинова киселина (ЛОС ") в еритроцитите.

Кръв, взета от вената в охладени пластмасови флакони, съдържащи

3,8-разтвор е натриев цитрат.

Центрофугирайте при 1500 об / мин, плазма, левкоцити и тромбоцити се отстранява и се промива още веднъж с 3.8% натриев цитрат.

След това, в размер на промити еритроцити в melazherah брои в милиони на микрометър. След 0.09-0.11 мл еритроцитна маса се прилага към двата диска на филтърна хартия и се фиксира в 10-15 мл 0.2N. разтвор на перхлорна киселина с 0,05 М магнезиев хлорид, в тези "chenie 10-15 минути при 4-5 ° С сместа се декантира и процесът се повтаря.

След това, двете проби излива в ацетон в количество от 10-15 мл, нагрява се до кипене, ацетонът се декантира и процеса отново се повтаря. След като се слива ацетон, се прибавя към еритроцити 10-15 мл смес от етанол и диетилов етер в съотношение 3: 1, се загрява до кипене, сместа се декантира. Процесът се повтаря.

Всеки диск от филтърна хартия, съдържащ червен клетъчната проба се прибавя към 4 мл 0.3N. разтвор на калиев хидроксид и хидролизата се извършва 50-70; минути при. 36-37 ° С

Освен това един от priliva- дискове. 2 мл от 0.5 М перхлорна киселина разтвор се хидролизира 18-22 минути в кипяща водна баня и по този начин изолиран общо количество на двете нуклеинови киселини (C "к), т.е. рибонуклеинова (SPH ") и дезоксирибонуклеинова (до Сп) на киселина хидролизата се охлажда и се филтрува.

Се измерва със спектрофотометър абсорбцията на филтрата, получен в 1 cm кювета при дължина на вълната

270 нм и 290 нм. Извършва изчисляване на концентрацията на нуклеиновите киселини (Sn), т.е. Cp "Srrg +", известната формула

NRC = Hr / Ш х, както концентрацията на нуклеинови киселини; концентрация на рибонуклеинови киселини; концентрация на дезоксирибонуклеинова киселина; броя на еритроцитите; разлика оптичната плътност при дължина на вълната

270 нм и 290 нм.

Поръчка 4047/2 Разпространението чрез Абонамент 673

TSNIIP .Gosudarstvennogb комитет на СССР за изобретения и открития

113035, София, F-35, Raushskaya МаВ. г. 4/5

SPT клон "патент", Ужгород, ul.Proektnaya 4

По този начин, разглеждане на кръвта на лицето, което има контакт с талий. разкриват, че броя на червените кръвни клетки

Control, Е р> * 0.32 пМ.

0.295 EUO 0.32 пМ DE нм. € "0295. нм = 0,025 нм

Ea9o 0265 нанометра бъде = 0,37 нанометра € "= 0,265 нанометра, 0,105 нанометра

Е = 0105 нм - 0.025 .nm = 0.08 пМ. СН = 32640,08. / 6 = 46.6 нг / млн

9NK C C C 46 ОА = д б нг / милион ° -.

-14.5 нг / Mn = 32, 1 мг / млн

Следователно, от човешки червени кръвни клетки освобождават 31.2. нг / млн. еритроцити, дезоксирибонуклеинова киселина, който показва началото на талий интоксикация изисква. подходящи мерки за предотвратяване на 20 за да се предотврати развитието на интоксикация.

По този начин, методът за диагностика на отравяне. тежки метали чрез идентифициране на нуклеинови киселини в червените кръвни клетки, дава възможност за откриване на ранен pryznaki метал интоксикация чрез определяне количествено. Nogo съдържание метали, както и определяне на количеството на дезоксирибонуклеинова киселина в еритроцитите.

Метод за диагностициране на отравяния с тежки метали чрез идентифициране на нуклеинови киселини в червените кръвни клетки. характеризиращ се с това, че за целите на ранна диагностика, който се определя. redelyayut дезоксирибонуклеинова киселина и съдържанието му 20, 6-89,7 нг на милион. еритроцитите диагностициране отравяне. Източници yanFormatsii взети под внимание при разглеждането

P 316 991, т. 6 O1 к 33/16, 1974.