Стерилизация на лабораторно оборудване

Стерилизация (от латинската sterilis - безплодни) - стерилизация на освобождението от всички живи същества. На практика микробиологична стерилизация подложен инструменти, съдове, хранителни среди и други материали, използвани в работата.

Стерилитет може да се постигне чрез физични и химични методи.

Стерилизация, за разлика от дезинфекция, осигурява унищожаването на стерилизация обект на всички вегетативен и спори, патогенни и не-патогенни микроорганизми. Стерилизацията се осъществява по различни начини: .. пара, сух горещ въздух, кипене, филтриране и т.н. Изборът на метод зависи от стерилизация на качеството и реторта свойства микрофлора обект.

Подготовка и стерилизация на лабораторно оборудване

Преди стерилизация, съдове се промива и суши. Епруветки, флакони, бутилки, матраци и флакони, затворени с тапи памучно марля. На върха на претоварването на всеки съд (с изключение на тръби) да капачки хартия.

Каучук, корк и стъклени запушалки се стерилизират в отделен пакет, свързан с гърлото на изделия. Стерилна петриева паничка увити в хартия за 1-10 парчета. Пастьор пипети по 3-15 бр. увити в хартия. В горната част на всяка пипета поставя парче памук, предотвратяване на материала от навлизане на околната среда. Когато опаковане пипети трябва да бъдат много внимателни, да не се скъса запечатания края на капилярната тръбичка. По време на работа на пипетата от опаковката е отстранен от горния край.

В горната част на пипетата степен като в Pasteur пипета добавя безопасност вълна и след това увити в тежка хартия, предварително нарязани ленти с ширина от 2-2,5 cm и дължина 50-70 см. Лентата се поставя на масата, левия си край се прегъва и увити те на върха на пипетата, след това завъртете пипетата, то navertyvayut хартиена лента. С цел предотвратяване на хартия разгърна, в противоположния край на неговото въртене или паста. На хартия увити обем впише пипета. В присъствието на контейнерите завършва пипети се стерилизират в тях.

Лабораторни съдове стерилизира:

а) суха топлина при температура 180 ° С и 160 ° С, съответно за 1 час и 150 минути.

б) в автоклав при налягане 1,5 атм. в продължение на 60 минути, за да унищожи спори микрофлора - 90 минути при 2 атмосфери.

Стерилизация на спринцовки. Спринцовките се стерилизират в разглобен вид отделен цилиндър и бутало в 2% разтвор на натриев хидроген карбонат в продължение на 30 минути. Когато се работи с Sporiferous mikro¬floroy продукция стерилизация в автоклав при 132 ± 2 ° С (2 атм.) За 20 минути при 126 ± 2 ° С (1.5 атм.) - 30 минути. Стерилна спринцовка се събира, след като се охлади, се вмъква в буталото на цилиндъра, вкара иглата pred¬varitelno отстраняване от него на дорника. Игла цилиндър и бутало вземе форцепс, който се стерилизират заедно със спринцовката.

Стерилизация на метални инструменти. Метални инструменти (ножици, скалпели, форцепс и така нататък.) Стерилизирани в 2% разтвор на натриев хидрогенкарбонат, което предотвратява появата на ръжда и загуба на зрението. Скалпели и задна острие преди потапяне в разтвор препоръчва обвивка вълна.

Стерилизация бактериална линия. Бактериална линия от платина или нихром тел, стерилизирана в пламък алкохол или газова горелка. Този метод на стерилизация се нарича калциниране или пламенен.

Loop в хоризонтално положение се прави по-ниско в най-студено, част от пламъка на горелката, за да избегнете разплискване настъпили изгаря патогенен материал. След това изгаряния, цикълът се прехвърля във вертикално положение, по-ниската свети нажежено, а след това в горната част на проводника и да изгори гъсеница. Калциране обикновено отнема 5-7 секунди.

Получаване за стерилизация и стерилизация хартия, марля и вълна. Памук, марля, филтърна хартия, се стерилизира в топлината пещ при 160 ° С в продължение на един час от времето показания на термометри дадени температура или в автоклав при налягане 1 атм. в продължение на 30 минути.

Преди стерилизация хартия и се нарязва на парчета с марля, памук и валцувани под формата на топчета или тампони желаната стойност. След това, всеки вид материал, индивидуално за един или няколко парчета увити в тежка хартия. Когато се измъкна от стерилизирани пакет материалът трябва да бъде стерилизиран като му стерилност е счупен.

Стерилизация на ръкавици и други изделия от каучук. Гумени продукти (.. ръкавици, тръби и т.н.), замърсени с вегетативни форми на бактерии се стерилизират чрез кипене в 2% натриев хидрогенкарбонат или течащи пара в продължение на 30 минути; при замърсяване sporeforming микрофлора в автоклав при налягане от 1,5-2 атм. в продължение на 30 или 20 минути. каучук Ръкавиците преди стерилизация вътре и извън излее талк, за да ги предпази от залепване. Павета между ръкавици марля. Всеки чифт ръкавици е опакован отделно в марля и се поставя по такъв уличница.

Стерилизация патогенни микробни култури. Тръби и плочи, съдържащи бактериални култури не са необходими за по-нататъшна работа, поставени в метален контейнер, запечатване на капака и преминават стерилизация. Култури патогенни микроби растителни форми са убити в автоклав в продължение на 30 минути при davle¬nii 1 атм. Отдаване под наем на цистерни за стерилизация в автоклав се извършва от специален човек срещу подпис. режим на стерилизация се вписва в специален регистър. При унищожаване на микробиални култури I и II патогенност групи, както и материали, заразени или подозрителни за патогени инфекция, обхванати от тези групи резервоари с отпадъчен материал се прехвърля в метална тава с високи страни в присъствието на придружител разрешено да работи с инфекциозен материал.

Стерилизация чрез кипене произведени в стерилизатора. В дестилирана вода се излива в стерилизатора, тъй като тръбата образува пяна. (Стъклени предмети се потапят в студен, метални предмети, в гореща вода с добавяне на натриев хидрогенкарбонат). Стерилизирани елементи се вари на слаб огън за 30-60 минути. Началото на стерилизация е моментът на вряща вода в стерилизатора. В края на кипене инструменти вземе стерилен форцепс, които се варят заедно с други обекти.

Стерилизация чрез суха топлина.

Стерилизация със суха топлина се извършва в пещ Пастьор. Полученият материал се стерилизира са поставени на рафт, така че да не е в контакт със стените. Гардероб затворен, и след това да включва нагряване. Стерилизация при 150 ° С в продължение на 2 часа при 165 ° С - 1 час при 180 ° С - 40 минути при 200 ° С - 10-15 минути (при 170 ° С хартия и вълна пожълтяване и при по-висока температура Чар). Стерилизация се смята за началото на времето, когато tem¬peratura във фурната достигне желаната височина. При прекратяване на стерилизация период пещ е изключен, но не и на вратата на кабинета се отвори, за да се охлади, тъй като студеният въздух тече вътре в корпуса, може да причини образуването tre¬schin в горещ тиган.

Парна стерилизация под налягане.

Стерилизация производство на пара под налягане в автоклав. Автоклавът се състои от две котли, вкарани една в друга, на корпуса и капака. Външният пот нарича vnutren¬ny vodoparovoy камера - стерилизационна камера. В vodoparovom настъпва образуване на парен котел. Във вътрешния пота поставя стерилизация материал. В горната част на котела на стерилизация има малки дупки, през които пара от proho¬dit vodoparovoy камера. Капакът на автоклава херметически завинтва към корпуса. В допълнение към тези основни части, автоклава има няколко части, които регулират неговото функциониране: манометър, водно стъкло, предпазен клапан, отработен въздух, и кондензационни кранове. Манометърът се използва за определяне на налягане, създадено в камерата за стерилизация. Нормално атмосферно налягане (760 mm Hg. V.) се приема като нула, така че автоклавът се спира и манометъра на нула. има определена връзка (раздел. 1) между манометъра и температурата.

съотношение манометрично налягане и температурата на кипене на водата

Червената линия на скалата на манометъра показва максималното работно налягане, което е позволено в автоклав. Предпазният клапан използва за защита от свръхналягане. Той е разположен в предварително определено налягане, т.е. налягането, при което трябва да бъдат стерилизирани, със стрелките отиват за линията на габарит на автоклав клапан се отваря автоматично и освобождава излишната пара, като по този начин забавя по-нататъшното увеличаване на налягането.

Страничната стена разполага с водно стъкло автоклав, което показва нивото на водата в котелното vodoparovom. долната и горната, съответно представлява допустимата долна и горна ниво на водата в vodoparovoy на камерата - две хоризонтални линии, отбелязани върху стъклото на манометър тръба. въздушен вентил е предназначен за отстраняване на въздуха от камерата за стерилизация и vodoparovoy рано стерилизация защото въздуха, е лош проводник на топлинна стерилизация режим дава. В долната част на автоклава се кондензиране клапан за освобождаване на стерилизационната камера от кондензат, произведени по време на нагряването реторта материал.

Правила за работа с автоклав.

Преди да започнете да посещавате автоклава и приборите. В автоклави с автоматично регулиране на няколко електрически вакуумни vodoparovoy габарит камерни стрелки коригирани в съответствие с режима на стерилизация: долната стрелка се поставя върху 0,1 атм. нисш горния 0.1 атм. над работното налягане vodoparovuyu камера се пълни с вода до размерите прозореца на горната марка. Между вентила за пълнене на вода тръба, през която влиза пара в камерата се поддържа отворен безплатно излизане на въздуха от котела. А стерилизация камера заредена автоклав стерилизация материал. След това капакът (или вратата) автоклавът се затваря плътно закрепване централната затвора или болтове; за да се избегне изкривяване, болтове завинтени на кръст (диаметър). След това включва източник отопление (електрически ток, пара), затваряне на клапана на тръбата, свързваща източника на парна стерилизация на камера. С настъпването на изпаряване и налягането камера vodoparovoy продукция продухвания (отстраняване на въздуха от стерилизация котел). вентилиране метод определя от конструкцията на автоклава. Първоначално въздушни изходи на порции, след гладка непрекъсната струя от пара, което показва, че въздухът от камерата за стерилизация напълно заменени. След отстраняване на въздушния клапан се затваря и започва постепенно увеличаване на налягането в камерата за стерилизация.

В началото стерилизация се счита времето, когато манометърът показва определено налягане. След това, интензитетът на нагряването се намалява така, че налягането в автоклава за желаното време остава на същото ниво. В края на отопление време стерилизация е спряло. Затвори клапата в тръбопровода, пара се подава в камерата за стерилизация и отваряне на клапана на кондензацията (даунлинк) тръба за намаляване на налягането на парата в камерата. След падането на манометъра на нула бавно отслабва затягане устройство и отворете капака на автоклава.

Температурата и продължителността на стерилизация на стерилизация материал определя от качеството и свойствата на тези микроорганизми, които са заразени.

контрол на температурата в камерата за стерилизация се извършва периодично чрез бактериологични тестове. Биоанализите се произвеждат бактериологично лаборатории TSSEN. В случай на непредставяне на данните от изпитванията от техническото състояние на автоклава.

Стерилизация на течаща пара.

Стерилизация тече пара, произведени в tekucheparovom Koch апарат или в автоклав при отвинти капачката и отваряне на изходящия крана. Кох апарат е метален кух цилиндър с двойно дъно. Пространството между горните и долните дънни плочи пълни с вода 2/3 (за спускане, оставащ след стерилизацията е чешмяна вода). апарат покривка е с централен отвор за термометър и neskol¬ko малки отвори за парата, за да избяга. Стерилизиращи материал се зарежда в апарат камера свободно да се позволи максимален контакт с пара. Започвайки стерилизация е времето от вряща вода и пара въвеждане на стерилизационната камера. tekucheparovom на апарат стерилизира главно хранителна среда, чиито свойства се променят при температура над 100 ° С Изтичане стерилизация с пара трябва да се повтори, тъй като един затопляне при температура от 100 ° С не се осигури пълно дезинфекция. Този метод се нарича фракционна на стерилизация: материал лечение реторта извършва чрез протичане пара в продължение на 30 минути на ден в продължение на 3 дни. Между стерилизация материал се съхранява при стайна температура в продължение на поникването на спорите в вегетативни форми, които са убити през следващите нагреватели.

Фракционна-фракционна стерилизация използване температури под 100 ° С, Tyndall предложен. Загряване sterilizuemogo материал, произведен във водна баня, снабдена с термостат за един час при температура 60-65 ° С в продължение на 5 дни или при 70 до 80 ° С в продължение на 3 дни. Между накисва процес материал се поддържа при температура от 25 ° С за покълване на спорите в вегетативни форми, които са убити през следващите нагреватели. Фракционна използва за стерилизация на хранителна среда, съдържаща протеин.

Механични бактериални стерилизация използване Ултрафилтрите. Бактериални филтри, използвани за да се освободи течност да бъде в него на бактерии, както и за разделяне на бактерии от вируси, фаги и екзотоксини. бактериални филтри вируси не са забавени, и следователно не може да се разглежда като ултрафилтрация стерилизация в общоприетия смисъл на думата. За използване на Ултрафилтрите фино порест материал (каолин, азбест, целулоза нитрат, т.н.), които може да забави бактериите.

Азбест филтър (Seitz) са дебелина азбест плоча от 3-5 mm и диаметър 35 mm и 140 за филтриране на малки и големи обеми от течност. В нашата страна, азбестови филтри, произведени в две степени: "F" (филтър), забавяне на суспендираните частици, но пропуска бактериите и "SF" (стерилизация), по-плътен, което пречи бактерии. Преди използването на азбестови филтри монтирана в устройството за филтриране, и с тях се стерилизира в автоклав. Азбест филтри използвани самостоятелно. Мембранните филтри от нитроцелулоза и са дискове бели 35 мм в диаметър и дебелина 0,1 мм.

Бактериални филтри се различават по размер и порите obozna¬chayutsya номера на последователност (таблица. 2).

Непосредствено преди употреба мембранни филтри са стерилизирани чрез кипене. Филтрите се поставят в дестилирана вода, загрята до температура 50- 60 ° С, за да се предотврати усукването, кипва при ниска температура в продължение на 30 минути, промяна на вода 2-3 пъти. Филтър стерилизира за да се избегне увреждане ги отстранява от стерилизатора и ostuzhennym пламна форцепс с гладки краища.

За филтриране на течности бактериални филтри монтирани в специални филтърни устройства, по-специално във филтъра Seitz.

Тя се състои от 2 части: горен с цилиндрична форма или фуния, и устройството-нисш опората, така наречената филтър масата на метална мрежа или нето керамична плоча, върху която е поставена мембранен филтър или азбест. Носещата част на устройството има форма фуния, заострена част на което е в гумената запушалка на бутилка бунзенова колба. По време на работа, в горната част на устройството се определя от долната страна с винтове. Преди започване на пространството филтриране, свързващи различни части на системата, за да се създаде уплътнение поставени в парафин.

изходящата тръба на колбата е долепена дебелостенна гумена тръба за вода, масло или колоездене nacocy. След това единицата за цилиндър или фунията и се излива в филтрираната течност, помпата създаване на вакуум в приемащия съд. В резултат от разликата в налягането в резултат филтрираната течност преминава през порите на филтъра в приемника. Микроорганизми остават на повърхността на филтъра.