радиоимунологично

Формиране и развитие на P. m., Свързани с работата Yalow и Berson (R. S. Yalow, S. A. Berson, I960), предложен метод за определяне на ендогенен инсулин в кръвната плазма.

. РЕЗЮМЕ R. m се използва за определяне антиген (вж.) На съответните имунни серуми, и се прилага в антиген - антиген антитяло, белязано с радиоактивен изотоп, като например, йод (125 I), в резултат на свързването се определя (небелязан) и етикетирани антиген с ограничено количество на антитяло. Тъй като белязан антиген. Се прибавя към дадена доза, е възможно да се определи коя част в контакт с антителата и която част остава несвързания чрез конкуренция с немаркиран антиген се открива. В определени концентрации на количеството белязан антиген, свързан с антитялото е обратно пропорционално на количеството на антиген определена. Схематично, този процес може да бъде представен, както следва:

След взаимодействието на антигени с антитела, образувани комплекси антиген-антитяло (вж. Антиген-антитяло реакция) се разделя от свободен белязан антиген. Клон антиген-антитяло комплекс произведени по различни начини: чрез електрофореза. (См), гел филтрация (. См), Фракционен етанол утаяване на имунния комплекс, амониев сулфат, и т.н., както и чрез агрегиране на имунни комплекси антиглобулинов серум или ги сорбция имобилизиран. (приложен към повърхността на твърда фаза) антитела. В допълнение, сорбцията на наличния свободен белязан антиген, използвайки добавки, например, талк, целулоза, кварц, активен въглен и други. Разделянето на несвързания белязан антиген от антиген-антитяло комплекса, определяне на количеството белязан антиген, свързан в комплекс но броят на импулси (чрез сцинтилационен брояч). Намаляването на броя на импулсите за единица време в сравнение със съответните контроли, показва наличието на хомоложна белязан антиген, свързан с анти-серум, при което белязан антиген не е влязло в реакция и не е дефинирано в антиген-антитяло комплекс.

Имунен серум срещу определения антигена и белязаното антиген преди титрува и се използва в P. м. В оптималното разреждане с ром свързване настъпва 50% от въведената етикета. За оценка на данните се използва (графика) в зависимост от свързването на белязан антиген в серум оптималното разреждане на концентрацията на белязан (стандарт) антиген.

Той е широко използван в P. m. Антитяло серум срещу антигена, имобилизиран (адсорбция Rowan) на пластмасови повърхности или химически свързан към повърхността на полимера. В 1966 гр. Кет (К. J. живътн) група на изследователите, както и антитела имобилизация върху смолата Wide и Porat (L. Wide, J. P. Porath), използвани в стр. К. Показано е, че обездвижване на антитела върху Sephadex целулоза и се обработва с цианоген бромид, както и различни пластмаси без лечение активатор. За провеждане на реакцията в полистиренови епруветки с имобилизирани антитела върху вътрешната повърхност определено чрез антигена. След инкубиране, несвързан антиген се отстранява чрез промиване и се въвежда белязан антиген, който след това се отстранява по същия начин, чрез определяне на допълнително количество от радиоактивен свързан.

Има различни метод F. М. система двойно антитяло, когато комплексът антитяло-антиген се обработва антиглобулинов серум утаяване (второ антитяло), последвано от отделяне на утайката чрез центрофугиране. Добавянето заедно с антиглобулинов серум от нормален кръвен серум от едно и също животно. от притежавани до първото антитяло, получено насърчава утаяване на комплекси.

Определяне на антиген, използвайки белязано антитяло е наречен метод IRMA. В този случай, антигенът е фиксиран предварително към твърда фаза, например в полистиренови епруветки. При формулирането реакционни определени форми антиген комплекс с белязаното антитяло, което остава в разтвор, и нереагирал антитяло реагира с антиген свързан с твърда фаза. В изпълнението, имунорадиометричен метод - метод за двойно куплиране - определени антиген е комплексиран с антитяло, имобилизирано върху твърда фаза. След това, след отстраняване на свободен антиген чрез промиване повърхността на твърда фаза се добавят маркирани антитела, които разпознават комплекс. Радиоактивността на антитяло - антиген - антитела - 125 I радиоактивност в сравнение с контролните проби, проби, съдържащи известни и не съдържат антиген.

Висока чувствителност P. m. (Пикограма до аналита) се оставя по-точно определяне на концентрацията на много биологично активни съединения. Недостатъците P. м. Включване възможно намалява специфичност поради примеси в пробата се определя, например, някои лекарства, и присъствието в серума на кръстосано реактивни антитела. В допълнение, антигени и антитела, белязани с гама-излъчващи изотопи, кратък срок на годност; когато специални мерки за сигурност, трябва да се съобразяват с тях. В тази връзка, има по-малко опасни метод е подобен по принцип P. м. Зададена прилага за антигени или антитела, белязани с ензим (вж. Enzyme-имунологичен метод). Широкото въвеждане на P. m. Възпрепятствано от трудността на получаване стандарт белязан серуми и антигени, да спазват правилата на радиоактивни вещества, използвани скъпо оборудване (гама и бета броячи, дълбоко замразяване камера, компютри и т.н.) и реактиви с висока изискването за стандарти за чистота, както и високо специфичен серум.

Библиография: имунологични методи за научни изследвания в клиника и експеримент, изд. . А. Я. Лисенко, М. 1978; Immunological Methods, изд. X. Frimelya, транс. с него. М. 1979 Ch ARD Т. Radioimmunological методи платно. от английски език. М. 1981 док. Yalow R. S. а. Berson S. A. имуноанализ на ендогенен инсулин в плазмата мъж, J. Clin. Инвестирайте. с. 39, стр. 1157, 1960.