Оцветяването, QC - microtomy
оцветяване
Оцветяване хистологични секции на базата на неравни елементи афинитет тъкан на някои багрила. ядра клетки се оцветяват с способен ядрото и цитоплазмата - киселинните цветове. Следователно, основният разликата, или ядрени и кисела или дифузно боята.
Най-често в обичайната практика на патология прилагат цветови профили с хематоксилин-еозин според Ван Gieson, Пърлс, Судан III и др.
Хематоксилин-еозин. Мръсна секции в малки блюда на Петри или очила. Този метод се използва за боядисване секции получени по всеки метод. В тази клетъчна ядра придобиват виолетово-синьо или тъмно синьо и цитоплазмата и влакнест вещество - светло синьо или розово-червено. Мазнини и липиди не са боядисани. Червените кръвни клетки от бозайници, тъй като те не съдържат ядра се оцветяват само с еозин.
Цветни резени в блюда на Петри, произведени по следния начин.
1. парче дисекция игла се пренася от водата в хематоксилин разтвор за 2-5 минути.
2. Измийте във вода, 2-5 минути.
3. потапя за 10-20 и в 1% разтвор на солна киселина при 70 ° алкохол (ако частта е силно хематоксилин пребоядисани, трябва да се съхраняват в този разтвор е по-дълго).
4. Измийте в чиста вода за 5-10 минути.
5. Измийте в слабо алкален разтвор (в буркан вода се прибавя 1-2 капки течен амоняк) за 10 минути.
6. Измийте отново с чиста вода в продължение на 10 - 15 мин. Ако разреза след алкална вода измива достатъчно, острижеше лошо еозин.
7. петна с еозин за 3-5 минути.
8. Изплакнете във вода в продължение на 1-2 минути. 280
9. дехидратирани в алкохоли с увеличаване на силата - 75, 90, 100 °. Ако разреза пребоядисан еозин, той трябва да бъде малко по-дълго да се запази в 75 ° алкохол.
10 антирефлексно в karbolksilole.
11. С помощта на шпатула и нарязани на иглата се прехвърля в стъклена плочка.
12. Изсушете филтърната хартия.
13. В секцията капка се прилага или канадски балсам ела и покрита с покривно стъкло.
Боядисване на Ван Gieson. В срезове, оцветени с Van Gieson, съединителна тъкан се боядисани в ярко червени, а останалата част от тъканта - жълто или сиво-жълт. Ядрата са оцветени в черно или тъмно лилаво.
Оцветяването произведени, както следва.
1. раздели са силно оцветени с хематоксилин (хематоксилин-добре Weigert) и се изплакват с вода.
2. Веднага picrofucsin прехвърля в 3-5 минути (смес от наситен воден разтвор на пикринова киселина - 150.0 и наситен воден разтвор на фуксин -3,0-5,0).
3. Бързо се промива във вода (водни екстракти от магента изключване).
4. обезводнен алкохол 95 ° в продължение на 1-2 минути.
5. bleachable в karbolksilole и вградени в балсам ела, както когато се оцветяват с хематоксилин и еозин.
Покритие на Судан III. Судан III - неутрален azokraska разтворим в алкохол, ацетон и мазнини, които не са разтворими във вода. Оцветяване Судан III, произведени за определяне на точки на мазнини и липиди. боядисване оборудване следва.
1. Замразени срези порази прехвърлят към 0.5 1 мин при 50 ° алкохол.
2. секции се поставят в разтвор svezhefiltrovanny Судан за 10-20 минути.
3. промива с алкохол 50 ° в продължение на 0.5-1 минути.
4. Внимателно се промива с вода в продължение на 10 - 15 мин.
5. Срезовете се оцветяват с хематоксилин Ерлих стипца или Boehmer.
6. промива с вода в продължение на 3-5 минути. Изписана хематоксилин секции диференцирани в 1% воден разтвор на солна киселина, промива се с алкална вода и след това с чиста вода.
7. състояща се от глицерол или глицерин-желатин.
8. Покрийте покритие стъкло.
контрол на качеството
Хистологично подготовка на някаква форма трябва да отговаря на следните изисквания:
1. Дръжте ин виво държавните структури;
2. За да бъде доста тънък и прозрачен. За да го изучават под микроскоп с предавана светлина.
3. Бъдете контраст, който се изучава под микроскоп структурата трябва да бъдат ясно определени;
4. Подготовка за светлинна микроскопия трябва да се поддържат в продължение на дълъг период от време и да се използват за повторно разглеждане.