Методи за боядисване хистологични препарати
Всички багрила, използвани в хистологични техники са класифицирани в 4 типа: кисели, основни, неутрални и безразличен. Кисели багрила - са киселини и киселинни соли (еозин и киселина фуксин) Боядисва структура, наречена oxyphilic (с афинитет към кисели багрила).
Този цитоплазмени компоненти протеин и noncellular структура (колагенови влакна).
Основни багрила. Основните соли (хематоксилин и кармин azur2). Боядисване структура - Тази структура, или други съдържащи нуклеинови киселини - ядрото, рибозомата, аморфен компонент на междуклетъчното вещество.
Неутрални багрила - сместа от двете багрила: главен (лазур 2) и киселина (еозин). Конструкции усещане кисели багрила, цвят еозин; Пример - в специфични гранули от еозинофили. Ядрата на клетките се оцветяват с лазур 2.
Безразлични багрила - Судан III, Судан IV. Судан петно мазнини капки (в която е разтворен).
Общи техники за оцветяване
1. хематоксилин -eozinom - най-разпространеният метод на оцветяване. Тя съчетава основни и кисели багрила. Затова тя разкрива почти всички клетки и много не-клетъчна структура. Ядрата придобие цвят синьо-виолетов, цитоплазма - жълто-розов цвят.
2 покритие от желязо хематоксилин (за метод Gendengayna). Лекарството е предварително обработен (кисели) zheleznoammiachnymi стипца, и след това се обработва с gematoksilinom.Struktury придобие кафяво-сив цвят. Добър идентифициран ядрена структура, границата клетки, мускулни влакна.
Идентификация на не-клетъчни структури съединителната тъкан.
1. Боядисване по метода на Ван Gieson. Пигменти - смес разтвор на пикринова киселина и киселина фуксин.
Колаген влакна (съдържащи се в междуклетъчното вещество на съединителната тъкан) са боядисани в ярко червен цвят, и елементи други тъкани (например мускулни влакна.) - жълт.
2. Покритие от метод Mallory - багрило е трицветно - смес от киселина фуксин, анилиново синьо, оранжево, и двете киселини. Колаген влакна на съединителната тъкан са оцветени тъмно синьо; много други структури (ядро, мускулни влакна, еритроцити) - оранжево или червено.
3. импрегниране на сребро. Препаратът се обработва с амонячен разтвор на сребро, а след това - с редуциращи агенти.
В резултат на това освободената среброто се отлага върху някои влакна на съединителната тъкан. Ретикуларни (argyrophilic) влакна стават черни, колагенови влакна - кафяв, клетъчни ядра - светло кафяви.
4. оцветяване orseinom. Еластични влакна на съединителната тъкан се оцветяват тъмно червен цвят и други конструкции - в леко розово.
5. Цветът на хематоксилин-picrofucsin. Еластични влакна обагрени пикринова киселина жълтия цвят на колагенови влакна - червено, клетъчни ядра - оцветени в хематоксилин тъмно пурпурен цвят.
6. Метод оцветяване SHmorlja. Използва се за оцветяване на костите и дентина. Предварително парчета от материала, подложени на варовика и след това се съхраняват в разтвор на калиев карбонат стипца.
Стените на костната кухина и каналчета (покрити с мрежа от колагенови влакна) са боядисани в тъмно кафяв цвят, а останалата част на фона - светло кафяв.
4. Цветът на клетките на съединителната тъкан и кръв. Оцветяване azur2-еозин: базилните елементи azurom2 боядисани в тъмно синьо, oxyphilous - в светло червен цвят.
Оцветяване петна по метод Романовски. Боядисват - същите, както в предишния случай (azur2-еозин).
Еритроцитите стане бледо червено, цитоплазмата на левкоцити - синьо или синьо, цитоплазмени гранули са оцветени в съответствие с тяхната природа.
Идентифициране елементи на нервната система.
1. Импрегниране на сребърен нитрат. Фиксирането на формалин материал се извършва най-малко 7 дни.
Запечатване не е проба се осъществява чрез изливане в парафин, и чрез замразяване
При боядисване парче се обработва последователно с разтвори на сребърен нитрат, формалин, амонячен сребърен.
Елементите на нервната система (влакна, клетки, и т.н.) са боядисани в черен цвят околната тъкан - на светло кафяв цвят.
2. Цветът на толуидиново синьо за метод Найслерово. Толуидиново синьо петно умерено базофилна връзка в синьо. С нея открити бучки базофилна вещество (т.нар Nissl вещество) в цитоплазмата на нервните клетки.
3. Боядисване метил зелено - pironin по метод Brachet. Методът, използван за идентифициране на РНК.
Цитология - науката за клетката. Тя изследва структурата и функцията на тъканни клетки. Cell - е основната структурна единица на организма, състояща се от ядро, цитоплазма и клетъчната мембрана ограничен.
През 1838 г Schwann клетки и Schleiden формулирани теория.
теория Cell включва разпоредби:
1. Клетката е най-малката единица на живот.
2. Клетките от различни организми имат сходна структура.
3. Размножаването на клетките се осъществява чрез разделяне.
4. клетки на многоклетъчни организми работят в тясна връзка един с друг, те образуват тъкани и органи.
Основни компоненти на клетката: а) в цитоплазмата; б) сърцевината.
Структурата на цитоплазмата включват:
1. tsitolemmy, Hyaloplasm 2., 3. органели 4. включвания.
Тя се състои от 3 основни компонента:
- nadmembranny слой - гликокаликса
Химически състав plasmolemma: протеин (60%), липиди (40%), въглехидрати (10.5%). Plasmolemma основа на двуслойна липидни молекули. Всеки слой е образуван от молекули на фосфолипиди и холестерол в част. Всяка липидна молекула отличава: а) хидрофилна глава; б) хидрофобните опашки. Те комуникират един с друг и образуват bilipidny слой. Хидрофилни главата в контакт с външната и вътрешната среда.
Мембранни протеини се разделят на:
Според функцията на протеините се разделят на:
Методи за транспорт на вещества чрез plasmolemma:
1. проста дифузия
2. активен транспорт
3. везикуларен транспорт (ендоцитоза, екзоцитоза)
Видове контактите клетка-клетка:
1. Прости контакт - клетки взаимодействат поради гликокаликса макромолекули.
2. desmosomal контакт. Клетките са свързани една с друга чрез протеинов десмоглеин и desmoplakin.
1. интимен контакт. Клетките са тясно съседство, чифтосване със специални протеини.
2. Nexus - клетки се събират в района на 2 пМ и проникнали от канали - connexons.
3. синаптичните контакти. Синапса разграничи пресинаптичен мембрана, синаптичната цепнатина и постсинаптичната мембрана. Сигналът се предава химически - посредник.
Гликокаликса е съединение с гликопротеини и гликолипиди.
Hyaloplasm - безструктурен вътрешната част от цитоплазмата, е колоид, но може да се движи в гела и зол. Тя се състои от вода и различни биополимери, представляват по-голямата част от протеини.
Органели - постоянни структури цитоплазмата клетки с специфичната структура и провеждане на специфична функция.
1. Общи органели намерени във всички клетки;
2. Специално - на разположение в някои клетки.
Общи органели са разделени на: мембрана и не-мембрана.
Специални органели разделят на: цитоплазмени органели и повърхността на клетката.
Чрез мембрана органели включват митохондрии, ендоплазмения ретикулум, Golgi комплекс, лизозоми, пероксизоми.
За не-мембрана органели са рибозоми, центъра на клетка, микротубули, microfibrils, микрофиламенти.
Структура и функция на мембранни органели
Дебелината на мембрани на органели bilipidnyh по-малко (7 нм) от plasmolemma (10 пМ). органели мембрани взаимодействат един с друг.
Формата на митохондриите може да бъде овална, кръгла, продълговата. Стената е образувана от две митохондриалните мембрани. вътрешни форми мембранни гънки вътре - крипти. Вътре в митохондриите са митохондриалната ДНК и рибозомите.
Функцията на митохондриите - образованието енергия.