Идеята за културни, ензимни и багрилни свойства на микроорганизмите - общ микробиология

Бактериологични изследвания прилага за откриване на патогенни бактерии в материала от заразени животни или техните трупове, откриване на микроорганизми в околната среда обекти, фураж, месо и други подобни. Г. Естеството и метода на метод за вземане на проби за прехвърляне материал в различни инфекциозни заболявания варира, но има някои общи разпоредби, които трябва да бъдат разгледани, независимо от предмета на научни изследвания и свойствата на материалите. Пробният материал възможно е събрана асептично в стерилен съд и се транспортира до близко бъдеще с придружаващия документ, в лабораторията (както се посочва датата на вземане на характера и източника на материала, основните клинични признаци и патологични промени, целта на изследването). Бактериологични изследвания включва три основни метода: микроскопия (bacterioscopy) тампони Pathol. или друг тест материал .; изолиране на чиста култура от бактерии, последвано от морфологично изследване. култура биохимична. антигенни и патогенни свойства на бактерии.

Бактериологично изследване започва с микроскопия, което позволява да се открие микробен материал да се проучи тяхната морфология (форма, размер, структура). Когато микроскопия Pathol. материални намазки се получават от органи или тъкани на тънки намазки др. изследван материал, те се сушат на въздух, фиксирани (обикновено горящи) и обагрени чрез различни методи, в зависимост от фокуса на изследването. За откриване на някои бактерии (напр. Причинител на туберкулоза) Pathol. материал предварително се обработва с един от методите за обогатяване да се повиши концентрацията на бактерии в него и да се отървете от външни микроби. За бързо откриване на бактерии използвани флуоресцентна микроскопия. За да се изследва подвижността на бактерии, поради наличието на камшичета, с помощта на микроскоп млад (12--24 з) на живо култура с помощта на висящи капки или препарати натрошени капки. бактерии мобилност също могат да бъдат определени въз основа на характеристики на растеж в полутвърд култура ИПП.

Изолиране на бактериална култура се извършва чрез засаждане материал за хранителни среди. За да се улесни и ускори отделянето на бактерии, като се използва диференциална диагностика и избираем pitatsya. среда (твърди и течни), по-ryh до определени видове бактерии произвеждат тяхната характеристика растеж (това инхибира растежа на чужди микроби). Crop здраво pitatsya. бактериологична среда. плочи, носени от триене с шпатула на няколко капки от повърхността на материала на средата. В проучването на паренхимни органи на мъртви животни, убити или калциниран или flambiruyut тяло парче, а след това се е врязала стерилни ножици и пинсети, изпълнен с нарези повърхност на pitatsya. среда, в чашата. В течен материал среда култури да Pasteur пипета. За получаване на растежа на изолирани колонии на микроби върху твърдата среда и отделно от изследваните бактерии, свързани организми, носени от Drygalski метод фракционна засяване. Инокулираните плочи и епруветките се инкубират в термостат при оптимален растеж на всеки вид бактерии в D-честота (често 37 ° С) за 1--2 дни, в някои случаи (туберкулоза бактерии) - до 3-4 седмици. Най-дългата и сложен етап и Б. .-- родове и видове идентифицирането на изолирани култури. Научете само чисти култури, получени след преминаване на колония и като идентичен морфологично. и багрилни свойства. Антигенни свойства изследвани в реакционната култура аглутинация. Определяне на патогенни бактерии свойства се извършва чрез инфектиране на културата на лабораторни животни или култура филтрат (определена токсин).

След разглеждане бактерии свойства корелират получените данни с атрибутите на бактериите в съществуващите схеми за класификация или детерминанти микроби (Е. Burgi, 1974 ;. NA ръбове silyshkov-1949 и т.н.) и провеждане им родове и видове диференциация. В случай на съмнение, да извършва проучване за проследяване материал. Б. Резултати и. записани в дневника или форма лаборатория изпит, при сключването на рояк посочи кои микробно изолирани от изпитвания материал. Диагнозата на инфекциозно заболяване може да се направи само като се вземат предвид epizootologich. Klinichev. и patologoanatomich. данни.

Култура на микроорганизъм, популация от клетки на микроорганизми (бактерии, дрожди, актиномицети, гъбички), отгледани в течна или твърда среда хранителни вещества. Разграничаване между чист и смесена култура. Ако средата расте един вид микроорганизми, такава култура се нарича мрежата; микробен растеж в присъствието на два или повече вида - смесват. чистота култура се определя чрез микроскопски намазки, получени от култури в течна и твърда среда, като се вземат предвид еднородността на колониите върху твърда среда, както и чрез изучаване на културата, биохимични и антигенни свойства на микроорганизмите.

Бактериална култура - населението на жизнеспособните бактерии, отгледани върху pitatsya. на околната среда. Чисти бактерии, изолирани от култура наследственото източник в даден момент се нарича. щам. Най-честите щамове с характерна Fiziol. и Biol. свойства, присъщи на този тип бактерии се нарича. справка и са свикнали да ги сравните с новите разпределени култури. Идентифициране и диференциация на бактерии може да се извърши само в случая, където има чиста култура. Следователно, при получаване на смесена култура от прибягва до различни методи за нейното лечение на чужди микроби. Референтни щамове, използвани в производството на диагностични и имунни средства (за производство на антигени получават серуми, ваксини, антитоксини). За продължително съхранение бактериални култури често използват полутечни (0,25--0,3%) IPA (добавя към получената култура слой на стерилен вазелин масло), чернодробна месо-пептон бульон с вазелин масло и други. Най-надежден запазване на културите постигнат, когато liofil-префектура сушене. Задържане правила култури от бактерии и по реда на почивката си в институции, определени от специална инструкция. За всеки бактериален щам попълнено паспорт, който да показва времето и източника на изолация култура, свойствата и характеристиките на напрежението.

Багрилни свойства - свойства на бактерии, гъбички и протозои, характеризиращи способността им да реагират с багрила и оцветени по определен начин.

Бактериите имат различни форми и доста сложна структура, която определя многообразието на тяхната функционална активност. За бактерии, характерни за четири основни форми: сферична (глобуларни), цилиндричен (пръчковидни) и нишковидните сложен. Бактериите сферична - коки - в зависимост от равнината на разделяне и един спрямо друг са разделени на отделни индивиди micrococci (отделно разположена коковидна), diplococci (сдвоен коки), стрептококи (вериги на коки) Staphylococcus (с форма на гроздовете) tetrakokki (образуване на четири коки) и sartsiny (пакети от 8 или 16 коки) .Palochkovidnye бактерии са под формата на единични клетки или носителите степен streptobakteriy.Izvitye форми на бактерии - Vibrio и spirillum и спирохетата. Вибриони имат формата на леко извити пръчки, spirillum - гофрирани образуват множество спирални zavitkami.okraski микроорганизми използват основни багрила, които са по киселинни компоненти бързо се свързват клетки. Сух пигменти, които се продават под формата на прахове, приготвени наситени алкохолни разтвори, и от тях - вода-алкохол, които се използват за боядисване на микробните клетки. Микроорганизми оцветяват излива багрило намазка върху повърхността за определено време. Основна фуксин петно ​​е проведено в продължение на 2 минути, метиленово синьо - 5--7 минути. Тогава намазка се промива с вода, докато докато течащи струи вода няма да безцветен, изсушена внимателно се блотират с филтърна хартия и mikroskopiruyut в системата за потапяне. Ако тампона правилно боядисани и се промива, след това на зрителното поле е напълно прозрачен и клетките са силно оцветени.

Има няколко основни цвята: Gram, Ziehl-Nielsen, на Ауески, Neisseria, дъждовни Джинове.

Ензимните свойства на бактерии, причинени от набор от ензими отразяват определени условия храненето и метаболизма, присъщи на този вид микроорганизми в различни среди. Бактерии от рода Salmonella се характеризират със следните ензимни свойства: не втечнява желатин, не се разлагат и ферментира адонитол захароза; по-голямата част не разцепва салицин не разлагат лактоза, не образува индол, не разцепва урея дава Voges-Proskauera реакция (реакция на atsetilmetilkar-binol); ферменти (с няколко изключения, малтоза, манитол, сорбитол, глюкоза, се разцепва за образуване на газ (S. Typhi, S. Pullorum обикновено не образуват газ) дава положителна реакция с метил червено, и намалява използва амониев нитрат, повечето от тях произвежда сероводород.

За проучване ензимните свойства на бактерии от рода Salmonella често се използва кратко цвят (на петна) серия, състояща се от носители с глюкоза, манитол, арабиноза, дулцитол, рамноза (Bitter среда); glitserinofuksinovy ​​бульон (бульон Stern). В допълнение към тези серологични диференциация среда за видове Salmonella също използват среда с малтоза, инозитол, трехалоза, ксилоза; лакмус мляко (промяна в лакмус мляко с растежа на Salmonella им позволява да се диференцира от способността за образуване на киселина или основа). Вместо лакмус обезмаслено мляко може да се използва с индикатора бромтимолово синьо (1 мл от разтвор на 0,4% в 100 мл мляко). Известен стойност за диференциацията на Salmonella има производствена култура сероводород. Протеолитични свойства се изследват чрез посяване на Salmonella проучен култура на NRM и мляко.

С оглед на сходството на бактерии от рода Salmonella от други микроорганизми от семейство Enterobacteriaceae е необходимо да ги разграничи. Понастоящем широко се използва практиката на бактериологичен диференциална диагностика гъста хранителна среда с лактоза (Ploskireva среда ендо, Левин). Чрез способността на бактериите да ферментира лактоза galmonelly отличава от често едновременно Е.коли, така разследването на материал Salmonella произвеждат първото засяване един от диференциални медии. В тези среди, Е.коли, ферментиране лактоза за да се образува киселина и домашни любимци и промяната на индикатора, за да образуват колонии, характеризиращ се с цистообразуващи колонии от Salmonella, не ферментиране лактоза. В сряда Ендо на E.coli бактерии произвеждат колонии от червено, често с метален блясък, salmonelly- безцветна или бледо розово (оцветена среда); в сряда Ploskireva Е.коли - колония оранжево-червен цвят, салмонела - прозрачен пожар бледо розово; в сряда Левин E.coli, образуват черни колонии заобиколен от ръб salmonelly- прозрачен, бледо розово или розово-лилаво. За разграничаване на Salmonella и културно други щамове и бактерии от рода Proteus и бактерии колиформи използвани среда с карбамид (сряда Preiss, Ръсел, Olkenitskogo), SS-Arap (Salmonella - Shigella - агар). И други Цветът на тези среди поради неравномерното интензитет разцепване на азотни вещества от микроорганизми за производство на алкални продукти. Колиформени бактерии и Proteus (без 0-форма), обикновено в SS-arape не позволяват растежа на Salmonella и растат в нежна, безцветни колонии.

Плътни диференциално-диагностичен носители служат само за определяне на бактерии, принадлежащи към Salmonella рода и ги отделят от придружаващите микрофлора.

За най-ефективно изолиране на Salmonella от патологично материал, съдържащ голяма (брой едновременно микрофлора, предотвратяване на растежа им, се използват специални обогатяване среда (Mueller, Kaufman и др.). Tetrationovy натриев добавя в Mueller среда инхибира растежа на колиформени бактерии, но не предотвратява развитието на Salmonella. Kaufman среда е модифицирана среда Мюлер, към който се прибавя разтвор на брилянтно зелено и природен жлъчна говедата. Тези компоненти забавят р.о. Член колибактерии бактерии, особено Протей, но допринасят за растежа на Salmonella.

Ензимните свойства салмонела не винаги стабилни и могат да варират в зависимост от условията на околната среда, така че правилното tipizirovanie салмонела е възможно само в резултат на изучаване комплекс морфологични, културни, ензимни и антигенни свойства на конструкцията.