Серологично диагностика на коремен тиф и паратиф

Реакция Видал. От втората седмица на заболяването в кръвта на пациенти натрупват антитела срещу инфекциозни агенти. За да се изследва тяхното откриване в тест за аглутинация в кръвния серум на пациента. Тъй като антиген използва убит Salmonella култура - диагностични инструменти.

За да се активира Widal реакция използва серум на пациента, набор от диагностика, изотоничен разтвор на натриев хлорид.

Кръв (2-3 мл) на пулпата на пръста или кубитална вена се събира в стерилна епруветка и се транспортира до лабораторията. В лабораторни епруветката се поставя в термостат за 20-30 минути на съсирек, след съсирек обграждат Pasteur пипета, да се отдели от стената на тръбите, и се поставят за 30-40 минути на студено. Отделете серума се аспирира и се използва за производство на аглутинация с Salmonella diagnosticums на коремен тиф и паратиф. За кръвния серум може да се центрофугира.

Когато инфекциозен процес - коремен или паратиф - тялото произвежда О и Н антитела срещу патогенни антигени на същото име.

За първи антитела се появяват и изчезват доста бързо. H-антитела продължават дълго. Същото се случва по време на ваксинирането, така положително Widal взаимодействие с О и Н антигени показва наличието на заболяване, а само реакцията с H-антигени може да бъде от оздравяващи пациенти (анамнестичен отговор) и присаждане (присаждане). Съответно, реакцията Widal отделно до получаване на О- и H-антигени (diagnosticums).

Тъй като клинично коремен тиф и паратиф А и В са сходни, след това да се определи естеството на опит серум заболяване на пациента едновременно с diagnosticums на Salmonella коремен тиф и паратиф А и Б.

Видал реакция се използва широко, тъй като е проста и не изисква специални условия.

Сложете реакцията по два начина: обемна и капково (виж глава 12.). На практика по-обемна метод по-често. При формулирането на линеен сериен номер аглутинация реакция трябва да съответства на броя на антигени (diagnosticums). агент причинител на заболяването се счита микроорганизъм diagnosticum от които аглутинират серуми пациент. Понякога има група аглутинация, като агенти на коремен тиф и паратиф имат общи антигени на групата. В този случай, резултатът се счита за положителна реакция в серия, при аглутинация отбележи високо серумно разреждане (таблица. 36).

Таблица 36. резултат Възможна аглутинация

Забележка. На практика реакционната Vidal даде четири diagnosticums: Typhi "G" и "Н", и паратиф А и В - с diagnosticums "ON".

Ако възникне аглутинация само в малки серумни разреждания - 1: 100, 1: 200, за да се разграничи от реакцията с болестта или присадка анамнестичен прибягва до повторно формулировка на реакцията на аглутинация на 5-7 дни. титър на пациента антитяло увеличава, а в присадката е била болна, или не се променя. По този начин, увеличаването на титър на антитяло в серума е индикатор на заболяването.

В отговор на въвеждане на патогени в тялото на коремен които имат Vi-антиген в кръвта на пациента се появи VI-аглутини. Те се определят от седмицата 2-ра на заболяване, но те обикновено не са титър по-голяма от 01:10. Откриване Vi антитела, свързани с наличието на патогени в коремен тялото, следователно, определянето на тези антитела е от голямо епидемиологично значение, тъй като позволява да се идентифицират бактерии носители.

Vi-хемаглутинация реакция. Това е най-чувствителна реакция за откриване на антитела.

Принципът е реакция, че човешките еритроцити (I група), или овце след специално лечение могат да адсорбират Vi-антиген и по този начин придобиват способността agglyutinipovatsya съответстващ VI-антитела.

Червените кръвни клетки се адсорбират върху повърхността на еритроцитни антигени, наречени diagnosticums.

За определяне на Vi-хемаглути реакции вземат:

1) в кръвния серум на пациента (1-2 мл); 2) Salmonella Vi-еритроцитен diagnosticum; Н) Vi-серум; 4) О-серум; 5) изотоничен разтвор на натриев хлорид.

Реакционната Аглутинацията се поставя в епруветки или пластмасови плочи с отвори.

Кръвта на пациента, като същите като при реакцията на Видал. Серум се получава. Суроватка получаване на двукратни серийни разреждания, вариращи от 1:10 до 1: 160.

0.5 мл от всяко разреждане се прибавят към ямките и се добавят към 0.25 мл еритроцитен diagnosticum. Реакционната смес се поставя в обем от 0,75 мл.

Контрол са: 1) стандарт аглутиниращ серум monoretseptornaya на диагностичен комплект + - отговор трябва да бъде положителен титър на серум; 2) diagnosticum в изотоничен разтвор на натриев хлорид (контрола) - реакцията трябва да бъде отрицателен.

Съдържанието на гнездата се смесва добре, се поставя в термостат в продължение на 2 часа и се оставя при стайна температура до следващия ден (18-24 часа).

Сметката започва с контрола. Реакцията се оценява въз основа на степента на аглутинация диагностичен комплект.

Резултатите се записват в chetyrehkrestnoy система:

++++ еритроцити напълно аглутинират - утайка на дъното на отвора във формата на "чадър";

+++ "чадър" по-малко, не всички аглутинирани червените кръвни клетки;

++ "Чадър" малко на дъното на кладенеца има пелети от червените кръвни клетки neagglyutinirovannyh;

- отрицателна реакция; еритроцитите са слепени и не почиват на дъното на кладенеца под формата на бутони.

1. До каква период на заболяването представлява реакция Видал?

2. Какви са необходими за производството на Видал реакция на съставките?

3. Какво diagnosticums поставени Видал реакция?

4. Кои от серологичните тестове, е най-чувствителна при диагностицирането на инфекции tifoparatifoznyh?

5. Как diagnosticum използване при определяне реакция Vi-на хемаглутинин?

6. Какво е серума се открие наличието на Vi-антиген в култура при изследване?

7. Колко важно е определението за тип Vi-фаги?

Обърнете учителят О- и N-diagnosticums на Salmonella тиф, paratyphi A и S. paratyphi В и серума на пациента. Сложете Widal реакция.

EMC среда Ploskireva, бисмут сулфит агар медицински търговски достъпен под формата на сух прах. Те се получават съгласно инструкциите на етикета: определено количество прах се претегля, излива в подходящо количество вода, загрява се и се разпределят в стерилни петриеви панички.

Сряда Ръсел. В 950 мл дестилирана вода се прибавя 40 г суха хранителна среда и се прибавят 5 г от хранителен агар. Загрява се до кипене и разтваряне на прахове. В 50 мл дестилирана вода се разтваря 1 гр х. ч. захар и се добавя към получената смес. Средата се разпределя в стерилни епруветки в 5-7 мл стерилизирана с течаща пара (2 дни до 2 минути) и скосеният така, че да оставя колоната. Сряда Ръсел с манитол и захароза се приготвя по същия начин.

Сряда Olkenitskogo на сухо агар. 2,5 г сух разтопено хранителен агар в 100 мл дестилирана вода. В ostuzhennoy до 50 ° С агар добавя всички съставки, изброени в състав (етикет). Средата се разпределя в тръби и се стерилизира с течаща пара (3 дни, 20 минути) и след това косят. Готови среда трябва да е бледо розов цвят.