Пълна хидролиза - протеин - голяма енциклопедия на нефт и газ, хартия, страница 1
Пълна хидролиза - протеин
Пълна хидролиза на протеина в аминокиселини не може да се прилага само от един ензим; това изисква комбинираното действие на няколко ензими. Има две големи групи: ензими протеази, които включват пепсин, трипсин и химотрипсин хидролизиране природен хранителни протеини големи пептиди и пептидил оксидаза съдържащ карбоксипептидаза, аминопептидаза и дипептидаза хидролизиране пептиди в аминокиселини. [1]
Индикация на пълен протеин хидролиза обикновено abiurent хидролизат. Все пак трябва да се забравя, че този атрибут показва, вероятно ще се доближава до края на хидролиза, отколкото в края на процеса, тъй като някои прости пептиди може да не дават лилаво оцветяване с биуретова реакция (вж. П. Ето защо, след като посочва негативната реакция биуретова за протеин хидролиза трябва да продължи допълнително с 1 - 2 час, и едва след това може да се смята за завършена, [2].
След пълна хидролиза на протеина произведени количествено определяне на всяка от аминокиселините присъстват в хидролизата. За отделянето на аминокиселини най-често използваният метод на йонообменна хроматография. Като йонен обменник се използва обикновено sulfopolistirolny Catió-нишки. Сместа от аминокиселини се въвежда в горната част на колоната при рН 3; При тези обстоятелства, отделни аминокиселини са положително заредени. Аминокиселините под формата на катиони, адсорбирани върху sulfopolistirolnoy смола (съдържащ групата - SOjNa), заместващи част от натриеви йони и се задържат на материала на колона от електростатични сили. Очевидно е, че силата на сорбция аминокиселини увеличава с основната. След като сместа elgotsiya аминокиселини започва при постепенно повишаване на рН и йонната сила на буферния разтвор се пропуска през колоната. При тези условия, положителния заряд на аминокиселините постепенно се неутрализира и йонни взаимодействия са отслабени. кисели аминокиселини (глутаминова киселина и аспарагинова киселина) се отделят от колоната, а след това на неутрален и накрая сърцевината. С този метод е възможно да се разделят всички аминокиселини, които често се срещат в протеини, тъй като силата на сорбция смола аминокиселина зависи от йонни и нейонни взаимодействия от. Sulfopolistirolny катион адсорбира аминокиселини достатъчно селективни, така че всички неутрални аминокиселини, които не са разделени от йонообменна въпреки елуират от колоната при различни фракции. Индивидуални аминокиселини се елуират от колоната, се събира автоматично фракционен колектор. След това те се определя количествено чрез измерване на интензивността на цвета, образуван от действието на нинхидрин. [3]
Когато пълна хидролиза на протеини, смес от около двадесет аминокиселини. Тези аминокиселини са наречени а-аминокиселини; с обща формула: NH2 - Clffi - СООН. Изключение е пролин и окси-навес, принадлежащо към-имино. Тези аминокиселини могат да бъдат разделени в седем класа: 1) алифатни аминокиселини; 2) oksiaminokisloty; 3) дикарбоксилна аминокиселини и амиди; 4) двуосновен аминокиселина; 5) ароматна аминокиселина; 6) сяра-съдържащи аминокиселини; 7) имино. [4]
В резултат на общия протеин, получен чрез хидролиза на сложна смес от различни аминокиселини, които са трудни за разделяне и получаване на всяка аминокиселина в чиста форма. Ето защо, химически чисти аминокиселини, необходими за научни изследвания, с малки изключения, са много скъпи и трудни за материали за достъп. Получаване на аминокиселини чрез хидролиза на протеина е от полза само за малък брой аминокиселини, за предпочитане, съдържащи се в биологична субстрат използват такива. Например, аланин се получава чрез хидролиза на копринени линтери, цистин - чрез хидролиза на вълна. увеличаване на техническата приложение получава метод за хроматографско разделяне на аминокиселини смес Неотдавна (р [5].
Основните продукти на пълна хидролиза на сместа от протеини са а-аминокиселини, но процесът се извършва в етапа; при определени условия, по-специално под действието на ензими, протеини се смилат първоначално образуват по-прости, но в близост до тях от свойствата на веществото - пептони. [6]
Основните продукти на пълна хидролиза на сместа от протеини са а-аминокиселини, но процесът се извършва в етапа; при определени условия, по-специално под действието на ензими, протеини се смилат първоначално образуват по-прости, но в близост до тях от свойствата на веществото - пептони. Те са продукти от частична хидролиза на протеина и е установено, че представлява смес от различни сложност полипептиди (стр. Друг хидролиза на пептони се произвеждат дори прости полипептиди, дипептиди и накрая а-амино киселини. [7]
В резултат на пълна хидролиза на протеини, получени смеси аминокиселина. За тяхното изолиране, разделяне и определяне на редица методи. [8]
метод с електродиализа за отделяне на общ белтък хидролиза продукт има редица значителни предимства пред други методи, тъй като не изисква голяма инвестиция на време и труд, скъпо или трудно достъпни реагенти и също, че разделянето на протеин хидролизати в основната група направи с достатъчна пълнота. [9]
Възможно е, че в случай на значително количество азот пълна хидролиза на протеин не е част от амида може също да образува амоняк. Следователно, редица изследователи 114 - 16] Направен е опит да се разработи специфичен метод определяне на азот, част от амид. Доколкото ни е известно, до този момент никой не е успял да предложи ultramikrometod, които биха могли да бъдат използвани за тази цел. [10]
За определяне на N-края на пептидната верига се получава N-терминал производно-Ing амино киселинен пептид, който се идентифицира след пълното протеин хидролиза. [11]
За определяне на N-края на пептидната верига се получава М - произ-Ing терминален пептид амино киселина, която се идентифицира след пълното протеин хидролиза. [12]
Когато пълна хидролиза на протеини, получени аминокиселини. Много голям интерес е обратната реакция - образуването на амино киселини ди -, три и полипептиди. В тази реакция между молекулите на аминокиселинни с пептидни връзки. [13]
Животински организъм асимилира единствените свободни аминокиселини, но не протеини или пептиди. Когато има пълна хидролиза разграждане на протеини аминокиселини. [14]
Учениците трябва да знаят, че пълна хидролиза на хранителни протеини аминокиселинни не може да бъде постигнато само с един ензим, изисква съвместно действие на няколко стомашен сок ензими - пепсин, трипсин, химотрипсин хидролизиране естествени хранителни протеини големи пептиди и след това пептидаза хидролизиращи пептиди в аминокиселини , Учител определя ензимната хидролиза протеин - процесът на превръщане на хранителни протеини в аминокиселини, срещащи се в стомаха. [15]
Страница: 1 2