Методи за санитарно-микробиологични изследвания

Modern санитарен микробиология на индикация и идентификация санитарен илюстративен и патогени, при определяне на общия микробно натоварване на околната среда има за цел да се използват всички тези методи, които се използват в диагностични микробиологични лаборатории:

микроскопско - с указания и преброяване на живите микроорганизми в изпитвания обект;

бактериологично - отделяне на микроорганизмите и тяхната идентификация;

биология - инфекция на възприемчиви животни и ускорени изследвания методи (RIF и др.).

За разнообразни и пълни санитарен микробиологичните характеристики на околната среда, като цяло се използват сложни тестове. Те включват определяне на общия микробно съдържание (общ брой).

Общо микробно замърсяване на обекта, характеризиращ се с броя на микроорганизмите в 1 мл вода, течен или един грама твърдо вещество (продукт). Определяне на микробното число е косвен метод и дава индикация за възможността от замърсяване на обекта са проучени патогени.

Има два метода за определяне на микробно замърсяване:

- метод на директно броене под микроскоп;

- МЕТОД ЗА КОЛИЧЕСТВЕН сеялки различни разреждания на пробите и пробите от изпитвания обект.

Първият метод - метод на директно броене на микроорганизми в изпитвания обект се извършва под микроскоп в броячна камера Goryaeva или в клетки, специално предназначени за преброяване бактерии. Предварително изпитване на изпитвания обект се обработва до получаване на хомогенна суспензия. За по-добро отчитане на суспензията на бактерии в боята добавя.

Вторият метод - метод количествен засяване на материала върху твърда среда хранителен - използва най-често. От приготвени серийни десеткратни разреждания тествани течни или суспензия 1 мл се прехвърлят в стерилни петриеви блюда (започвайки от по-голямо разреждане, всяко разреждане се пипетира отделен) и се излива стопен и се охлажда до 0 ° С 45-50 обикновен агар.

Трябва да се отбележи, че както метод за определяне на общото съдържание на микроби включват относително и приблизителни. За да се получат сравними резултати при определяне на общия брой на микробен изследването се провежда в съответствие със стандарт, специфични за всеки отделен случай на процедурите уреждат от съответните държавни стандарти.

Идентифициране на във всеки случай обект разваляне на околната среда от схеми проведени проучвания, разработени за всяка група от микроорганизми.

Колиформени бактерии (колиформи)

Първо Escherihia коли (Е.коли) T.Esherih идентифициран през 1885 г изпражнения от пациента. Е.коли е постоянен жител на дебелина на човешките червата на бозайници, птици и риба. Сред бактерията Е. Coli, заедно с сапрофитни щамове на ентеропатогенните случи, че може да причини стомашно-чревни заболявания при хора и животни.

Морфология. Тези полиморфни пръти със заоблени краища, с дължина 1-3 микрона, Грам не образуващи спори, peritrichous мобилни (и фиксирани там). Капсула форма само патогенни серотипове (08, 09, 0101).

Културни свойства. Е.коли аероб или факултативно анаероб оптимална температура на растеж на 37-38 0 ° С, рН 7,0-7,4. Развива се добре на обикновени хранителни среди - MPA, МРВ, медии Ендо и Ливайн. На МРА 24 часа показват сочно, кръг с гладки ръбове и гладка повърхност (S-форма) на сиво-бяла колония. под формата на ВСН интензивно мътност на средата и се утаява на дъното на епруветката се разгражда лесно чрез разклащане.

Биохимични (ензимни) свойства в бактериите E.coli, са добре изразени, за разлика от други бактерии от семейството Enterobacteriaciae те ферментират лактоза да киселина и газ, който се използва за диференциация и идентификация.

От бактерии колиформени бактерии, класифицирани като рода 3: Escherihia, Citrobacter и Enterobacter. Последните два вида на близък, за разлика от вида на Escherihia те имат ограничена здравна стойност и не се разглежда като пресни показатели фекални замърсяване, тъй като те са по-често срещани в почвата, върху растения.

Всички предварително съществуващите класификации, платени голямо внимание на способността на Е. коли ферментират лактозата, тъй като се е смятало, че пръчки местообитание laktozootritsatelnyh са почвата, водата, растенията.

Поради неравномерното санитарен стойност показателно за индивидуална родове сега да се диференцират Escherihia коли произход от други фекални колиформи (Citrobacter и Enterobacter) комплекса на белязани съкращение признаци - TIMATS.

Т - тест температура (тест Ейкман);

А - тест indoloobrazovanie;

М - реакцията с метилово червено;

А - реакция на atsetimetilkarbinol (Voges-Proskauer реакция);

С - цитрат тест.

Признаците, принадлежащи към този комплекс, определят колиформи принадлежат към една от трите пола: Escherihia, Citrobacter и Enterobacter.

Изпитване при температурен. За да потвърдите, произхода на фекална изолати Escherihia коли, като способността му да ферментира uglevodypri 43-440S температура. превишаваща температурата на тялото, т.е. температура тест. Най рода Citrobacter и Enterobacter бактерии като способност не е така.

Образуването на индол. Същността на метода се свежда до факта, че 98% от изолатите Escherihia коли способна да разцепва киселина аминокиселината триптофан, който е включен в структурата на много протеини и пептони хранителна среда, с освобождаването на редица продукти, включително индол. оцветяване хранителна среда червен взаимодействие с реагенти, съдържащи parametilamidobenzaldegid. Бактериите от родовете Citrobacter и Enterobacter не индол форма.

Реакция с метилово червено (реакция Clark). Тази реакция се използва за определяне на интензитета на киселина в производството на ферментацията на глюкозата в средата. Както се използва индикатор метилово червено който променя цвета си от светло жълт на червено при рН 5.0 и по-долу (над рН 5.0 среда остава бледожълто). Смята се, че типичната Escherihia коли фермент глюкоза киселина газ и по-силно от Enterobacter.

Образование atsetilmetilkarbinola. В тази реакция, способността на микроорганизмите да се образува в среда с глюкоза atsetilmetilkarbinol. Неговата форма Enterobacter, а Escherihia коли и Citrobacter не притежават такава способност.

Способността на микроорганизми, за да се образува в среда с глюкоза atsetilmetilkarbinol определя със следната процедура: 5 мл 4-5 дневна възраст култура, отглеждани на пептонова вода с глюкоза, или Кларк среда, добавя същият обем от 40% разтвор на КОН. Ако има atsetilmetilkarbinola сряда боядисани в розов цвят.

Цитрат тест се основава на способността на някои микроорганизми асимилира лимонена киселина и нейните соли в средата.

Citrobacter и Enterobacter растат по цитрат медии и получил името tsitratpolozhitelnye бактерии и фекална произход Escherihia коли не използвайте цитрат и tsitratotritsatelnymi са.

ГОСТ провеждане цитрат тест е осигурена под контрола на мляко и млечни продукти върху околната среда Kozera.

Разлагане на лактоза. Всички предварително съществуващите класификации, платени голямо внимание на способността на Е. коли ферментират лактозата. Тази функция се прави разлика при определяне на стойностите на индикативните санитарни изследваните микроорганизми. Смятало се, че laktozootritsatelnye варианти се различават от лактозата, които са местообитание на почвата, водата, растенията.

Въпреки това, в човешки и животински черва и в околната среда, можете да намерите различни колиформи, които не са характерни за вида на Escherihia знаци. Това се дължи на факта, че Е.коли, под влиянието на различни фактори на околната среда е промяна на някои биологични свойства: загуба на способността да ферментира лактоза и въглехидрати да ферментира при 43 0 ° С и дори при 37 0 С

Следователно, тази характеристика нестабилна, така че в момента, когато етикета или за потвърждаване на произхода на фекални изолати на Е.коли, способността не само да ферментира лактоза и способността да ферментира въглехидратите при температура над температура на човешкото тяло и животни, т.е. температура тест.

сложни температурни тестове TIMATS и цитрат са основните, най-стабилната позволява диференциран CGB произход от фекални колиформени бактерии, живеещи в околната среда.

Използването на CGB като санитарно илюстративно

микроорганизми в храните санитарен микробиология

CGB-класика индикатор на фекално замърсяване на обекти на околната среда. В зависимост от целта на изследването се вземе предвид цялата група Ешерихия коли или отделни нейни представители. Колиформи по отношение на санитарните и хигиенни G.P.Kalina стойност (1968) се разделя на 3 подгрупи.

Първата подгрупа може да включва CGB в широкия смисъл на думата (грам-отрицателни пръти отглеждане на универсални среда) ферментиране глюкоза и лактоза или глюкоза само с образуването на К и T (киселина газ) при 37 0 С, които нямат подходяща санитарен стойност.

Втората група включва бактерии имат санитарно-експоненциален стойност и показващи неопределено време фекално замърсяване, те проявяват свойства, характерни за първата подгрупа, но ферментира глюкоза и лактоза или глюкоза при 43-45 0 ° С

Третата подгрупа включват бактерии са индикатори на прясно и сигурност фекално замърсяване (Е.коли). Те включват микроорганизми, имащи свойства, характерни за второто подмножество на бактерии, но не растат в среда с Koser цитратни соли и ферментиращи въглехидрати при 43-45 0 ° С

В момента много изследователи смятат, че при оценяване на качеството на водата и храната санитарен и индикативна стойност на продуктите са представителите на всяка от подгрупите на Е. коли, които могат да се размножават при 43 0 С и закваска глюкоза, за да образуват газ.

Ентеропатогенните Е.коли

В естествената си среда - съдържанието на дебелото черво - Е.коли е паразит и, разбира се, играе положителна роля.

В същото време, хранително отравяне, причинено от ентеропатогенни бактерии колиформа огнища са били многократно е описано в литературата. Изследвания на антигенната структура на E.coli, показват, че патогените на чревни заболявания са определени серотипове на Е.коли:

- телета често разпределени серогрупа 08, 09, 015, 0101 et Ал;

- прасета - 08, 09, 0137, 0138, и др;

- човек, 026, 055, 0111 и някои други серогрупи, които имат главно соматични О-антиген. Тези видове са ентеропатогенни.

Ентеропатогенните Е.коли причина заболяване: colibacteriosis телета, мастит при крави, остри чревни заболявания при деца. Ентеропатогенните на E.coli видове са разпределени и от здрави хора и животни. Налице е, че основната причина за заболяването може да бъде токсини, произвеждани от колиформени бактерии ин виво и следователно заболявания могат да се разглеждат като токсичност от отравяне.

Възможността за възникване на заболявания при хора зависи от няколко фактора - доза микроб болни възраст, състояние на тялото и др.

Обеззаразяване на подходящ условно месо. Ако има дегенеративни промени в мускулите, вътрешните органи и трупове за изхвърляне. При липса на такива промени, да се освободи само насочено вътрешности и трупове се използват за получаване на продукти, в процес, който осигурява за термична обработка.