Лабораторна диагностика на болестта шап

0 ° С се суши вирус продължава в продължение на 2 години.

Лабораторна диагностика yaschuraosnovana епизоотични данни, клинични признаци на заболяването, патологични изменения и лабораторни изследвания. Предполага шап причинява заболявания податливи животни, характеризираща се с появата на везикуларен обрив в устната кухина и на краищата на вимето, повишено слюноотделяне, хероин, възпрепятствано приемане и дъвчене храна, и когато се гледа от устата - афти откриване и ерозии. Освен това, обърнете внимание на дълго yaromotu, афти на ръба и в областта на mezhkopytnoy празнина, понякога spadenie възбудена обувки, афти по зърното и болка по време на последното доене и суче силно изразена Ним защитен рефлекс.

Ehpizootologicheskij диагноза - силно заразна, на изборния разгром само чифтокопитни животни. Методи шап лабораторна диагностика ще варира в зависимост от това дали е необходимо ранно откриване и идентификация видове (вариант) вирус (ранна диагностика), или откриване и идентифициране на специфичен шап AT оздравяващи животни (ретроспективно диагностика).

Лабораторна диагностика се основава на изолирането на вируса, дисплей, идентификация и типизиране на вируса на шап.

Изолиране на вируса. Ефикасността на изолиране на вируса от патологично материал е повишено използване на методи за пречистване и концентриране на вирус-съдържаща суспензии. Благодарение на лекотата на изпълнение, цена, и най-важното, възможността за бързи резултати, което позволява едновременно определяне на модел и вариант, принадлежащи епизоотична вирус, най-често се използва или RGC RDSK. Въпреки това, когато доставя количество от вирусен материал е недостатъчна за изследване или RNC не успее хемолиза или неспецифичен забавяне, после на boioprobu RNC (най-малко 2 глави) на възраст 18 месеца, въвеждане на 0,1 мл от получената суспензия; материал в няколко точки на езика лигавицата и трохи крайници; общ обем на тестов материал 2-3 мл. Появата на AFL на мястото на материала с последващо потвърждаване на RNC, показва наличието на товарната клетка. Методът обаче е скъпо и е свързано с риска от освобождаване на вируса извън институцията. Ето защо, в диагностичната практика, тя се използва много рядко. Повечето биоанализи използвани за мишки сукалчета 4-6 дневна възраст, морски свинчета, тежащи поне 500 грама и първична култура на клетки от бъбрек на телета, прасета, агнета, говеда и тироидни трансплантирани клетки - ВНК-21, IB-RS-2. Биоанализ при мишки е удобен и икономичен. ID5 на тествания щам върху малките сучене и добитъка, така. Мишки сукалчета са по-податливи на крака и на вируса на шап от морски свинчета. Все пак трябва да се има предвид, че оценката на резултатите от измерването на дозите за мишки нещастници често е трудно.

Морските свинчета са лесно заразени с интрадермално приложение на вирус-съдържащ материал в повърхността на ходилото на задните крака при доза от 0.2-0.5 мл. Заразяване на най-малко 5 гола. Основни лезии обикновено се появяват след 2-5 дни (както зреене). Средни лезии - везикули в устната кухина - обикновено се развиват след инфекция от щамове адаптирани към морски свинчета.

За изолиране на вирус най-често използваните първични култури от клетки от бъбрек трипсинизират прасета или телета. Наблюдение на заразените култури са 7 дни клетка mikroskopiruya тях ежедневно. Специфична дегенерация на клетки в потвърждава неговата специфичност към RNC показва наличието на товара клетки в тест материал.

Индикация и идентификация на вируса. Като бърз метод е вече широко се използва PCR. Този бърз и чувствителен метод за откриване на натоварване клетки в тъканите чрез ензимно amplifikaschi РНК полимераза ген.

RSKpo до 100% хемолиза. Той се използва за определяне на видове и подвидове (варианти) натоварване клетка, животно, причинени заболявания и за тестване на натоварване клетки промишлени щамове и ваксини в производството на лабораторни щамове в операция изследвания.

Антигенен връзка (R), повече от 70% показва, че щамовете на антигенни свойства идентични един на друг и принадлежат към същата изпълнение, от 10 до 70% - с различни изпълнения (подтипове) и по-малко от 10% - от различни видове.

РСК на хемолиза с 50%. Успешно се използва в изследователските лаборатории и биологични институции на промишлеността. Той разработил метод за изучаване на имунния статус на ваксинираните животни срещу шапа в ДБИ. Тя ви позволява да спе-cialist на нивото на регионалната ветеринарна лаборатория мониторинга за имунната съ-стои родословни по прост и надежден реакция.

PHA. Това е прост, бърз, чувствителен метод за идентифициране на товарната клетка. Според chuvst-pheno- реакция надвишава общоприет метод на въвеждане натоварване клетка на RNC 8-16 пъти. Същността на това се крие във факта, че по-натоварени еритроцити са слепени чрез контакт с шапа AG хомоложни тип.

Писането VYa.Opredelenie клетъчен тип натоварване чрез кръстосано имунитет. Тест на кръстосаното имунитет към RNC, за да се определи стандарт аксесоари поле клетката щам натоварване се извършва само в случай, че лабораторните тестове показват, нов тип натоварване на клетките, които не са били срещнали в страната. Определяне на вида на товара клетки чрез имуно-напречно Ordre възможно и морски свинчета.

Щамовете се считат за идентични, ако ваксината предпазва животните от развиващите генерализирана процес инфекция под щам използва. Ако Immunol кал щамове разлики ваксинирани животни, заразени с хетероложен щам, болни генерализирана форма на шап.

При определяне на вида на резки в товар клетъчна култура принадлежи към вида, серум срещу което предотвратява НПК. Един вариант на универсалната eritroimmunoadsorbtsii (UEIA), който позволява да се определи AG клетки натоварване в по-високи титри от RSK и ЗНЗ.

ELISA. Силно да се идентифицират както 146S-, товарни клетки 125 и компоненти. Този метод е 500 пъти по-чувствителни от RSK в изследването на проби афтозен епител. SET-Lena висока степен на специфичност и чувствителност на ELISA за идентифициране и типизирането на всички клетки натоварване 7 серотипове в епителни тъкани. Дебит висока чувствителност ELISA сандвич вариант (въз основа на алкална фосфатаза), което е ефективно-ност превъзхожда 207-219 пъти с хромогенни субстрати - в 4-64 пъти.

ELISA може да бъде полезно в системата на лабораторна диагностика на шап в диагностични щамове разследване-Ваня. За идентифициране на АТ към клетка натоварване ELISA може да се използва про-кръв суши върху филтърна хартия. Първоначалният обем на хепаринизирана кръв е 7.65 микролитра.