Анти-неутрофилите цитоплазмен антитяло при диагностицирането на системен васкулит

Лабораторни изследвания на пациенти със системна васкулит включва определяне на автоантитела, компонентите на системата на комплемента, клетъчни имунологични отговори, индикатори на ендотелна активация и остра фаза отговор.

За да се идентифицират инфекциозни агенти, свързани с развитието на васкулит, провежда бактериологични и серологични тестове.

Основният метод за определяне на анти-неутрофилите цитоплазмени антитела (ANCA) е реакцията на индиректен имунофлуоресцентен метод (ФРПИ) като се използва фиксиран неутрофили алкохол [A.Wiik, 1989], чрез които откриват автоантитела два основни типа: класически цитоплазмен ANCA (с-ANCA) и перинуклеарно ( р-ANCA).

В някои случаи, установена атипична дифузна светлина на неутрофили (а-ANCA). Наскоро, за определяне на анти-неутрофилите цитоплазмен антитяло използва вместо ФРПИ поточна цитометрия.

ANCA-до получаване на гранули цитоплазмен флуоресценция с голям интензитет към ядрото на неутрофили в периферията. Освен това, те реагират с моноцитната цитоплазмата, но еозинофили, лимфоцити или Нер-2 клетки се използват за определяне на антинуклеарни фактори (ANF). и обикновено специфично за PR-3.

р-ANCA причини светят перинуклеотиден неутрофили и моноцити, както и някои от най-често реагират с миелопероксидазната. Този тип на светлина е като артефакт, причинени от алкохол фиксиране на неутрофили. Лечение на алкохол позволява да се определи клетките на повърхността на стъклото и увеличава пропускливостта на молекули на клетъчната мембрана Ig, но води до разтваряне на липидната мембрана.

В резултат на това съдържанието на цитоплазмата на неутрофилите се разпространява около тях. Катионни молекули (лизозим, миелопероксидаза, еластаза, катепсин G и лактоферин) могат да се свързват с отрицателно заредени компоненти на ядрото на собствените си и съседните клетки и дават осветление наподобяващи ANF. Ето защо определянето на р-ANCA изисква определянето на подходящи контроли лимфоцити донор или Нер-2 клетки.

Наличието на р-ANCA може да се види само ако серум взаимодейства само с неутрофили (или моноцити) или ако титър на антитела, реагиращи с полиморфонуклеарни левкоцити, 2-пъти по-висока от свързване към лимфоцити антитялото. За да се изключи преразпределение катионни антигени предлага фиксирани клетки с формалдехид, но това води до увеличаване на автофлуоресценция, и до загуба на някои от антигенните детерминанти.

Наскоро, за определяне на анти-неутрофилите цитоплазмен антитяло разработен от ELISA при използване на имобилизиран върху твърда фаза киселинни екстракти цитоплазмата на неутрофили и гранули или "чисти" неутрофилите ензими (OL-3, миелопероксидаза и др.). Като цяло, приблизително 85% от пациентите с ANCA-да откриват антитела срещу PR-3 и 90% от пациентите с р-ANCA за миелопероксидаза антитяло открити.

Данните за разпространението и вида на анти-неутрофилите цитоплазмени антитела в човешки заболявания, са обобщени в Таблици 5.1 и 5.2.

Класически анти-неутрофилите цитоплазмен антитяло

Използване определение-ANCA като скринингов тест позволява да се увеличи откриваемостта на грануломатоза на Вегенер, особено в ранните стадии на болестта при пациенти с ограничен заболяване и атипични форми или пресича angiitnymi синдроми.

В същото време, данните, отнасящи се до чувствителност-ANCA (анти-CR-3) за диагностициране на грануломатоза на Вегенер, смесени. ANCA чувствителност при това заболяване зависи от активността, разпространението на патологичния процес и неговата форма. В "първоначален" фаза варира от 50%), с лезии само горната и долните дихателни пътища, без признаци на васкулит, и до 100% - от пациенти с генерализирано васкулит на малките артерии [J.Cohen Tervaert др ,. 1989; B.Nolle и сътр., 1989].

Смята се, че анти-неутрофилите цитоплазмен антитяло може да реагира кръстосано с антигени Entamoeba histolytica или микроорганизъм, способен да индуцира освобождаването на неутрофилите ензими и по този начин индуцира синтеза на автоантитела.

Резултатите относно откриване на нивото на честота и анти-неутрофилите цитоплазмени антитела, са представени в Таблица 5.3.

Таблица 5.3. Честотата на откриване на анти-неутрофилите цитоплазмени антитела при пациенти с Вегенер granulematoeom, микроскопски полиангиит, други съдови заболявания и донор

При сравняване на анти-неутрофилите цитоплазмен антитялото с други лабораторни параметри маркиран корелация между ANCA и ESR (г = 0.45; р<0,05) и IgM Болгария (r=0,46; р<0,05).

На изследване 17 пациенти с грануломатоза на Вегенер в динамика - 13 от тях по време на лечение, намаляване на титрите на антителата, които в 7 антинеутрофилни цитоплазмени антитела не бяха открити (фигура 5.2.).

Фиг. 5.2. Dynamics титър ANCA реакция на пациенти индиректна имунофлуоресценция грануломатоза на Вегенер (а) и микроскопски полиангиит (б)

На 6 души обостряне съпроводено с нарастване на титъра на антитела. В четири от тях се увеличава анти-неутрофилите цитоплазмен антитяло изпреварва влошаване на симптомите, съответно, 20 и 25 дни, 1 и 6 месеца.

Перинуклеарно анти-неутрофилите цитоплазмен антитяло

Атипични анти-неутрофилите цитоплазмен антитяло

Анти-неутрофилите цитоплазмен антитяло при ревматоиден артрит

Таблица 5.5. Честотата на откриване и характеризиране на ANCA при ревматоиден артрит

С 19 серуми, съдържаща антитяло лактоферин и само в един случай, антитялото да катепсин и миелопероксидаза. Използване на имуноблотинг демонстрира, че заедно с лактоферин, в някои пациенти серуми са налични антитела, насочени срещу неидентифициран полипептиди с молекулно тегло в 67/66 и 63/54 KD.

Анти-неутрофилите цитоплазмен антитяло в системен лупус еритематозус

В този случай, антитяло на лактоферин намерени в 39%> от пациентите. Тяхната синтез корелира с клиничната активност на SLE и "полумесец" на морфологично изследване на бъбреците. Умерено повишаване на концентрацията и MPS-отбелязано в 8 от 87 пациенти (9%), 6 от тях показва признаци serozity.

Анти-неутрофилите цитоплазмен антитяло с други ревматични заболявания

Nasonov EL Баранов AA Shilkina NP